1. СРЕДА ДЛЯ ALLOMONAS ENTERICA

Пептон 10.0 г

NaCl 20.0 г

Мясной экстракт 5.0 г*

Дистиллированная вода 1000.0 мл

pH 7.0

Автоклавировать при 121°C 15 мин.

*Мясной экстракт может быть заменен 3.0 г дрожжевого экстракта.

2. ДРОЖЖЕВАЯ ВОДА

Прессованные дрожжи 200.0 г

Водопроводная вода 1000.0 мл

Суспедировать 200.0 г прессованных дрожжей в 1000.0 мл Водопроводной воды, кипятить 30 минут. Горячим дважды профильтровать через бумажный фильтр (или центрифугировать).

Автоклавировать при 121°C 15 мин.

3. КАРТОФЕЛЬНЫЙ АГАР

Картофель 200.0 г

Агар 20.0 г

Водопроводная вода 1000.0 мл

200.0 г очищенного и нарезанного картофеля кипятить в 1 л водопроводной воды в течение часа, остудить, профильтровать через ватно-марлевый фильтр. Не использовать молодой картофель. Довести объем до 1 л, добавить агар.

pH 7.0

Автоклавировать при 121°C 15 мин.

4. СУСЛО-АГАР

Экстракт сусла (солодовый экстракт) 20.0 г

Агар 20.0 г

Дистиллированная вода 1000.0 мл

Автоклавировать при 121°C 15 мин.

5. МЯСО-ПЕПТОННЫЙ АГАР

Пептон 10.0 г

NaCl 5.0 г

Мясной экстракт 3.0 г

Агар 20.0 г

Дистиллированная вода 1000.0 мл

pH 7.0

Автоклавировать при 121°C 15 мин.

6. МЯСО-ПЕПТОННЫЙ БУЛЬОН

Пептон 10.0 г

NaCl 5.0 г

Мясной экстракт 3.0 г

Дистиллированная вода 1000.0 мл

pH 7.2-7.4

Автоклавировать при 121°C 15 мин.

7. ОВСЯНЫЙ АГАР (ОА)

Овсяные хлопья 30.0 г

Агар 15.0 г

Водопроводная вода 1000.0 мл

Варить 30.0 г овсяных хлопьев в 1000.0 мл водопроводной воды 20 мин, профильтровать через два слоя марли, довести объем до 1000.0 мл и внести агар.

Автоклавировать при 121° C 15 мин.

8. ПЕПТОННО-КУКУРУЗНЫЙ АГАР

Пептон 5.0 г

Кукурузный экстракт 5.0 г

Крахмал (растворимый) 10.0 г

NaCl 5.0 г

CaCl₂ 0.5 г

Агар 20.0 г

Водопроводная вода 1000.0 мл

pH 7.2-7.4

Автоклавировать при 121° C 15 мин.

9. СУСЛО-АГАР 7 Б

Сусло солодовое 7 Б 1000.0 мл

Агар 20.0 г

Довести pH до 7.0

Автоклавировать при 111°C 30 мин.

10. СУСЛО-АГАР 2 Б

Сусло солодовое 2 Б 1000.0 мл

Агар 20.0 г

Автоклавировать при 111°C 30 мин.

11. СУСЛО-АГАР 3.5 Б

Сусло солодовое 3.5 Б 1000.0 мл

Агар 20.0 г

Автоклавировать при 111°C 30 мин.

12. СРЕДА ЧАПЕКА

NaNO₃ 3.0 г

K₂HPO₄ 1.0 г

KCl 0.5 г

MgSO₄ × 7 H₂O 0.5 г

FeSO₄ × 7 H₂O 0.01 г

Сахароза 30.0 г

Агар 20.0 г

Дистиллированная вода 1000.0 мл

pH 6.0

Автоклавировать при 121°C 30 мин.

13. КАРТОФЕЛЬНО - ДЕКСТРОЗНЫЙ АГАР (КГА)

Картофель 200.0 г

Глюкоза 20.0 г

Агар 20.0 г

Водопроводная вода 1000.0 мл

200.0 г очищенного и нарезанного картофеля кипятить в 1 л водопроводной воды в течение часа, остудить, профильтровать через ватно-марлевый фильтр. Не использовать молодой картофель. Довести объем до 1 л, добавить агар.

pH 6.5-7.0

Автоклавировать при 121°C 15 мин.

14. КАРТОФЕЛЬНО - МОРКОВНЫЙ АГАР (PCA)

Картофель 20.0 г

Тертая морковь 20.0 г

Агар 20.0 г

Водопроводная вода 1000.0 мл

20.0 г очищенного и нарезанного картофеля и 20.0 г тертой моркови кипятить в 1 л водопроводной воды в течение часа, остудить, профильтровать через ватно-марлевый фильтр. Не использовать молодой картофель. Довести объем до 1 л, добавить агар.

pH 7.0-7.1

Автоклавировать при 121°C 15 мин.

15. СРЕДА LB

Триптон 10.0 г

Дрожжевой экстракт 5.0 г

NaCl 10.0 г

Водопроводная вода 1000.0 мл

pH 7.5

Автоклавировать при 121°C 15 мин.

16. YT СРЕДА

Триптон 8.0 г

Дрожжевой экстракт 5.0 г

NaCl 5.0 г

Водопроводная вода 1000.0 мл

pH 7.0

Автоклавировать при 121°C 15 мин.

17. ГЛЮКОЗО-ПЕПТОННЫЙ АГАР

Глюкоза 40.0 г

Пептон 10.0 г

Дрожжевой экстракт 5.0 г

Агар 20.0 г

Дистиллированная вода 1000.0 мл

pH 7.0

Автоклавировать при 111°C 30 мин.

18. ГЛЮКОЗО - ПЕПТОННЫЙ АГАР С 5% NaCl

Глюкоза 40.0 г

Пептон 10.0 г

Дрожжевой экстракт 5.0 г

NaCl 50.0 г

Агар 20.0 г

Дистиллированная вода 1000.0 мл

Автоклавировать при 111°C 30 мин.

19. СУСЛО-АГАР 7 Б С 5% NaCl

Сусло солодовое 7 Б 1000.0 мл

NaCl 50.0 г

Агар 20.0 г

Автоклавировать при 111°C 30 мин.

20. СРЕДА ЛИСКЕ

Mn-ацетат 0.1 г

Агар 15.0 г

Дистиллированная вода 1000.0 мл

Автоклавировать при 111°C 30 мин.

21. МАННИТНЫЙ АГАР С ДРОЖЖЕВОЙ ВОДОЙ

Маннит 10.0 г

Агар 15.0 г

Дрожжевая вода 100.0 мл

Водопроводная вода 900.0 мл

Приготовление дрожжевой воды: суспедировать 200.0 г прессованных дрожжей в 1000.0 мл водопроводной воды, кипятить 30 минут. Горячим дважды профильтровать через бумажный фильтр (или центрифугировать).

Автоклавировать при 121°C 15 мин.

22. СУСЛО-АГАР 3.5 Б С 60% САХАРОЗЫ

Сусло солодовое 3.5 Б 1000.0 мл

Сахароза 600.0 г

Агар 20.0 г

Автоклавировать при 121°C 15 мин.

23. СУСЛО-АГАР 3.5 Б С 40% САХАРОЗЫ

Сусло солодовое 3.5 Б 1000.0 мл

Сахароза 400.0 г

Агар 20.0 г

Автоклавировать при 121°C 15 мин.

24. СУСЛО-АГАР 3.5 Б С 20% САХАРОЗЫ

Сусло солодовое 3.5 Б 1000.0 мл

Сахароза 200.0 г

Агар 20.0 г

Автоклавировать при 121°C 15 мин.

25. СУСЛО-АГАР 3.5 Б С ФИЛЬТРОВАЛЬНОЙ БУМАГОЙ

Сусло солодовое 3.5 Б 1000.0 мл

Агар 20.0 г

Автоклавировать при 121°C 15 мин.

Кружки или полоски фильтровальной бумаги стерилизовать в сухожаровом шкафу и пропитать стерильной средой.

26. НАВОЗНЫЙ АГАР

Конский навоз 100-125 г

Агар 25.0 г

Дистиллированная вода 1000.0 мл

pH 6.5-7.0

Кипятить навоз в 1000.0 мл воды 10 мин, через 16-20 часов профильтровать через 1-2 слоя фильтровальной бумаги, довести объем до 1 л, внести агар.

Автоклавировать при 121°C 15 мин.

27. ЛАКТОЗО - ПЕПТОННЫЙ АГАР

Пептон 10.0 г

Лактоза 10.0 г

Агар 15.0 г

Водопроводная вода 1000.0 мл

Автоклавировать при 121°C 15 мин.

28. ТРИПТОЗНЫЙ АГАР

Триптоза 20.0 г

Глюкоза 1.0 г

NaCl 5.0 г

Агар 15.0 г

Тиамин-HCl 0.005 г

Дистиллированная вода 1000.0 мл

Автоклавировать при 121°C 15 мин.

29. ГОРОХОВЫЙ АГАР

Желтый горох 100.0 г

K₂HPO₄ 0.5 г

Сахароза 10.0 г

Агар 20.0 г

Водопроводная вода 1000.0 мл

Горох разварить в 1000.0 мл воды, профильтровать через марлю, довести объем до 1 л, внести фосфат, сахарозу и агар.

Автоклавировать при 121°C 15 мин.

30. СРЕДА 1 ДЛЯ AZOTOBACTER

Глюкоза 5.0 г

Маннит 5.0 г

CaCl₂ × 2 H₂O 0.1 г

MgSO₄ × 7 H₂O 0.1 г

Na₂MoO₄ × 2 H₂O 5.0 мг

K₂HPO₄ 0.9 г

KH₂PO₄ 0.1 г

FeSO₄ × 7 H₂O 0.01 г

CaCO₃ 5.0 г

Агар 15.0 г

Дистиллированная вода 950.0 мл

pH 7.3

Автоклавировать при 121°C 15 мин. Глюкозу и маннит стерилизовать отдельно (в 50 мл воды) при 111°C 30 мин и внести в среду после автоклавирования.

31. КАПУСТНЫЙ АГАР

Капуста 50.0 г

Глюкоза 20.0 г

Пептон 10.0 г

Агар 20.0 г

Водопроводная вода 1000.0 мл

50.0 г капусты варить в 1000.0 мл воды, профильтровать, отвар довести водой до 1 л.

pH 7.0

Автоклавировать при 111°C 30 мин.

32. ТВОРОЖНЫЙ ПЕРЕВАР

3.0 кг творога залить 9000.0 мл дистиллированной воды, добавить 150.0 г сухого мицелия гриба Aspergillus terricola, взболтать, залить хлороформом, закупорить герметически пробкой. Переваривание вести при 37°C 10 дней, довести pH до 7.0 1 N NaOH. Готовый перевар должен содержать 400 мг% аминного азота и 300 мг% триптофана.

33. МЯСО-ПЕПТОННЫЙ АГАР С 0.2% МОЧЕВИНЫ

Пептон 10.0 г

NaCl 5.0 г

Мясной экстракт 3.0 г

Агар 20.0 г

Дистиллированная вода 1000.0 мл

pH не доводить.

Автоклавировать при 121°C 15 мин.

10.0 мл стерилизованного фильтрованием 20% раствора мочевины внести в стерильную среду, охлажденную до 55-60° C, перемешать и немедленно разлить.

34. ПОЧВЕННЫЙ ЭКСТРАКТ

Садовую почву, богатую органическим материалом, высушить на воздухе, измельчая и перемешивая. Просеять через сито с крупными ячейками. 40 г почвы смешать с 960.0 мл водопроводной воды. Автоклавировать при 121°C 1 час, автоклав оставить закрытым на несколько часов. Экстракт профильтровать через бумажный фильтр. Фильтрат автоклавировать при 121°C 20 минут и отстаивать в течение 2-х недель или более. Прозрачную надосадочную жидкость декантировать и использовать для приготовления питательных сред.

35. NITROBACTER СРЕДА 1

Раствор 1 (см. ниже) 0.5 мл

Раствор 2 (см. ниже) 0.5 мл

Раствор 3 (см. ниже) 1.0 мл

Раствор 4 (см. ниже) 0.5 мл

Раствор 5 (см. ниже) 0.5 мл

Раствор 6 (см. ниже) 0.1 мл

Дистиллированная вода до 1000.0 мл

Раствор 1:

CaCl₂ 2.0 г

Дистиллированная вода 100.0 мл

Раствор 2:

MgSO₄ × 7 H₂O 20.0 г

Дистиллированная вода 100.0 мл

Раствор 3:

Железо хелатное 0.1 г

Дистиллированная вода 100.0 мл

Раствор 4:

Na₂MoO₄ 0.1 г

MnCl₂ × 4 H₂O 0.2 г

CoCl₂ × 6 H₂O 0.0 2 г

ZnSO₄ × 7 H₂O 0.1 г

CuSO₄ × 5 H₂O 0.02 г

Дистиллированная вода 1000.0 мл

Раствор 5:

NaNO₃ 41.4 г

Дистиллированная вода 100.0 мл

Раствор 6:

K₂HPO₄ 1.74 г

Дистиллированная вода 100.0 мл

Стерилизовать растворы отдельно автоклавированием при 121°C 15 мин.

36. СРЕДА ДЛЯ PROPIONIBACTERIUM

Дрожжевой экстракт 10.0 г

KH₂PO₄ 1.0 г

Na₂HPO₄ × 2 H₂O 3.0 г

Лактат Na(70%) 40.0 мл

Дистиллированная вода 1000.0 мл

pH 7.0

Автоклавировать при 121°C 15 мин.

37. СРЕДА КНОПА С ФИЛЬТРОВАЛЬНОЙ БУМАГОЙ

Ca(NO₃)₂ 1.0 г

KH₂PO₄ 0.25 г

MgSO₄ 0.25 г

FeCl₃ следы

Агар 20.0 г

Дистиллированная вода 1000.0 мл

pH 6.5-7.0

Автоклавировать при 121°C 15 мин.

Кружки или полоски фильтровальной бумаги стерилизовать в сухожаровом шкафу и пропитать стерильной средой.

38. СУСЛО-АГАР 7 Б С 12% NaCl

Сусло солодовое 7 Б 1000.0 мл

NaCl 120.0 г

Агар 20.0 г

Автоклавировать при 121°C 15 мин.

39. СУСЛО-АГАР 7 Б С 1% NaCl

Сусло солодовое 7 Б 1000.0 мл

NaCl 10.0 г

Агар 20.0 г

Автоклавировать при 121°C 15 мин.

40. СРЕДА 2 ДЛЯ AZOTOBACTER

KH₂PO₄ 0.2 г

K₂HPO₄ 0.8 г

MgSO₄ × 7 H₂O 0.2 г

CaSO₄ × 2 H₂O 0.1 г

FeCl₃ Следы

Na₂MoO₄ Следы

Дрожжевой экстракт 0.5 г

Сахароза 20.0 г

Агар 15.0 г

Дистиллированная вода 1000.0 мл

pH 7.2

41. СРЕДА ДЛЯ FLAVOBACTERIUM

Казеинат Na 2.0 г

Дрожжевой экстракт 0.5 г

Пептон 1.0 г

K₂HPO₄ 0.5 г

Агар 12.0 г

Дистиллированная вода 1000.0 мл

pH 7.4

Автоклавировать при 121°C 15 мин.

42. СРЕДА ДЛЯ PSEUDOMONAS SACCHAROPHILA

Раствор 1:

KH₂PO₄ 4.4 г

Na₂HPO₄ 4.8 г

NH₄Cl 1.0 г

MgSO₄ × 7 H₂O 0.5 г

Агар (при необходимости) 20.0 г

Дистиллированная вода 985.0 мл

Раствор 2:

Цитрат железа(III)-аммония 50.0 мг

CaCl₂ 5.0 мг

Дистиллированная вода 5.0 мл

Раствор 3:

Сахароза 1.0 г

Дистиллированная вода 10.0 мл

Стерилизовать растворы 1 и 2 отдельно автоклавированием при 121°C 15 мин, раствор 3 при 111°C 30 мин.

43. АГАР ДЛЯ МОРСКИХ ГЕТЕРОТРОФОВ

Морская соль 37.9 г

Дрожжевой экстракт 3.0 г

Пептон 10.0 г

Агар 20.0 г

Дистиллированная вода до 1000.0 мл

pH 7.2-7.4

Автоклавировать при 121°C 15 мин.

44. СРЕДА 1 ДЛЯ HALOBACTERIUM

Раствор 1:

NaCl 250.0 г

MgSO₄ 10.0 г

KCl 5.0 г

CaCl₂ × 6 H₂O 0.2 г

Водопроводная вода 800.0 мл

Раствор 2:

Дрожжевой экстракт 10.0 г

Триптон 2.5 г

Агар 20.0 г

Водопроводная вода 200.0 мл

Стерилизовать растворы отдельно автоклавированием при 121°C 15 мин.

45. ГОЛОДНЫЙ АГАР

Агар 20.0 г

Дистиллированная вода 1000.0 мл

Водопроводная вода 1000.0 мл

Автоклавировать при 121°C 15 мин.

46. СРЕДА SP ДЛЯ STIGMATELLA AURANTIACA

Раффиноза 1.0 г

Сахароза 1.0 г

Галактоза 1.0 г

Крахмал (растворимый) 5.0 г

Казитон 2.5 г

MgSO₄ × 7 H₂O 0.5 г

K₂HPO₄ 0.25 г

Агар 15.0 г

Дистиллированная вода 1000.0 мл

Автоклавировать при 111°C 30 мин.

47. CM + YE СРЕДА

Казаминовые кислоты 7.5 г

Дрожжевой экстракт 10.0 г

MgSO₄ × 7 H₂O 20.0 г

Цитрат Na 3.0 г

KCl 2.0 г

NaCl 200.0 г

Агар 15.0 г

FeSO₄ × 7 H₂O в 0.01N HCl (см. ниже) 1.0 мл

Дистиллированная вода 1000.0 мл

Раствор FeSO₄ × 7 H₂O:

HCl (0.01 N) 100.0 мл

FeSO₄ × 7 H₂O 4.98 г

pH 7.4 (довести 1N NaOH)

Стерилизовать растворы отдельно автоклавированием при 121°C 15 мин.

48. КАЗЕИНОВАЯ СРЕДА

NaCl 250.0 г

Гидролизат казеина 5.0 г

Дрожжевой экстракт 5.0 г

MgCl₂ × 6 H₂O 20.0 г

KCl 2.0 г

CaCl₂ × 2 H₂O 0.2 г

Агар 20.0 г

Дистиллированная вода 1000.0 мл

pH 7.4 (довести 1N NaOH)

Автоклавировать при 121°C 15 мин.

49. СРЕДА 2 ДЛЯ HALOBACTERIUM

Раствор 1:

NaCl 120.0 г

MgCl₂ × 6 H₂O 50.0 г

K₂SO₄ 5.0 г

CaCl₂ × 6 H₂O 0.2 г

Дистиллированная вода 500.0 мл

Раствор 2:

Триптон 5.0 г

Дрожжевой экстракт 5.0 г

Агар 20.0 г

Дистиллированная вода 500.0 мл

pH 6.8

Стерилизовать растворы отдельно автоклавированием при 121°C 15 мин.

50. ДРОЖЖЕВОЙ ГЛЮКОЗНЫЙ АГАР

Дрожжевой экстракт 5.0 г

Пептон 5.0 г

Глюкоза 10.0 г

Агар 20.0 г

Дистиллированная вода 1000.0 мл

pH 7.2

Автоклавировать при 111°C 30 мин.

51. КАЗИТОНОВЫЙ АГАР

Казитон 3.0 г

CaCl₂ × 2 H₂O 1.36 г

Агар 15.0 г

Дистиллированная вода 1000.0 мл

pH 7.2

Автоклавировать при 121°C 15 мин.

52. КАЗИТОНОВО-ДРОЖЖЕВОЙ АГАР

Казитон 3.0 г

CaCl₂ × 2 H₂O 1.36 г

Дрожжевой экстракт 1.0 г

Агар 15.0 г

Дистиллированная вода 1000.0 мл

pH 7.2

Автоклавировать при 121°C 15 мин.

53. СРЕДА ДЛЯ THERMUS THERMOPHILUS

Дрожжевой экстракт 4.0 г

Полипептон 8.0 г

NaCl 2.0 г

Агар 20.0 г

Дистиллированная вода 1000.0 мл

pH 7.0

Автоклавировать при 121°C 15 мин.

54. СРЕДА ДЛЯ DESULFOVIBRIO С 1% NaCl

K₂HPO₄ 0.01 г

NaCl 10.0 г

MgSO₄ 0.2 г

Лактат Na(40%) 4.0 мл

Раствор соли Мора (см. ниже) 1.0 мл

Дрожжевой экстракт 1.0 г

Аскорбиновая кислота 0.1 г

Агар 6.0 г

Дистиллированная вода 1000.0 мл

Раствор соли Мора:

Fe(NH₄)₂(SO₄)₂ × 6 H₂O 1.0 г

Дистиллированная вода 5.0 мл

Стерилизовать растворы отдельно автоклавированием при 121°C 15 мин.

55. СРЕДА ДЛЯ CAULOBACTER

Пептон 2.0 г

Дрожжевой экстракт 1.0 г

MgSO₄ × 7 H₂O 0.2 г

Агар 10.0 г

Водопроводная вода 1000.0 мл

Автоклавировать при 121°C 15 мин.

56. СРЕДА ДЛЯ CAULOBACTER С ГЛЮКОЗОЙ

Пептон 2.0 г

Дрожжевой экстракт 1.0 г

Глюкоза 2.0 г

Рибофлавин 1.0 мг

MgSO₄ × 7 H₂O 0.2 г

Агар 10.0 г

Водопроводная вода 1000.0 мл

pH 7.0

Автоклавировать при 111°C 30 мин.

57. МЯСО-ПЕПТОННЫЙ АГАР С 1% МОЧЕВИНЫ

Пептон 10.0 г

Мясной экстракт 3.0 г

NaCl 5.0 г

Мочевина 10.0 г

Агар 20.0 г

Дистиллированная вода 1000.0 мл

Автоклавировать при 121°C 15 мин.

50.0 мл стерилизованного фильтрованием 20% раствора мочевины внести в стерильную среду, охлажденную до 55-60°C, перемешать и немедленно разлить.

58. СРЕДА 3 ДЛЯ HALOBACTERIUM

Раствор 1:

Казаминовые кислоты 7.5 г

Дрожжевой экстракт 10.0 г

Цитрат Na 3.0 г

KCl 2.0 г

MgSO₄ × 7 H₂O 20.0 г

FeCl₃ следы

NaCl 250.0 г

Дистиллированная вода 750.0 мл

Раствор 2:

Агар 25.0 г

Дистиллированная вода 250.0 мл

pH 7.4

Стерилизовать растворы отдельно автоклавированием при 121°C 15 мин.

59. СРЕДА ДЛЯ PSEUDONOCARDIA THERMOPHILA

Пептон 2.5 г

Мясной экстракт 2.5 г

NaCl 2.5 г

Дрожжевой экстракт 0.1 г

Глюкоза 2.5 г

Сахароза 5.0 г

Кислотный гидролизат казеина 0.1 г

Агар 15.0 г

Дистиллированная вода 1000.0 мл

pH 7.2

Автоклавировать при 111°C 30 мин.

60. ЛЮПИНОВЫЙ АГАР

K₂HPO₄ 0.5 г

MgSO₄ × 7 H₂O 0.2 г

KH₂PO₄ 0.5 г

NaCl 0.2 г

CaSO₄ 0.1 г

(NH₄)₂MoO₄ Следы

Маннит 20.0 г

Люпиновая мука 10.0 г

Агар 20.0г

Дистиллированная вода 1000.0 мл

pH 7.0-7.2.

Автоклавировать при 111°C 20 min.

61. СРЕДА ДЛЯ АЗОТФИКСИРУЮЩИХ СПИРИЛЛ

K₂HPO₄ 0.1 г

KH₂PO₄ 0.4 г

MgSO₄ × 7 H₂O 0.2 г

NaCl 0.1 г

CaCl₂ 0.02 г

FeCl₃ 0.01 г

Na₂MoO₄ × 2 H₂O 0.002 г

Малат Na 5.0 г

Дрожжевой экстракт 50.0 мг

Дистиллированная вода 1000.0 мл

pH 7.2-7.4

Автоклавировать при 121°C 15 мин.

62. НАВОЗНЫЙ НАСТОЙ

Навоз коровий (свежий) 1.0 кг

Дистиллированная вода 3000.0 мл

Прокипятить, отжать через марлю и довести объем до 3000.0 мл.

63. СРЕДА С ТВОРОЖНЫМ ПЕРЕВАРОМ

Творожный перевар 61.0 мл

Навозный настой 184.0 мл

Ацетат Na 1.0 г

Агар 20.0 г

Водопроводная вода 735.0 мл

pH 7.8

Приготовление творожного перевара: 3.0 кг творога залить 9000.0 мл дистиллированной воды, добавить 150.0 г сухого мицелия гриба Aspergillus terricola, взболтать, залить хлороформом, закупорить герметически пробкой. Переваривание вести при 37°C 10 дней, довести pH до 7.0 1 N NaOH. Готовый перевар должен содержать 400 мг% аминного азота и 300 мг% триптофана.

Приготовление навозного настоя: смешать 1 кг коровьего навоза (свежего) с 3000.0 мл дистиллированной воды. Прокипятить, отжать через марлю и довести объем до 3000.0 мл.

Автоклавировать при 121°C 15 мин.

64. ПЕПТОННО-ДРОЖЖЕВОЙ АГАР

Пептон 5.0 г

Дрожжевой экстракт 3.0 г

KH₂PO₄ 0.2 г

Глюкоза 5.0 г

Агар 20.0 г

Водопроводная вода 1000.0 мл

pH 7.0-7.2

Автоклавировать при 111°C 30 мин.

65. ОВСЯНЫЙ АГАР ДЛЯ БАКТЕРИЙ

Овсяная мука 2.0 г

Пептон 0.5 г

NaCl 1.0 г

Галактоза 0.5 г

Агар 12.0г

Дистиллированная вода 1000.0 мл

pH 7.5

Автоклавировать при 111°C 30 мин.

66. СРЕДА С ПОЧВЕННЫМ ЭКСТРАКТОМ

Пептон 5.0 г

Мясной экстракт 3.0 г

Агар 15.0 г

Почвенный экстракт 250.0 мл

Водопроводная вода 750.0 мл

pH 7.0

Автоклавировать при 121°C 15 мин.

Приготовление почвенного экстракта: Садовую почву, богатую органическим материалом, высушить на воздухе, измельчая и перемешивая. Просеять через сито с крупными ячейками. 40 г почвы смешать с 960.0 мл водопроводной воды. Автоклавировать при 121°C 1 час, автоклав оставить закрытым на несколько часов. Экстракт профильтровать через бумажный фильтр. Фильтрат автоклавировать при 121°C 20 минут и отстаивать в течение 2-х недель или более. Прозрачную надосадочную жидкость декантировать и использовать для приготовления питательных сред.

67. МЯСО-ПЕПТОННЫЙ АГАР С МИКРОЭЛЕМЕНТАМИ

Пептон 10.0 г

NaCl 5.0 г

Мясной экстракт 3.0 г

Дрожжевой автолизат 2.0 г

Раствор микроэлементов (см. ниже) 1.0 мл

Дистиллированная вода 1000.0 мл

Агар 20.0 г

Раствор микроэлементов:

H₃BO₃ 5.0 г

(NH₄)₂MoO₄ 5.0 г

KI 0.5 г

NaBr 0.5 г

ZnSO₄ 0.2 г

Al₂(SO₄)₃ 0.3 г

Дистиллированная вода 1000.0 мл

pH 7.2-7.4

Автоклавировать при 121°C 15 мин.

68. МЯСО-ПЕПТОННЫЙ АГАР С 3% МОРСКОЙ СОЛИ

Пептон 10.0 г

NaCl 5.0 г

Морская соль 30.0 г

Мясной экстракт 3.0 г

Агар 20.0 г

Дистиллированная вода 1000.0 мл

pH 7.2-7.4

Автоклавировать при 121°C 15 мин.

69. МИНИМАЛЬНАЯ СРЕДА ДЭВИСА С ДОБАВКАМИ

Раствор 1:

Дрожжевой экстракт 2.0 г

Гидролизат казеина 2.0 г

K₂HPO₄ 7.0 г

KH₂PO₄ 3.0 г

Цитрат Na × 3 H₂O 0.5 г

MgSO₄ × 7 H₂O 0.1 г

(NH₄)₂SO₄ 1.0 г

Агар 15.0 г

Дистиллированная вода 980.0 мл

Раствор 2:

Глюкоза 2.0 г

Дистиллированная вода 20.0 мл

pH 7.0

Автоклавировать при 121°C 15 мин.

70. СРЕДА VY/2 ДЛЯ STIGMATELLA AURANTIACA

Пекарские дрожжи 5.0 г

CaCl₂ × 2 H₂O 1.36 г

Витамин B₁₂ 0.5 мг

Агар 15.0 г

Дистиллированная вода 1000.0 мл

pH 7.2

Автоклавировать при 111°C 30 мин. Витамин B₁₂ стерилизовать фильтрованием.

71. СРЕДА 1 ДЛЯ NITROSOCOCCUS

(NH₄)₂SO₄ 1.32 г

MgSO₄ × 7 H₂O 380.0 мг

CaCl₂ × 2 H₂O 20.0 мг

Железо хелатное (13% железа) 1.0 мг

Na₂MoO₄ × 2 H₂O 100.0 мкг

MnCl₂ × 4 H₂O 200.0 мкг

CoCl₂ × 6 H₂O 2.0 мкг

ZnSO₄ × 7 H₂O 100.0 мкг

K₂HPO₄ 8.7 мг

Феноловый красный (0.04%) 3.25 мл

Морская вода1000.0 мл

pH 7.5-7.8 (довести 1 N HCl)

Автоклавировать при 121°C 15 мин.

72. БОБОВЫЙ АГАР

Фасоль (горох или бобы) 100.0 г

K₂HPO₄ 0.5 г

Сахароза 10.0 г

Агар 20.0 г

Водопроводная вода 1000.0 мл

Бобы разварить в 1000.0 мл воды, профильтровать через марлю, довести объем до 1 л, внести фосфат, сахарозу и агар.

pH 7.2-7.4

Автоклавировать при 111°C 30 мин.

73. ГДТ-АГАР

Глюкоза 10.0 г

Дрожжевой экстракт 1.0 г

Триптоза 2.0 г

FeSO₄ × 7 H₂O 1.0 мг

Агар 20.0 г

Дистиллированная вода 1000.0 мл

pH 7.2

Автоклавировать при 111°C 30 мин.

74. БУЛЬОН ХОТТИНГЕРА

Бульон Хоттингера (HiMedia M1425) 23.0 г

Автоклавировать при 121°C 15 мин.

75. МОДИФИЦИРОВАННАЯ СРЕДА С ТВИНОМ-80 ДЛЯ МОЛОЧНОКИСЛЫХ БАКТЕРИЙ

Дрожжевой экстракт 5.0 г

Глюкоза 2.5 г

Мясной экстракт 1.2 г

Твин-80 1.0 мл

K₂HPO₄ 2.0 г

Ацетат Na 5.0 г

NH₄-цитрат 2.0 г

MgSO₄ × 7 H₂O 0.2 г

MnSO₄ × 4 H₂O 0.05 г

Агар 5.0 г

Дистиллированная вода 1000.0 мл

pH 6.0-6.5

Автоклавировать при 111°C 30 мин.

76. МИНЕРАЛЬНАЯ СРЕДА С ГЛЮКОЗОЙ

КNO₃ 0.2 г

MgSO₄ × 7H₂O 0.04 г

CaCl₂ 0.04 г

Na₂HPO₄ 0.3 г

KH₂PO₄ 0.14 г

Глюкоза 5.0 г

Раствор микроэлементов (см. ниже) 1.0 мл

Дистиллированная вода 1000.0 мл

Раствор микроэлементов:

Нитрилотриуксусная кислота 1.5 г

MgSO₄ × 7 H₂O 3.0 г

MnSO₄ × H₂O 0.5 г

NaCl 1.0 г

FeSO₄ × 7 H₂O 0.1 г

CoSO₄ × 7 H₂O 0.18 г

CaCl₂ × 2 H₂O 0.1 г

ZnSO₄ × 7 H₂O 0.18 г

CuSO₄ × 5 H₂O 0.01 г

KAl(SO₄)₂ × 12 H₂O 0.02 г

H₃BO₃ 0.01 г

Na₂MoO₄ × 2 H₂O 0.01 г

NiCl₂ × 6 H₂O 0.03 г

Na₂SeO₃ × 5 H₂O 0.3 мг

Na₂WO₄ × 2 H₂O 0.4 мг

Дистиллированная вода 1000.0 мл

Растворить нитрилотриуксусную кислоту и довести pH до 6.5 KOH, затем добавить остальные компоненты. pH 7.0 (довести KOH).

Основную среду и раствор микроэлементов стерилизовать отдельно при 121°C в течение 15 минут.

77. МЯСО-ПЕПТОННЫЙ АГАР С ВИТАМИНАМИ

Пептон 10.0 г

NaCl 5.0 г

Мясной экстракт 3.0 г

Дрожжевой экстракт 1.0 г

Глюкоза 1.0 г

Витамин B₁₂ 2.0 мг

Рибофлавин 2.0 мг

Агар 20.0 г

Дистиллированная вода 1000.0 мл

pH 7.0

Автоклавировать при 111°C 30 мин.

78. МЯСО-ПЕПТОННЫЙАГАР С 2% РАСТВОРИМОГО КРАХМАЛА

Пептон 10.0 г

Мясной экстракт 3.0 г

NaCl 5.0 г

Растворимый крахмал 20.0 г

Агар 20.0 г

Дистиллированная вода 1000.0 мл

pH 7.0

Автоклавировать при 121°C 15 мин.

79. МЯСО-ПЕПТОННЫЙ АГАР С 1% РАСТВОРИМОГО КРАХМАЛА

Пептон 10.0 г

Мясной экстракт 3.0 г

NaCl 5.0 г

Растворимый крахмал 10.0 г

Агар 20.0 г

Дистиллированная вода 1000.0 мл

pH 7.2

Автоклавировать при 121°C 15 мин.

80. МЯСО-ПЕПТОННЫЙ АГАР С 6% NaCl

Пептон 10.0 г

Мясной экстракт 3.0 г

NaCl 60.0 г

Агар 20.0 г

Дистиллированная вода 1000.0 мл

pH 7.0

Автоклавировать при 121°C 15 мин.

81. МЯСО-ПЕПТОННЫЙ АГАР С 1.8% МОРСКОЙ СОЛИ

Пептон 10.0 г

NaCl 5.0 г

Мясной экстракт 3.0 г

Морская соль 18.0 г

Агар 20.0 г

Дистиллированная вода 1000.0 мл

pH 7.0

Автоклавировать при 121°C 15 мин.

82. КАРТОФЕЛЬНЫЙ АГАР С 2% ГЛЮКОЗЫ

Картофель 200.0 г

Глюкоза 20.0 г

Агар 20.0 г

Водопроводная вода 1000.0 мл

pH 7.0

200.0 г очищенного и нарезанного картофеля кипятить в 1 л водопроводной воды в течение часа, остудить, профильтровать через ватно-марлевый фильтр. Не использовать молодой картофель. Довести объем до 1 л, добавить глюкозу и агар.

Автоклавировать при 111°C 30 мин.

83. СРЕДА ЛОПАТИНОЙ

Глюкоза 10.0 г

KH₂PO₄ 0.2 г

MgSO₄ × 7 H₂O 0.2 г

Тирозин 1.0 г

NaCl 0.2 г

CaSO₄ 0.1 г

Агар 20.0г

Дистиллированная вода 1000.0 мл

pH 7.0

Автоклавировать при 111°C 30 мин

84. СРЕДА С ГИДРОЛИЗАТОМ КАЗЕИНА

Гидролизат казеина 10.0 г

Глюкоза 5.0 г

п-Аминобензойная кислота 5.0 мкг

Агар 20.0 г

Дистиллированная вода 1000.0 мл

pH 7.0

Автоклавировать при 111°C 30 мин.

85. СРЕДА С БУЛЬОНОМ ХОТТИНГЕРА

Пептон 10.0 г

Дрожжевой автолизат 10.0 г

Бульон Хоттингера (HiMedia M1425) 0.23 г

Фосфатный буфер (см. ниже) 25.0 мл

Солевой раствор (см. ниже) 25.0 мл

Глюкоза 5.0 г

Дистиллированная вода 950.0 мл

Фосфатный буфер:

KH₂PO₄ 100.0 мг

K₂HPO₄ 100.0 мг

Дистиллированная вода 25.0 мл

Солевой раствор:

MgSO₄ × 7 H₂O 40.0 мг

NaCl 2.0 мг

FeSO₄ 2.0 мг

Дистиллированная вода 25.0 мл

pH 7.0

Стерилизовать растворы отдельно автоклавированием при 121°C 15 мин.

86. СРЕДА 1 ДЛЯ NITROSOLOBUS

CaCl₂ × 2 H₂O 0.02 г

MgSO₄ × 7 H₂O 0.2 г

Железо хелатное 1.0 мг

Na₂MoO₄ × 2 H₂O 0.1 мг

MnCl₂ × 4 H₂O 0.2 мг

CoCl₂ × 6 H₂O 2.0 мкг

CuSO₄ × 5 H₂O 0.02 мг

ZnSO₄ × 7 H₂O 0.1 мг

(NH₄)₂SO₄ 1.65 г

K₂HPO₄ 0.087 г

Феноловый красный 5.0 мг

Дистиллированная вода 1000.0 мл

pH 7.5 (довести 0.1 M NaHCO₃)

Автоклавировать при 121°C 15 мин.

87. СРЕДА 2 ДЛЯ NITROSOCOCCUS

NH₄Cl 0.5 г

KH₂PO₄ 0.05 г

CaCO₃ 5.0 г

Железо хелатное 1.0 мг

Феноловый красный (0.04%) 3.25 мл

Морская вода 1000.0 мл

pH 7.5-7.8 (довести 1 N HCl)

Автоклавировать при 121°C 15 мин.

88. СРЕДА ДЛЯ SPIRILLUM

Пептон 10.0 г

Янтарная кислота 1.0 г

(NH₄)₂SO₄ 1.0 г

MgSO₄ × 7 H₂O 1.0 г

FeCl₃ × 6 H₂O 2.0 мг

MnSO₄ × H₂O 2.0 мг

Дистиллированная вода 1000.0 мл

pH 6.8

Автоклавировать при 121°C 15 мин.

89. МОЛОЧНАЯ СРЕДА ДЛЯ ГАЛОФИЛОВ

Раствор 1:

Молоко 500.0 мл

Раствор 2:

MgSO₄ × 7 H₂O 10.0 г

KNO₃ 2.0 г

NaCl 200.0 г

Дистиллированная вода 100.0 мл

Раствор 3:

Пептон 5.0 г

Глицерин 10.0 г

Агар 25.0 г

Дистиллированная вода 400.0 мл

pH 8.4

Стерилизовать отдельно автоклавированием при 121°C 15 мин.

Теплое снятое молоко добавить в горячую смесь растворов 2 и 3.

90. СРЕДА ДЛЯ DESULFOVIBRIO GIGAS

Раствор 1:

KH₂PO₄ 1.0 г

NH₄Cl 0.5 г

MgSO₄ × 7 H₂O 0.4 г

Na₂SO₄ 2.0 г

CaCl₂ × 2 H₂O 0.1 г

Раствор микроэлементов SL-6: (см. ниже) 1.0 мл

2 M H₂SO₄ 1.0 мл

Na L-лактат 2.0 г

Дистиллированная вода 950.0 мл

Раствор 2:

NaHCO₃ 2.0 г

Дистиллированная вода 40.0 мл

Раствор 3:

Na₂S × 9 H₂O 300.0 мг

Дистиллированная вода 6.0 мл

Раствор витаминов:

Биотин 2.5 мг

Никотиновая кислота 25.0 мг

Тиамин-HCl 12.5 мг

п-Аминобензойная кислота 12.5 мг

Пантотенат кальция 6.5 мг

Пиридоксин-HCl 62.5 мг

Дистиллированная вода 1000.0 мл

Раствор микроэлементов SL-6:

ZnSO₄ × 7 H₂O 0.1 г

MnCl₂ × 4 H₂O 0.03 г

H₃BO₃ 0.3 г

CoCl₂ × 6 H₂O 0.2 г

CuCl₂ × 2 H₂O 0.01 г

NiCl₂ × 6 H₂O 0.02 г

Na₂MoO₄ 0.03 г

Дистиллированная вода 1000.0 мл

Стерилизовать растворы 1 и 3 отдельно в атмосфере N₂ при 121°C 15 мин, добавить 5.0 мл стерилизованного фильтрованием раствора витаминов к 1000.0 мл среды. Раствор 2 (стерилизованный при 121°C 15 мин) не подлежит длительному хранению.

pH 7.2

91. СРЕДА ДЛЯ THERMODESULFOBACTERIUM

Раствор 1:

Na₂SO₄ 3.0 г

NH₄Cl 1.0 г

MgCl₂ × 6 H₂O 0.2 г

KH₂PO₄ 0.3 г

Na₂HPO₄ × 12 H₂O 2.0 г

FeSO₄ × 7 H₂O 1.5 мг

Резазурин 1.0 мг

Дистиллированная вода 930.0 мл

Раствор 2:

Раствор микроэлементов (см. ниже) 10.0 мл

Раствор 3:

Дрожжевой экстракт 1.0 г

Дистиллированная вода 25.0 мл

Раствор 4:

Лактат Na4.0 г

Дистиллированная вода 25.0 мл

Раствор 5:

Na₂S × 9 H₂O 0.5 г

Дистиллированная вода 6.0 мл

Раствор 6:

Раствор витаминов (см. ниже) 5.0 мл

Раствор микроэлементов:

Нитрилотриуксусная кислота 12.8 г

FeCl₂ × 4 H₂O 0.2 г

MnCl₂ × 4 H₂O 0.1 г

CoCl₂ × 6 H₂O 0.17 г

CaCl₂ × 2 H₂O 0.1 г

ZnCl₂ 0.1 г

CuCl₂ 0.02 г

Na₂MoO₄ × 2 H₂O 0.01 г

NiCl₂ × 6 H₂O 0.026 г

NaCl 1.0 г

Na₂SeO₄ × 5 H₂O 0.02 г

Дистиллированная вода 1000.0 мл

Растворить нитрилотриуксусную кислоту, нейтрализуя раствор KOH, внести остальные соли. Довести объем до 1000.0 мл. Довести pH до 7.0, используя KOH.

Раствор витаминов:

Биотин 2.0 мг

Фолиевая кислота 2.0 мг

Пиридоксин-HCl 10.0 мг

Тиамин-HCl 5.0 мг

Рибофлавин 5.0 мг

Никотиновая кислота 5.0 мг

Ca DL-пантотенат 5.0 мг

Витамин B₁₂ 0.1 мг

п-Аминобензойная кислота 5.0 мг

Липоевая кислота 5.0 мг

Дистиллированная вода 1000.0 мл

Растворы 1, 3, 4 и 5 стерилизовать в атмосфере ×N₂ при 121°C 15 мин.

Раствор 6 стерилизовать фильтрованием. Перед внесением в основную среду раствор 5 нейтрализовать 1 N HCl.

pH 6.8-7.0

92. СРЕДА ДЛЯ DESULFOVIBRIO С ЛАКТАТОМ

Раствор 1:

K₂HPO₄ 0.5 г

NH₄Cl 1.0 г

CaCl₂ × 6 H₂O 0.1 г

MgSO₄ × 7 H₂O 2.0 г

Na₂SO₄ 1.0 г

Лактат Na5.0 г

Дрожжевой экстракт 1.0 г

Резазурин 0.01 г

Цистеин 0.5 г

Дистиллированная вода 950.0 мл

Раствор 2:

NaHCO₃ 4.0 г

Дистиллированная вода 40.0 мл

Раствор 3:

Na₂S × 9 H₂O 300.0 мг

Дистиллированная вода 6.0 мл

Раствор 4:

FeSO₄ × 7 H₂O 0.4 г

Дистиллированная вода 10.0 мл

pH 6.8

Стерилизовать все растворы отдельно автоклавированием при 121°C 15 мин. Раствор 1 перед стерилизацией довести до кипения, продувая газовой смесью из 97% N₂ и 3% H₂ и стерилизовать в атмосфере этой газовой смеси. Раствор 3 стерилизовать в атмосфере N₂.

93. СРЕДА 1 ДЛЯ AZOSPIRILLUM BRASILIENSE

Малат Ca 10.0 г

K₂HPO₄ 1.0 г

MgSO₄ × 7 H₂O 0.5 г

CaCl₂ × 2 H₂O 0.02 г

Дистиллированная вода 1000.0 мл

pH 6.5

Автоклавировать при 121°C 15 мин.

94. СРЕДА ДЛЯ БАКТЕРИЙ, ОКИСЛЯЮЩИХ CO

Na₂HPO₄ × 12 H₂O 4.5 г

KH₂PO₄ 0.75 г

NH₄Cl 1.5 г

MgSO₄ × 7 H₂O 0.2 г

CaCl₂ × 2 H₂O 0.03 г

Fe(NH₄)-цитрат 0.018 г

Агар (при необходимости) 1.2 г

Раствор микроэлементов SL-6 (см. ниже) 1.0 мл

Раствор витаминов (см. ниже) 10.0 мл

Дистиллированная вода 1000.0 мл

Раствор микроэлементов SL-6:

ZnSO₄ × 7 H₂O 0.1 г

MnCl₂ × 4 H₂O 0.03 г

H₃BO₃ 0.3 г

CoCl₂ × 6 H₂O 0.2 г

CuCl₂ × 2 H₂O 0.01 г

NiCl₂ × 6 H₂O 0.02 г

Na₂MoO₄ 0.03 г

Дистиллированная вода 1000.0 мл

Раствор витаминов:

Биотин 2.0 мг

Фолиевая кислота 2.0 мг

Пиридоксин-HCl 10.0 мг

Тиамин-HCl × 2 H₂O 5.0 мг

Рибофлавин 5.0 мг

Никотиновая кислота 5.0 мг

D-Ca-пантотенат 5.0 мг

Витамин B₁₂ 0.1 мг

п-Аминобензойная кислота 5.0 мг

Липоевая кислота 5.0 мг

Дистиллированная вода 1000.0 мл

pH 7.0

Автоклавировать при 121°C 15 мин, добавить стерилизованный фильтрованием раствор витаминов. Для хемоавтотрофного роста выращивать в атмосфере а) 20-80% CO₂ + 10% O₂ + 0-70% N₂ или б) 70% H₂ + 20% O₂ + 10% CO₂ с добавлением 2.5 г NaHCO₃ на литр среды. Для хемоорганотрофного роста добавить 3.0 г Na-ацетата и инкубировать в обычной атмосфере.

95. СРЕДА ДЛЯ DESULFOTOMACULUM ACETOXIDANS

Раствор 1:

NaCl 1.17 г

MgCl₂ × 6 H₂O 0.4 г

KCl 0.3 г

CaCl₂ × 2 H₂O 0.15 г

NH₄Cl 0.27 г

KH₂PO₄ 0.2 г

Na₂SO₄ 2.84 г

Ацетат Na 1.4 г

Бутират Na 1.4 г

Дрожжевой экстракт 1.0 г

Раствор витаминов (см. ниже) 1.0 мл

Раствор микроэлементов 1.0 мл (см. ниже)

Дистиллированная вода 940.0 мл

Раствор 2:

Na₂S × 9 H₂O 0.36 г

Дистиллированная вода 10.0 мл

Раствор бикарбоната Na для подщелачивания:

NaHCO₃ 4.5 г

Дистиллированная вода 50.0 г

Раствор витаминов:

п-Аминобензойная кислота 4.0 мг

D(+)-Биотин 1.0 мг

Тиамин-HCl 10.0 мг

Дистиллированная вода 100.0 мл

Раствор микроэлементов:

FeCl₂ × 4 H₂O 1.5 г

ZnCl₂ 68.0 мг

MnCl₂ × 4 H₂O 100.0 мл

H₃BO₃ 62.0 мг

CoCl₂ × 6 H₂O 120.0 мл

Na₂MoO₄ × 2 H₂O 24.0 мг

HCl (0.05 M) 1000.0 мл

pH 7.0-7.2

Раствор 1 прокипятить перед стерилизацией несколько минут, продувая газовой смесью 80% N₂ и 20% CO₂, добавляя раствор бикарбоната Na до 6.9 - 7.1. Раствор 1 стерилизовать в атмосфере этой газовой смеси при 121°C 15 мин. Раствор 2 стерилизовать в атмосфере 100% N₂ при 121°C 15 мин. Раствор витаминов стерилизовать фильтрованием.

96. СРЕДА ДЛЯ DESULFONEMA LIMICOLA

Раствор 1:

Na₂SO₄ 3.0 г

NaCl 13.0 г

MgCl₂ × 6 H₂O 2.2 г

CaCl₂ × 2 H₂O 0.15 г

KCl 0.5 г

KH₂PO₄ 0.2 г

NH₄Cl 0.3 г

Дистиллированная вода 850.0 мл

Раствор 2:

Раствор микроэлементов SL-10 (см. ниже) 1.0 мл

Раствор 3:

NaHCO₃ 5.0 г

Дистиллированная вода 100.0 мл

Раствор 4:

Ацетат Na × 3 H₂O 2.5 г

Дистиллированная вода 10.0 мл

Раствор 5:

Сукцинат Na 0.1 г

Дистиллированная вода 1.0 мл

Раствор 6:

Раствор витаминов (см. ниже) 5.0 мл

Раствор 7:

AlCl₃ × 6 H₂O 245.0 мг

Дистиллированная вода 5.0 мл

Раствор 8:

Na₂CO₃ 170.0 мг

Дистиллированная вода 1.6 мл

Раствор 9:

Осветленная жидкость рубца 20.0 мл

Раствор 10:

Na₂S × 9 H₂O 0.4 мг

Дистиллированная вода 10.0 мл

Раствор микроэлементов SL-10:

HCl (25%; 7.7 M) 10.0 мл

FeCl₂ × 4 H₂O 1.5 г

ZnCl₂ 70.0 мг

MnCl₂ × 4 H₂O 100.0 мг

H₃BO₃ 6.0 мг

CoCl₂ × 6 H₂O 190.0 мг

CuCl₂ × 2 H₂O 2.0 мг

NiCl₂ × 6 H₂O 24.0 мг

Na₂MoO₄ × 2 H₂O 36.0 мг

Дистиллированная вода 990.0 мл

Раствор витаминов:

Биотин 2.0 мг

Фолиевая кислота 2.0 мг

Пиридоксин-HCl 10.0 мг

Тиамин-HCl 5.0 мг

Рибофлавин 5.0 мг

Никотиновая кислота 5.0 мг

Ca DL-пантотенат 5.0 мг

Витамин B₁₂ 0.1 мг

п-Аминобензойная кислота 5.0 мг

Липоевая кислота 5.0 мг

Дистиллированная вода 1000.0 мл

pH 7.6

Приготовление раствора микроэлементов: FeCl₂ × 4 H₂O растворить в HCl, затем раствор влить в воду и растворить соли в указанной последовательности.

Раствор 1 кипятить несколько минут, охладить до комнатной температуры, продуть смесью 80% N₂ + 20% CO₂ до pH 6, автоклавировать в атмосфере этой же газовой смеси. Растворы 2, 3, 5, 9, и 10 автоклавировать отдельно в атмосфере N₂ при 121°C 15 мин, раствор 3 стерилизовать фильтрованием и продуть 80% N₂ + 20% CO₂ для удаления растворенного кислорода. Раствор 6 продуть N₂ и стерилизовать фильтрованием. Растворы 7 и 8 смешать перед стерилизацией при 121°C 15 мин. Все растворы внести в стерильный охлажденный раствор 1 в указанной последовательности. Готовую среду разлить во флаконы для культивирования анаэробно в атмосфере 80% N₂ + 20% CO₂.

97. СРЕДА ДЛЯ DESULFONEMA MAGNUM

Раствор 1:

Na₂SO₄ 3.0 г

NaCl 21.0 г

MgCl₂ × 6 H₂O 5.5 г

CaCl₂ × 2 H₂O 1.35 г

KCl 0.5 г

KH₂PO₄ 0.2 г

NH₄Cl 0.3 г

Дистиллированная вода 850.0 мл

Раствор 2:

Раствор микроэлементов (см. ниже) 1.0 мл

Раствор 3:

NaHCO₃ 2.5 г

Дистиллированная вода 100.0 мл

Раствор 4:

Бензоат Na 0.6 г

Дистиллированная вода 10.0 мл

Раствор 5:

Сукцинат Na 0.1 г

Дистиллированная вода 1.0 мл

Раствор 6:

Раствор витаминов (см. ниже) 5.0 мл

Раствор 7:

AlCl₃ × 6 H₂O 245.0 мг

Дистиллированная вода 5.0 мл

Раствор 8:

Na₂CO₃ 170.0 мг

Дистиллированная вода 1.6 мл

Раствор 9:

Осветленная жидкость рубца 20.0 мл

Раствор 10:

Na₂S × 9 H₂O 0.4 мг

Дистиллированная вода 10.0 мл

Раствор микроэлементов:

HCl (25%; 7.7 M) 10.0 мл

FeCl₂ × 4 H₂O 1.5 г

ZnCl₂ 70.0 мг

MnCl₂ × 4 H₂O 100.0 мг

H₃BO₃ 6.0 мг

CoCl₂ × 6 H₂O 190.0 мг

CuCl₂ × 2 H₂O 2.0 мг

NiCl₂ × 6 H₂O 24.0 мг

Na₂MoO₄ × 2 H₂O 36.0 мг

Na₂SeO₃ 3.0 мг

Дистиллированная вода 990.0 мл

Раствор витаминов:

Биотин 2.0 мг

Фолиевая кислота 2.0 мг

Пиридоксин-HCl 10.0 мг

Тиамин-HCl 5.0 мг

Рибофлавин 5.0 мг

Никотиновая кислота 5.0 мг

Ca DL-пантотенат 5.0 мг

Витамин B₁₂ 0.1 мг

п-Аминобензойная кислота 5.0 мг

Липоевая кислота 5.0 мг

Дистиллированная вода 1000.0 мл

pH 7.6

Приготовление раствора микроэлементов: FeCl₃ × 4 H₂O растворить в HCl, затем раствор влить в воду и растворить соли в указанной последовательности.

Раствор 1 кипятить несколько минут, охладить до комнатной температуры, продуть смесью 80% N₂ + 20% CO₂ до pH 6, автоклавировать в атмосфере этой же газовой смеси. Растворы 2, 3, 5, 9, и 10 автоклавировать отдельно в атмосфере N₂ при 121°C 15 мин, раствор 3 продуть 80% N₂ + 20% CO₂ для удаления растворенного кислорода и стерилизовать фильтрованием. Раствор 6 продуть N₂ и стерилизовать фильтрованием. Растворы 7 и 8 смешать перед стерилизацией и автоклавировать при 121°C 15 мин. Все растворы внести в стерильный охлажденный раствор 1 в указанной последовательности. Готовую среду разлить во флаконы для культивирования анаэробно в атмосфере 80% N₂ + 20% CO₂.

98. СУСЛО-АГАР 7 B С 2% CaCO₃

Сусло солодовое 7 Б 1000.0 мл

CaCO₃ 20 г

Агар 20.0 г

Автоклавировать при 111°C 30 мин.

99. СРЕДА YE

Дрожжевой экстракт 30.0 г

Этанол 20.0 мл

Агар 20.0 г

Дистиллированная вода 1000.0 мл

pH 5.0-6.0

Автоклавировать при 121°C 15 мин без этанола.

Стерилизованный фильтрованием этанол нанести на поверхность скошенного агара (0.1 мл/пробирку).

100. SAP-2 АГАР

Триптон 1.0 г

Дрожжевой экстракт 1.0 г

Агар 20.0 г

Морская вода 1000.0 г

pH 7.4

Автоклавировать при 121°C 15 мин.

101. ПОЧВЕННЫЙ АГАР

Дрожжевой экстракт 2.0 г

Триптон 1.0 г

Ацетат Na 1.0 г

Почвенный экстракт 50.0 мл

Агар 20.0 г

Дистиллированная вода 950.0 мл

pH 7.4

Автоклавировать при 121°C 15 мин.

Приготовление почвенного экстракта: Садовую почву, богатую органическим материалом, высушить на воздухе, измельчая и перемешивая. Просеять через сито с крупными ячейками. 40 г почвы смешать с 960.0 мл водопроводной воды. Автоклавировать при 121°C 1 час, автоклав оставить закрытым на несколько часов. Экстракт профильтровать через бумажный фильтр. Фильтрат автоклавировать при 121°C 20 минут и отстаивать в течение 2-х недель или более. Прозрачную надосадочную жидкость декантировать и использовать для приготовления питательных сред.

102.СРЕДА ДЛЯ DESULFOBACTER POSTGATEI

Раствор 1:

Na₂SO₄ 3.0 г

KH₂PO₄ 0.2 г

NH₄Cl 0.3 г

NaCl 7.0 г

MgCl₂ × 6 H₂O 1.3 г

KCl 0.5 г

CaCl₂ × 2 H₂O 0.15 г

Дистиллированная вода 870.0 мл

Раствор 2:

Раствор микроэлементов SL-10 (см. ниже) 1.0 мл

Раствор 3:

NaHCO₃ 5.0 г

Дистиллированная вода 100.0 мл

Раствор 4:

Ацетат Na × 3 H₂O 2.5 г

Дистиллированная вода 10.0 мл

Раствор 5:

Раствор витаминов (см. ниже) 10.0 мл

Раствор 6:

Na₂S × 9 H₂O 0.4 г

Дистиллированная вода 10.0 мл

Раствор микроэлементов SL-10:

HCl (25%; 7.7 M) 10.0 мл

FeCl₂ × 4 H₂O 1.5 г

ZnCl₂ 70.0 мг

MnCl₂ × 4 H₂O 100.0 мг

H₃BO₃ 6.0 мг

CoCl₂ × 6 H₂O 190.0 мг

CuCl₂ × 2 H₂O 2.0 мг

NiCl₂ × 6 H₂O 24.0 мг

Na₂MoO₄ × 2 H₂O 36.0 мг

Дистиллированная вода 990.0 мл

Раствор витаминов:

Биотин 2.0 мг

Фолиевая кислота 2.0 мг

Пиридоксин-HCl 10.0 мг

Тиамин-HCl 5.0 мг

Рибофлавин 5.0 мг

Никотиновая кислота 5.0 мг

Ca DL-пантотенат 5.0 мг

Витамин B₁₂ 0.1 мг

п-Аминобензойная кислота 5.0 мг

Липоевая кислота 5.0 мг

Дистиллированная вода 1000.0 мл

pH 7.1-7.4

Раствор 1 прокипятить перед стерилизацией несколько минут, продувая смесью 80% N₂ и 20% CO₂, раствором бикарбоната Na довести pH до 6.9-7.1. Раствор 1 стерилизовать в атмосфере этой газовой смеси при 121°C 15 мин. Растворы 2, 4 и 6 стерилизовать в атмосфере 100% N₂ при 121°C 15 мин. Раствор витаминов стерилизовать фильтрованием.

103. СРЕДА ДЛЯ DESULFOBULBUS

Раствор 1:

Na₂SO₄ 3.0 г

KH₂PO₄ 0.2 г

NH₄Cl 0.3 г

NaCl 1.0 г

MgCl₂ × 6 H₂O 0.4 г

KCl 0.5 г

CaCl₂ × 2 H₂O 0.15 г

Дистиллированная вода 870.0 мл

Раствор 2:

Раствор микроэлементов SL-10 (см. ниже) 1.0 мл

Раствор 3:

NaHCO₃ 5.0 г

Дистиллированная вода 100.0 мл

Раствор 4:

Пропионат Na 1.5 г

Дистиллированная вода 10.0 мл

Раствор 5:

Раствор витаминов (см. ниже) 10.0 мл

Раствор 6:

Na₂S × 9 H₂O 0.4 г

Дистиллированная вода 10.0 мл

Раствор микроэлементов SL-10:

HCl (25%; 7.7 M) 10.0 мл

FeCl₂ × 4 H₂O 1.5 г

ZnCl₂ 70.0 мг

MnCl₂ × 4 H₂O 100.0 мг

H₃BO₃ 6.0 мг

CoCl₂ × 6 H₂O 190.0 мг

CuCl₂ × 2 H₂O 2.0 мг

NiCl₂ × 6 H₂O 24.0 мг

Na₂MoO₄ × 2 H₂O 36.0 мг

Дистиллированная вода 990.0 мл

Раствор витаминов:

Биотин 2.0 мг

Фолиевая кислота 2.0 мг

Пиридоксин-HCl 10.0 мг

Тиамин-HCl 5.0 мг

Рибофлавин 5.0 мг

Никотиновая кислота 5.0 мг

Ca DL-пантотенат 5.0 мг

Витамин B₁₂ 0.1 мг

п-Аминобензойная кислота 5.0 мг

Липоевая кислота 5.0 мг

Дистиллированная вода 1000.0 мл

pH 7.1-7.4

Раствор 1 прокипятить перед стерилизацией несколько минут, продувая смесью 80% N₂ и 20% CO₂, раствором бикарбоната Na довести pH до 6.9-7.1. Раствор 1 стерилизовать в атмосфере этой газовой смеси при 121°C 15 мин. Растворы 2, 4 и 6 стерилизовать в атмосфере 100% N₂ при 121°C 15 мин. Раствор витаминов стерилизовать фильтрованием.

104. СРЕДА 1 ДЛЯ MACROMONAS

Ацетат Na 1.0 г

CaCl₂ × 2 H₂O 0.1 г

Кислотный гидролизат казеина 0.1 г

Дрожжевой экстракт 0.1 г

FeS 0.2 г

Агар 1.0 г

Дистиллированная вода 1000.0 мл

pH 7.2-7.4

Суспензию FeS готовить из эквимолярных количеств Na₂S × 9 H₂O и FeSO₄, промыть свежепрокипяченой дистиллированной воды под током инертного газа, стерилизовать отдельно от основной среды в атмосфере инертного газа автоклавированием при 111°C 30 мин. Основную среду автоклавировать при 121°C 15 мин.

105. СРЕДА 2 ДЛЯ MACROMONAS

(NH₄)₂SO₄ 0.5 г

MgSO₄ × 7 H₂O 0.2 г

Кислотный гидролизат казеина 1.0 г

Ацетат Na 1.0 г

или сукцинат, или бензоат 0.5 г

Na₂S₂O₃ × 5 H₂O 0.5 г

Каталаза 2.0 мг

Раствор витаминов (см. ниже) 1.0 мл

Дистиллированная вода 1000.0 мл

Раствор витаминов:

Биотин 200.0 мг

Фолиевая кислота 20.0 мг

Пиридоксин-HCl 100.0 мг

Тиамин-HCl 50.0 мг

Рибофлавин 100.0 мг

Никотиновая кислота 50.0 мг

DL-Пантотеновая кислота 50.0 мг

Витамин B₁₂ 1.0 мг

п-Аминобензойная кислота 50.0 мг

Дистиллированная вода 1000.0 мл

pH 7.2-7.4

Автоклавировать при 121°C 15 мин.

Стерилизовать каталазу и витамины отдельно от основной среды фильтрованием. Тиосульфат стерилизовать отдельно автоклавированием при 121°C 15 мин.

106. СРЕДА 1 ДЛЯ BEGGIATOA

(NH₄)₂SO₄ 500.0 мг

MgSO₄ × 7 H₂O 100.0 мг

CaCl₂ × 2 H₂O 50.0 мг

Лактат Na 500.0 мг

Na₂S₂O₃ × 5 H₂O 500.0 мг

K₂HPO₄ 110.0 мг

KH₂PO₄ 85.0 мг

FeCl₃ × 6 H₂O 2.0 мг

Этилендиаминтетраацетат Na (ЭДТА) 3.0 мг

Раствор витаминов (см. ниже) 1.0 мл

Буфер HEPES 0.01 M

Дистиллированная вода 1000.0 мл

Раствор витаминов:

Биотин 200.0 мг

Фолиевая кислота 20.0 мг

Пиридоксин-HCl 100.0 мг

Тиамин-HCl 50.0 мг

Рибофлавин 100.0 мг

Никотиновая кислота 50.0 мг

DL-Пантотеновая кислота 50.0 мг

Витамин B₁₂ 1.0 мг

п-Аминобензойная кислота 50.0 мг

Дистиллированная вода 1000.0 мл

pH 7.2-7.5 (довести NaOH)

Стерилизовать основную среду, тиосульфат и лактат отдельно автоклавированием при 121°C 15 мин, раствор витаминов стерилизовать фильтрованием. Добавки внести в основную среду перед посевом.

107. СРЕДА ДЛЯ DESULFOSARCINA

Раствор 1:

Na₂SO₄ 3.0 г

KH₂PO₄ 0.2 г

NH₄Cl 0.3 г

NaCl 13.5 г

MgCl₂ × 6 H₂O 2.0 г

KCl 0.5 г

CaCl₂ × 2 H₂O 0.15 г

Дистиллированная вода 870.0 мл

Раствор 2:

Раствор микроэлементов (см. ниже) 1.0 мл

Раствор 3:

NaHCO₃ 5.0 г

Дистиллированная вода 100.0 мл

Раствор 4:

Бензоат Na 0.6 г

Лактат Na 1.0 г

Дистиллированная вода 10.0 мл

Раствор 5:

Раствор витаминов (см. ниже) 10.0 мл

Раствор 6:

Na₂S × 9 H₂O 0.4 г

Дистиллированная вода 10.0 мл

Раствор микроэлементов:

HCl (25%; 7.7 M) 10.0 мл

FeCl₂ × 4 H₂O 1.5 г

ZnCl₂ 70.0 мг

MnCl₂ × 4 H₂O 100.0 мг

H₃BO₃ 6.0 мг

CoCl₂ × 6 H₂O 190.0 мг

CuCl₂ × 2 H₂O 2.0 мг

NiCl₂ × 6 H₂O 24.0 мг

Na₂MoO₄ × 2 H₂O 36.0 мг

Na₂SeO₃ × 5 H₂O 3.0 мг

Дистиллированная вода 990.0 мл

Раствор витаминов:

Биотин 2.0 мг

Фолиевая кислота 2.0 мг

Пиридоксин-HCl 10.0 мг

Тиамин-HCl 5.0 мг

Рибофлавин 5.0 мг

Никотиновая кислота 5.0 мг

Ca DL-пантотенат 5.0 мг

Витамин B₁₂ 0.1 мг

п-Аминобензойная кислота 5.0 мг

Липоевая кислота 5.0 мг

Дистиллированная вода 1000.0 мл

pH 7.1-7.4

Раствор 1 прокипятить перед стерилизацией несколько минут, продувая смесью 80% N₂ и 20% CO₂, раствором бикарбоната Na довести pH до 6.9-7.1. Раствор 1 стерилизовать в атмосфере этой газовой смеси при 121°C 15 мин. Растворы 2, 4 и 6 стерилизовать в атмосфере 100% N₂ при 121°C 15 мин. Раствор витаминов стерилизовать фильтрованием.

108. СРЕДА 2 ДЛЯ BEGGIATOA

MgCl₂ × 6 H₂O 50.0 мг

CaCl₂ × 2 H₂O 30.0 мг

Лактат Na 500.0 мг

Na₂S₂O₃ × 5 H₂O 500.0 мг

NaH₂PO₄ 125.0 мг

KCl 125.0 мг

NaHCO₃ 125.0 мг

Na₂SO₄ 500.0 мг

NaNO₃ 620.0 мг

Раствор витаминов (см. ниже) 1.0 мл

Раствор микроэлементов по Hogland: (см. ниже) 1.0 мл

Дистиллированная вода 1000.0 мл

Раствор витаминов:

Биотин 200.0 мг

Фолиевая кислота 20.0 мг

Пиридоксин-HCl 100.0 мг

Тиамин-HCl 50.0 мг

Рибофлавин 100.0 мг

Никотиновая кислота 50.0 мг

DL-Пантотеновая кислота 50.0 мг

Витамин B₁₂ 1.0 мг

п-Аминобензойная кислота 50.0 мг

Дистиллированная вода 1000.0 мл

Раствор микроэлементов по Hogland:

Этилендиаминтетраацетат Na (ЭДТА) 5.0 г

FeSO₄ × 7 H₂O 2.0 г

ZnSO₄ × 7 H₂O 100.0 мг

MnCl₂ × 4 H₂O 30.0 мг

H₃BO₃ 300.0 мг

CoCl₂ × 6 H₂O 200.0 мг

CuCl₂ 10.0 мг

NiCl₂ × 6 H₂O 20.0 мг

Na₂MoO₄ × 2 H₂O 20.0 мг

Дистиллированная вода 1000.0 мл

pH 7.5 (довести 1% HCl)

Для приготовления раствора микроэлементов воду предварительно подкислить HCl до pH 3.0-4.0. Тиосульфат, лактат, бикарбонат, микроэлементы и витамины стерилизовать отдельно и внести в среду перед посевом. Раствор витаминов стерилизовать фильтрованием, остальные растворы – автоклавированием при 121°C 15 мин. Лактат и тиосульфат предпочтительно готовить в виде 10% растворов, бикарбонат – в виде 5%.

109. СРЕДА ДЛЯ DESULFOVIBRIO

Раствор 1:

K₂HPO₄ 0.5 г

NH₄Cl 1.0 г

Na₂SO₄ 1.0 г

CaCl₂ × 2 H₂O 0.1 г

MgSO₄ × 7 H₂O 2.0 г

Na DL-лактат 2.0 г

Дрожжевой экстракт 1.0 г

Резазурин 1.0 г

Дистиллированная вода 980.0 мл

Раствор 2:

FeSO₄ × 7 H₂O 0.5 г

Дистиллированная вода 10.0 мл

Раствор 3:

Тиогликолят Na 0.1 г

Аскорбиновая кислота 0.1 г

Дистиллированная вода 10.0 мл

Раствор 4:

Раствор микроэлементов (см. ниже) 1.0 мл

Раствор микроэлементов:

FeCl₂ × 4 H₂O 1.5 г

ZnCl₂ 68.0 мг

MnCl₂ × 4 H₂O 100.0 мл

H₃BO₃ 62.0 мг

CoCl₂ × 6 H₂O 120.0 мл

Na₂MoO₄ × 2 H₂O 24.0 мг

HCl, 0.05 M 1000.0 мл

pH 7.4-7.8

Стерилизовать растворы отдельно автоклавированием при 121°C 15 мин в атмосфере N₂. Раствор 1 перед стерилизацией прокипятить, продувая N₂.

110. СРЕДА ДЛЯ DESULFOVIBRIO С 2% NaCl

Раствор 1:

K₂HPO₄ 0.5 г

NH₄Cl 1.0 г

NaCl 20.0 г

Na₂SO₄ 1.0 г

CaCl₂ × 2 H₂O 0.1 г

MgSO₄ × 7 H₂O 2.0 г

Na DL-лактат 2.0 г

Дрожжевой экстракт 1.0 г

Резазурин 1.0 г

Дистиллированная вода 980.0 мл

Раствор 2:

FeSO₄ × 7 H₂O 0.5 г

Дистиллированная вода 10.0 мл

Раствор 3:

Тиогликолят Na 0.1 г

Аскорбиновая кислота 0.1 г

Дистиллированная вода 10.0 мл

Раствор 4:

Раствор микроэлементов (см. ниже) 1.0 мл

Раствор микроэлементов:

FeCl₂ × 4 H₂O 1.5 г

ZnCl₂ 68.0 мг

MnCl₂ × 4 H₂O 100.0 мг

H₃BO₃ 62.0 мг

CoCl₂ × 6 H₂O 120.0 мг

Na₂MoO₄ × 2 H₂O 24.0 мг

HCl, 0.05 M 1000.0 мл

pH 7.4-7.8

Стерилизовать растворы отдельно автоклавированием при 121°C 15 мин в атмосфере N₂. Раствор 1 перед стерилизацией прокипятить, продувая N₂.

111. СРЕДА ДЛЯ DESULFOVIBRIO С 3% NaCl

Раствор 1:

K₂HPO₄ 0.5 г

NH₄Cl 1.0 г

NaCl 30.0 г

Na₂SO₄ 1.0 г

CaCl₂ × 2 H₂O 0.1 г

MgSO₄ × 7 H₂O 2.0 г

Na DL-Лактат 2.0 г

Дрожжевой экстракт 1.0 г

Резазурин 1.0 г

Дистиллированная вода 980.0 мл

Раствор 2:

FeSO₄ × 7 H₂O 0.5 г

Дистиллированная вода 10.0 мл

Раствор 3:

Тиогликолят Na 0.1 г

Аскорбиновая кислота 0.1 г

Дистиллированная вода 10.0 мл

Раствор 4:

Раствор микроэлементов (см. ниже) 1.0 мл

Раствор микроэлементов:

FeCl₂ × 4 H₂O 1.5 г

ZnCl₂ 68.0 мг

MnCl₂ × 4 H₂O 100.0 мл

H₃BO₃ 62.0 мг

CoCl₂ × 6 H₂O 120.0 мл

Na₂MoO₄ × 2 H₂O 24.0 мг

HCl, 0.05 M 1000.0 мл

pH 7.4-7.8

Стерилизовать растворы отдельно автоклавированием при 121°C 15 мин в атмосфере N₂. Раствор 1 перед стерилизацией прокипятить, продувая N₂.

112. АГАР С ДРОЖЖЕВЫМ ЭКСТРАКТОМ И ГЛЮКОЗОЙ

Глюкоза 20.0 г

Дрожжевой экстракт 10.0 г

CaCO₃ 20.0 г

Агар 17.0 г

Дистиллированная вода 1000.0 мл

Автоклавировать при 111°C 30 мин.

113. СРЕДА ДЛЯ DESULFOVIBRIO BAARSII

Раствор 1:

Na₂SO₄ 3.0 г

KH₂PO₄ 0.2 г

NH₄Cl 0.3 г

NaCl 1.0 г

MgCl₂ × 6 H₂O 0.4 г

KCl 0.5 г

CaCl₂ × 2 H₂O 0.15 г

Дистиллированная вода 870.0 мл

Раствор 2:

Раствор микроэлементов SL-10 (см. ниже) 1.0 мл

Раствор 3:

NaHCO₃ 5.0 г

Дистиллированная вода 100.0 мл

Раствор 4:

Бутират Na 0.7 г

Капроат Na 0.3 г

Октаноат Na 0.15 г

Дистиллированная вода 10.0 мл

Раствор 5:

Раствор витаминов (см. ниже) 10.0 мл

Раствор 6:

Na₂S × 9 H₂O 0.4 г

Дистиллированная вода 10.0 мл

Раствор микроэлементов SL-10:

HCl (25%; 7.7 M) 10.0 мл

FeCl₂ × 4 H₂O 1.5 г

ZnCl₂ 70.0 мг

MnCl₂ × 4 H₂O 100.0 мг

H₃BO₃ 6.0 мг

CoCl₂ × 6 H₂O 190.0 мг

CuCl₂ × 2 H₂O 2.0 мг

NiCl₂ × 6 H₂O 24.0 мг

Na₂MoO₄ × 2 H₂O 36.0 мг

Дистиллированная вода 990.0 мл

Раствор витаминов:

Биотин 2.0 мг

Фолиевая кислота 2.0 мг

Пиридоксин-HCl 10.0 мг

Тиамин-HCl 5.0 мг

Рибофлавин 5.0 мг

Никотиновая кислота 5.0 мг

Ca DL-пантотенат 5.0 мг

Витамин B₁₂ 0.1 мг

п-Аминобензойная кислота 5.0 мг

Липоевая кислота 5.0 мг

Дистиллированная вода 1000.0 мл

pH 6.8-7.0

Раствор 1 прокипятить перед стерилизацией несколько минут, продувая смесью 80% N₂ и 20% CO₂, раствором бикарбоната Na довести pH до 6.9-7.1. Раствор 1 стерилизовать в атмосфере этой газовой смеси при 121°C 15 мин. Растворы 2, 4 и 6 стерилизовать в атмосфере 100% N₂ при 121°C 15 мин. Раствор витаминов стерилизовать фильтрованием.

114. СРЕДА 2 ДЛЯ AZOSPIRILLUM BRASILIENSE

Малат Ca 10.0 г или

Глюкоза 20.0 г

K₂HPO₄ 0.1 г

KH₂PO₄ 0.2 г

MgSO₄ × 7 H₂O 0.5 г

FeCl₃ × 6 H₂O 0.1 г

CaCl₂ × 2 H₂O 0.02 г

Na₂MoO₄ × 2 H₂O 0.02 мг

Дрожжевой экстракт 0.1 г

Агар 15.0 г

Дистиллированная вода 1000.0 мл

pH 6.9

Автоклавировать при 111°C 30 мин.

115. СРЕДА ДЛЯ METHANOBACTERIUM

KH₂PO₄ 0.5 г

MgSO₄ × 7 H₂O 0.4 г

NaCl 0.4 г

NH₄Cl 0.4 г

CaCl₂ × 2 H₂O 0.05 г

Раствор микроэлементов SL-10 (см. ниже) 1.0 мл

Раствор витаминов (см. ниже) 5.0 мл

Дрожжевой экстракт 1.0 г

Ацетат Na 1.0 г

Формиат Na 2.0 г

NaHCO₃ 4.0 г

Резазурин 1.0 мг

Цистеин-HCl 0.5 г

Na₂S × 9 H₂O 0.5 г

Раствор жирных кислот (см. ниже) 20.0 мл

Иловая жидкость: (см. ниже) 50.0 мл

Дистиллированная вода 940.0 мл

Раствор микроэлементов SL-10:

HCl (25%; 7.7 M) 10.0 мл

FeCl₂ × 4 H₂O 1.5 г

ZnCl₂ 70.0 мг

MnCl₂ × 4 H₂O 100.0 мг

H₃BO₃ 6.0 мг

CoCl₂ × 6 H₂O 190.0 мг

CuCl₂ × 2 H₂O 2.0 мг

NiCl₂ × 6 H₂O 24.0 мг

Na₂MoO₄ × 2 H₂O 36.0 мг

Дистиллированная вода 990.0 мл

Раствор витаминов:

Биотин 2.0 мг

Фолиевая кислота 2.0 мг

Пиридоксин 10.0 мг

Рибофлавин (B₁) 5.0 мг

Пантотеновая кислота 5.0 мг

п-Аминобензойная кислота 5.0 мг

Тиамин-HCl 5.0 мг

Никотиновая кислота 5.0 мг

Витамин B₁₂ 0.1 мг

Липоевая (тиоктовая) кислота 5.0 мг

Дистиллированная вода 1000.0 мл

Раствор жирных кислот:

Валериановая кислота 0.5 г

Изовалериановая кислота 0.5 г

альфа-Метилбутиловая кислота 0.5 г

Изобутиловая кислота 0.5 г

Дистиллированная вода 20.0 мл

pH 7.5 (довести концентрированной NaOH)

Иловая жидкость: к илу из метантенка добавить 0.4% дрожжевого экстракта, продуть N₂ и инкубировать при 37°C 24 часа. Центрифугировать при 13000 g и супернатант автоклавировать в атмосфере N₂ при 121°C 15 мин. Раствор витаминов стерилизовать фильтрованием, основную среду и остальные растворы – автоклавированием при 121°C 15 мин в атмосфере 80% H₂ и 20% CO₂.

pH среды 6.7-7.0.

116. СРЕДА ДЛЯ THERMUS RUBER

Пептон 5.0 г

Дрожжевой экстракт 1.0 г

Крахмал (растворимый) 1.0 г

Агар 12.0 г

Дистиллированнаявода 1000.0 мл

pH 8.0

Автоклавировать при 121°C 15 мин.

117. СРЕДА ДЛЯ METHANOSARCINA

Раствор 1:

NaCl 0.9 г

MgCl₂ × 6 H₂O 0.2 г

CaCl₂ × 2 H₂O 0.1 г

NH₄Cl 1.0 г

Дрожжевой экстракт 2.0 г

Резазурин 0.0 1 г

Mетанол 10% 10.0 мл

Раствор микроэлементов (см. ниже) 10.0 мл

Раствор витаминов (см. ниже) 5.0 мл

Дистиллированная вода 965.0 мл

Раствор 2 (восстановители):

Цистеин-HCl 0.5 г

Na₂S × 9 H₂O 0. 5 г

Дистиллированная вода 10.0 мл

Буферные растворы:

а) K₂HPO₄ 29.0 г

Дистиллированная вода 100.0 мл

б) KH₂PO₄ 15.0 г

Дистиллированная вода 100.0 мл

Раствор микроэлементов:

Нитрилотриуксусная кислота 12.8 г

FeSO₄ × 7 H₂O 0.1 г

MnCl₂ × 6 H₂O 0.1 г

CoCl₂ × 2 H₂O 0.17 г

CaCl₂ × 2 H₂O 0.1 г

ZnCl₂ 0.1 г

CuCl₂ 0.02 г

H₃BO₃ 0.01 г

Na₂MoO₄ × 2 H₂O 0.01 г

NaCl 1.0 г

Na₂SeO₄ 0.017 г

Дистиллированная вода 1000.0 мл

Растворить нитрилотриуксусную кислоту, нейтрализуя раствор KOH, внести остальные соли. Довести объем до 1000.0 мл. Довести pH до 7.0, используя KOH.

Раствор витаминов:

Биотин 2.0 мг

Фолиевая кислота 2.0 мг

Пиридоксин 10.0 мг

Рибофлавин 5.0 мг

Пантотеновая кислота 5.0 мг

п-Аминобензойная кислота 5.0 мг

Тиамин-HCl 5.0 мг

Никотиновая кислота 5.0 мг

Витамин B₁₂ 0.1 мг

Липоевая (тиоктовая) кислота 5.0 мг

Дистиллированная вода 1000.0 мл

pH 7.2-7.4

Среду готовить анаэробно, продувая бескислородным N₂ перед стерилизацией. Основную среду, раствор микроэлементов, буферные растворы и восстановители стерилизовать отдельно автоклавированием при 121°C 15 мин. Раствор витаминов стерилизовать фильтрованием.

118. АГАР ДЛЯ ПОДСЧЕТА ОМЧ (PLATE COUNT AGAR)

Триптон 5.0 г

Дрожжевой экстракт 2.5 г

Глюкоза 1.0 г

Агар 15.0 г

Дистиллированная вода 1000.0 мл

pH 7.0±0.2

Автоклавировать при 121°C 15 мин.

119. СРЕДА 2 ДЛЯ NITROSOLOBUS

(NH₄)₂SO₄ 0.5 г

KH₂PO₄ 0.2 г

CaCl₂ × 2 H₂O 0.02 г

MgSO₄ × 7 H₂O 0.04 г

ЭДТА FeNa 3.8% 0.1 мл

Феноловый красный 0.05% 2.0 мл

Дистиллированная вода 1000.0 мл

pH 8.0 (довести 6% Na₂CO₃)

Автоклавировать при 121°C 15 мин.

120. МАННИТЫЙ АГАР С ПЕПТОНОМ

Дрожжевой экстракт 5.0 г

Маннит 25.0 г

Пептон 3.0 г

Агар 15.0 г

Дистиллированнаявода 1000.0 мл

pH 5.0-6.0

Автоклавировать при 121°C 15 мин.

121. СРЕДА ДЛЯ THIOBACILLUS THIOOXIDANS (СРЕДА ВАКСМАНА)

(NH₄)₂SO₄ 300.0 мг

MgSO₄ × 7 H₂O 500.0 мг

KH₂PO₄ 3.5 г

CaCl₂ × 2 H₂O 250.0 мг

FeSO₄ × 7 H₂O 18.0 мг

Серный цвет (тонкодисперсная сера) 5.0 г

Дистиллированная вода 1000.0 мл

pH 4.5

Автоклавировать при 121°C 15 мин.

122. СРЕДА ДЛЯ THIOBACILLUS FERROOXIDANS (СРЕДА ЛЕТЕНА)

(NH₄)₂SO₄ 150.0 мг

KCl 50.0 мг

MgSO₄ × 7 H₂O 500.0 мг

KH₂PO₄ 100.0 мг

Ca(NO₃)₂ × 4 H₂O 10.0 мг

Дистиллированная вода 1000.0 мл

Основную среду автоклавировать при 121°C 15 мин, добавить 10.0 мл 10% FeSO₄ × 7 H₂O, предварительно подкисленного до pH 3.5 и стерилизованного отдельно в запаянных ампулах под N₂. pH 4.0 (довести после стерилизации и внесения сульфата железа).

123. СРЕДА ДЛЯ МОРСКИХ NITROBACTER

Раствор 1 (см. ниже) 0.5 мл

Раствор 2 (см. ниже) 0.5 мл

Раствор 3 (см. ниже) 1.0 мл

Раствор 4 (см. ниже) 0.5 мл

Раствор 5 (см. ниже) 0.5 мл

Раствор 6 (см. ниже) 0.1 мл

Дистиллированная вода 300.0 мл

Морская вода 700.0 мл

Раствор 1:

CaCl₂ 2.0 г

Дистиллированная вода 100.0 мл

Раствор 2:

MgSO₄ × 7 H₂O 20.0 г

Дистиллированная вода 100.0 мл

Раствор 3:

Железо хелатное 0.1 г

Дистиллированная вода 100.0 мл

Раствор 4:

Na₂MoO₄ 0.1 г

MnCl₂ × 4 H₂O 0.2 г

CoCl₂ × 6 H₂O 0.0 2 г

ZnSO₄ × 7 H₂O 0.1 г

CuSO₄ × 5 H₂O 0.02 г

Дистиллированная вода 1000.0 мл

Раствор 5:

NaNO₃ 41.4 г

Дистиллированная вода 100.0 мл

Раствор 6:

K₂HPO₄ 1.74 г

Дистиллированная вода 100.0 мл

pH 8.6 (довести NaOH или KOH)

Стерилизовать все растворы отдельно автоклавированием при 121°C 15 мин. После отстаивания в течение 2 – 3 суток pH самопроизвольно снизится до 7.4 - 7.6.

124. СРЕДА ДЛЯ AZOSPIRILLUM

Раствор 1:

Дрожжевой экстракт 0.05 г

FeSO₄ × 7 H₂O 0.01 г

K₂HPO₄ 0.25 г

Na₂MoO₄ × 2 H₂O 1.0 мг

MnSO₄ × H₂O 2.0 мг

MgSO₄ × 7 H₂O 0.2 г

NaCl 0.1 г

CaCl₂ × 2 H₂O 0.02 г

(NH₄)₂SO₄ 1.0 г

Биотин 0.1 мг

Бромтимоловый синий 25.0 мг

Дистиллированная вода 950.0 мл

Раствор 2:

Глюкоза 20% 25.0 мл

Раствор 3:

Малат Na 20% 25.0 мл

pH 7.1

Бромтимоловый синий перед внесением в среду растворить в разбавленной KOH.

Стерилизовать растворы отдельно автоклавированием при 121°C 15 мин.

125. СРЕДА 3 ДЛЯ NITROSOLOBUS

(NH₄)₂SO₄ 2.0 г

CaCl₂ × 2 H₂O 20.0 мг

MgSO₄ × 7 H₂O 200.0 мг

Железо хелатное 1.0 мг

Na₂MoO₄ × 2 H₂O 100.0 мкг

MnCl₂ × 4 H₂O 200.0 мкг

CoCl₂ × 6 H₂O 2.0 мкг

ZnSO₄ × 7 H₂O 100.0 мкг

K₂HPO₄ 15.9 мг

CuSO₄ × 5 H₂O 20.0 мкг

Дистиллированная вода 1000.0 мл

pH 7.5-7.8

Автоклавировать при 121°C 15 мин.

126. СРЕДА ДЛЯ DESULFOCOCCUS NIACINI

Раствор 1:

Na₂SO₄ 3.0 г

KH₂PO₄ 0.2 г

NH₄Cl 0.3 г

NaCl 13.5 г

MgCl₂ × 6 H₂O 2.2 г

KCl 0.5 г

CaCl₂ × 2 H₂O 0.15 г

Дистиллированная вода 870.0 мл

Раствор2:

Раствор микроэлементов SL-10 (см. ниже) 1.0 мл

Раствор 3:

NaHCO₃ 5.0 г

Дистиллированная вода 100.0 мл

Раствор 4:

Никотинат Na 5.0 mM

Раствор 5:

Раствор витаминов (см. ниже) 10.0 мл

Раствор 6:

Na₂S × 9 H₂O 0.4 г

Дистиллированная вода 10.0 мл

Раствор микроэлементов SL-10:

HCl (25%; 7.7 M) 10.0 мл

FeCl₂ × 4 H₂O 1.5 г

ZnCl₂ 70.0 мг

MnCl₂ × 4 H₂O 100.0 мг

H₃BO₃ 6.0 мг

CoCl₂ × 6 H₂O 190.0 мг

CuCl₂ × 2 H₂O 2.0 мг

NiCl₂ × 6 H₂O 24.0 мг

Na₂MoO₄ × 2 H₂O 36.0 мг

Na₂SeO₃ × 5 H₂O 40.0 мг

Дистиллированная вода 990.0 мл

Раствор витаминов:

Биотин 2.0 мг

Фолиевая кислота 2.0 мг

Пиридоксин-HCl 10.0 мг

Тиамин-HCl 5.0 мг

Рибофлавин 5.0 мг

Никотиновая кислота 5.0 мг

Ca DL-пантотенат 5.0 мг

Витамин B₁₂ 0.1 мг

п-Аминобензойная кислота 5.0 мг

Липоевая кислота 5.0 мг

Дистиллированная вода 1000.0 мл

Раствор 1 прокипятить перед стерилизацией несколько минут, продувая смесью 80% N₂ и 20% CO₂, раствором бикарбоната Na довести pH до 6.9-7.1. Раствор 1 стерилизовать в атмосфере этой газовой смеси при 121°C 15 мин. Растворы 2, 4 и 6 стерилизовать в атмосфере 100% N₂ при 121°C 15 мин. Раствор витаминов стерилизовать фильтрованием.

pH 7.4

127. СЕЛЕНИТОВАЯ КОНТРОЛЬНАЯ СРЕДА

Раствор 1:

Пептон 5.0 г

Na₂HPO₄ 7.0 г

NaH₂PO₄ 3.0 г

Лактоза 4.0 г

Дистиллированная вода 960.0 мл

pH 6.9-7.1

Раствор 2:

10% Na₂SeO₃ × 5 H₂O 40.0 мл

Автоклавировать при 111°C 30 мин.

128. СРЕДА ХИРША

KH₂PO₄ 1.36 г

Na₂HPO₄ 2.15 г

MgSO₄ × 7 H₂O 0.2 г

MnSO₄ × 5 H₂O 1.05 г

(NH₄)₂SO₄ 0.5 г

CaCl₂ × 2 H₂O 5.97 мг

Na₂MoO₄ × 2 H₂O 1.5 мг

Mетанол 5.0 мл

Дистиллированная вода to 1000.0 мл

pH 7.0

Автоклавировать при 121°C 15 мин. Внести стерилизованный фильтрованием метанол.

129. КОНТРОЛЬНАЯ СРЕДА Л-1

KH₂PO₄ 2.0 г

K₂HPO₄ 2.0 г

MgSO₄ × 7 H₂O 0.2 г

NaCl 5.0 г

Рафиноза 2.0 г

Бромтимоловый синий (1.6% щелочной) 2.0 мл

Кристаллический фиолетовый (0.01%) 20.0 мл

Мочевина 50% 4.0 мл

Дистиллированная вода 975.0 мл

Автоклавировать при 111°C 30 мин. Раствор мочевины стерилизовать фильтрованием.

130. КАРТОФЕЛЬНО – ГЛЮКОЗНЫЙ АГАР

Картофель 200.0 г

Глюкоза 10.0 г

Агар 20.0 г

Водопроводная вода 1000.0 мл

pH 7.0

200.0 г очищенного и нарезанного картофеля кипятить в 1 л водопроводной воды в течение часа, остудить, профильтровать через ватно-марлевый фильтр. Не использовать молодой картофель. Довести объем до 1 л, добавить глюкозу и агар.

Автоклавировать при 111°C 30 мин.

131. СРЕДА Q MOD ДЛЯ FRANKIA

K₂HPO₄ 300.0 мг

NaH₂PO₄ 200.0 мг

MgSO₄ × 7 H₂O 200.0 мг

KCl 200.0 мг

Дрожжевой экстракт 500.0 мг

Пептон 5.0 г

Глюкоза 10.0 г

Fe-цитрат 1.0 мл

Раствор микроэлементов (см. ниже) 1.0 мл

CaCO₃ 100.0 мг

Твин-80 2.0 г

Агар 15.0 г

Дистиллированная вода 1000.0 мл

Раствор микроэлементов:

H₃BO₃ 1.5 г

MnSO₄ × 7 H₂O 0.8 г

ZnSO₄ × 7 H₂O 0.6 г

CuSO₄ × 5 H₂O 0.1 г

(NH₄)₆Mo₇O₂₄ × 4 H₂O 0.2 г

CoSO₄ 0.001 г

Дистиллированная вода 1000.0 мл

pH 7.0

Автоклавировать при 111°C 30 мин.

132. СРЕДА 9K ДЛЯ THIOBACILLUS FERROOXIDANS

Раствор 1:

KCl 0.1 г

MgSO₄ × 7 H₂O 0.5 г

K₂HPO₄ 0.5 г

Ca(NO₃)₂ × 4 H₂O 0.01 г

Дистиллированная вода 700.0 мл

Раствор 2:

(NH₄)₂Fe(SO₄)₂ 63.0 г

H₂SO₄ (10 N) 1.0 мл

Дистиллированная вода 300.0 мл

Стерилизовать раствор 1 при 121°C 15 мин, раствор 2 при 111°C 30 min. Смешать растворы перед засевом.

pH 3.5

133. СРЕДА КОЛБИ И ЗАТМАНА С MЕТАНОЛОМ

K₂HPO₄ 1.2 г

KH₂PO₄ 0.62 г

CaCl₂ × 6 H₂O 0.05 г

MgSO₄ × 7 H₂O 0.2 г

NaCl 0.1 г

FeCl₃ × 6 H₂O 1.0 мг

(NH₄)₂SO₄ 0.5 г

CuSO₄ × 5 H₂O 5.0 мкг

MnSO₄ × 5 H₂O 10.0 мкг

Na₂MoO₄ × 2 H₂O 10.0 мкг

H₃BO₃ 10.0 мкг

ZnSO₄ × 7 H₂O 70.0 мкг

CoCl₂ × 6 H₂O 5.0 мкг

Агар очищенный 15.0 г

Mетанол 1.0 мл

Дистиллированная вода 1000.0 мл

pH 6.8

Автоклавировать при 121°C 15 мин. Mетанол стерилизовать фильтрованием.

134. СРЕДА 1 ДЛЯ МЕТИЛОТРОФОВ

KH₂PO₄ 2.0 г

(NH₄)₂SO₄ 2.0 г

MgSO₄ × 7 H₂O 0.025 г

NaCl 0.5 г

FeSO₄ × 7 H₂O 0.0 2 г

Mетанол 5.0 мл

Дистиллированная вода 1000.0 мл

pH 7.0

Автоклавировать при 121°C 15 мин. Mетанол стерилизовать фильтрованием. Метанол может быть заменен 30 мл 10 % раствора метиламина, стерилизованного автоклавированием при 111°C 30 мин.

135. СРЕДА 2 ДЛЯ МЕТИЛОТРОФОВ

KH₂PO₄ 0.8 г

Na₂HPO₄ × 12 H₂O 3.0 г

(NH₄)₂SO₄ 0.8 г

MgSO₄ × 7 H₂O 0.1 г

FeSO₄ × 7 H₂O 10.0 мг

Mетанол 5.0 мл

Раствор микроэлементов (см. ниже) 1.0 мл

Дистиллированная вода 1000.0 мл

Раствор микроэлементов:

CaCl₂ × 2 H₂O 1.25 г

CoCl₂ × 6 H₂O 1.25 г

MnSO₄ × 4 H₂O 0.1 г

ZnSO₄ × 7 H₂O 1.25 г

Na₂MoO₄ × 2 H₂O 50.0 мг

CuCl₂ × 2 H₂O 250.0 мг

Дистиллированная вода 250.0 мл

pH 7.0-7.2

Автоклавировать при 121°C 15 мин. Mетанол стерилизовать фильтрованием. Метанол может быть заменен 30 мл 10 % раствора метиламина, стерилизованного автоклавированием при 111°C 30 мин.

136. СРЕДА ДЛЯ ПЕРХЛОРАТРЕДУЦИРУЮЩИХ БАКТЕРИЙ

Раствор 1:

NH₄Cl 0.1 г

NaCl 0.02 г

KH₂PO₄ 0.1 г

K₂HPO₄ 0.4 г

MgSO₄ × 7 H₂O 0.1 г

Водопроводная вода 1000.0 мл

Раствор 2:

HCl, до растворения осадка в растворе 1

Раствор 3:

pH 6.9-7.2 (довести 5% NaOH)

Раствор 4:

5% NH₄ClO₄ 5.0 мл

Раствор 5:

5% Ацетат Na 5.0 мл

Раствор 6:

Раствор микроэлементов по Hogland (см. ниже) 0.5 мл

Раствор 7:

Витамин B₁₂ (аптечный раствор) 0.2 мл

Раствор 8:

96° этанол 0.5 мл

Раствор микроэлементов по Hogland:

Этилендиаминтетраацетат Na 5.0 г

FeSO₄ × 7 H₂O 2.0 г

ZnSO₄ × 7 H₂O 100.0 мг

MnCl₂ × 4 H₂O 30.0 мг

H₃BO₃ 300.0 мг

CoCl₂ × 6 H₂O 200.0 мг

CuCl₂ 10.0 мг

NiCl₂ × 6 H₂O 20.0 мг

Na₂MoO₄ × 2 H₂O 20.0 мг

Дистиллированная вода 1000.0 мл

Стерилизовать этанол фильтрованием, остальные растворы отдельно автоклавированием при 121°C 15 мин. Внести в основную среду в указанной последовательности.

137. СРЕДА ХРОМАТРЕДУЦИРУЮЩИХ БАКТЕРИЙ

Раствор 1:

NH₄Cl 0.3 г

NaCl 0.1 г

KH₂PO₄ 0.5 г

K₂HPO₄ 0.3 г

MgSO₄ × 7 H₂O 0.1 г

CaCO₃ 0.05 г

FeCl₃ × 6 H₂O 0.05 г

K₂CrO₄ 0.1 г

Вода прудовая, профильтрованная через бумажный фильтр 900.0 мл

Раствор 2:

Мясо-пептонный бульон 100.0 мл

Раствор 3:

5% Ацетат Na 5.0 мл

Раствор 4:

Раствор микроэлементов по Hogland (см. ниже) 0.5 мл

Раствор 5:

Витамин B₁₂ (аптечный раствор) 0.2 мл

Раствор микроэлементов по Hogland:

Этилендиаминтетраацетат Na 5.0 г

FeSO₄ × 7 H₂O 2.0 г

ZnSO₄ × 7 H₂O 100.0 мг

MnCl₂ × 4 H₂O 30.0 мг

H₃BO₃ 300.0 мг

CoCl₂ × 6 H₂O 200.0 мг

CuCl₂ 10.0 мг

NiCl₂ × 6 H₂O 20.0 мг

Na₂MoO₄ × 2 H₂O 20.0 мг

Дистиллированная вода 1000.0 мл

pH 7.0-7.2

Стерилизовать растворы отдельно автоклавированием при 121°C 15 мин. Внести в основную среду в указанной последовательности.

138. СРЕДА ЛАРСЕНА ДЛЯ ФОТОТРОФОВ

NH₄Cl 0.5 г

KH₂PO₄ 1.0 г

MgCl₂ 0.5 г

CaCl₂ 0.1 г

Раствор микроэлементов SL-12B (см. ниже) 1.0 мл

NaHCO₃ 5.0 г

Ацетат Na 2.0 г

Na₂S₂O₃ 0.4-0.6 г

Na₂S 0.1 г

Fe-цитрат Следы

Дистиллированная вода 1000.0 мл

Раствор микроэлементов SL-12B:

Этилендиаминтетраацетат Na 3.0 г

FeSO₄ × 7 H₂O 1.1 г

CoCl₂ × 6 H₂O 190.0 мг

MnCl₂ × 2 H₂O 50.0 мг

ZnCl₂ 42.0 мг

NiCl₂ × 6 H₂O 24.0 мг

Na₂MoO₄ × 2 H₂O 18.0 мг

H₃BO₃ 300.0 мг

CuCl₂ × 2 H₂O 2.0 мг

Дистиллированная вода 1000.0 мл

pH раствора микроэлементов 6.0

pH среды 8.4

Стерилизовать растворы отдельно автоклавированием при 121°C 15 мин.

139. СРЕДА ПОСТГЕЙТА «B» ДЛЯ СУЛЬФАТРЕДУКТОРОВ

Раствор 1:

NaCl 1.0 г

KH₂PO₄ 0.5 г

NH₄Cl 1.0 г

CaSO₄ × 2 H₂O 1.0 г

MgSO₄ × 7 H₂O 2.0 г

Лактат Na 3.5 г

Дрожжевой экстракт 1.0 г

Водопроводная вода 980.0 мл

Продуть среду свободным от кислорода N₂ в течение 10-15 минут

Раствор 2:

Аскорбиновая кислота 1.0 г

Тиогликолевая кислота 1.0 г

Дистиллированная вода 10.0 мл

Раствор 3:

FeSO₄ × 7 H₂O 0.5 г

Дистиллированная вода 10.0 мл

pH 7.4

Стерилизовать раствор 1 автоклавированием при 121°C 15 мин, растворы 2 и 3 отдельно автоклавированием при 111°C 30 мин.

Автоклавировать при 121°C 15 мин.

140. РАЗБАВЛЕННАЯ СРЕДА С СЕРДЕЧНО-МОЗГОВЫМ ЭКСТРАКТОМ (РАЗБАВЛЕННАЯ BHI СРЕДА)

BHI бульон (Pronadisa 1400) 3.7 г или

Пептоновая смесь 1.0 g

Вытяжка из сердца быка 1.0 g

Вытяжка из мозга теленка 0.75 g

Глюкоза 0.2 g

Na₂HPO₄ 0.25 g

NaCl 0.5 g

Агар 15.0 g

Дистиллированная вода 1000.0 мл

pH 7.4±0.2

Автоклавировать при 121°C 15 мин.

141. ЦИТРАТНЫЙ АГАР СИММОНСА

NaCl 5.0 г

MgSO₄ × 7 H₂O 0.2 г

NH₄H₂PO₄ 1.0 г

K₂HPO₄ 1.0 г

Цитрат Na 3.0 г

Бромтимоловый синий 0.08 г

Агар 20.0 г

Дистиллированная вода 1000.0 мл

pH 7.2

Автоклавировать при 121°C 15 мин.

142. КПДА

Картофельный отвар (см. ниже) 200.0 мл

Пептон 5.0 г

Дрожжевой экстракт 1.0 г

Агар 25.0 г

Дистиллированная вода 800.0 мл

pH 8.0.

Автоклавировать при 121°C 15 мин

Приготовление картофельного отвара: 200.0 г очищенного и нарезанного картофеля кипятить в 1 л водопроводной воды в течение часа, остудить, профильтровать через ватно-марлевый фильтр. Не использовать молодой картофель. Довести объем до 1 л.

143. МЯСО-ПЕПТОННЫЙ АГАР С 1% ГЛИЦЕРИНА

Пептон 10.0 г

Мясной экстракт 3.0 г

NaCl 5.0 г

Глицерин 10.0 мл

Агар 20.0 г

Дистиллированная вода 1000.0 мл

pH 7.0-7.2

Автоклавировать при 121°C 15 мин.

144. МЯСО-ПЕПТОННЫЙ АГАР С 0.5% ГЛЮКОЗЫ

Пептон 10.0 г

Мясной экстракт 3.0 г

NaCl 5.0 г

Глюкоза 5.0 г

Агар 20.0 г

Дистиллированная вода 1000.0 мл

pH 7.0-7.2

Автоклавировать при 111°C 30 мин

145. СРЕДА ДЛЯ PSEUDOMONAS SP. (ARTHROBACTER GLOBIFORMIS)

Глюкоза 10.0 г

Кукурузный экстракт 10.0 г

Водопроводная вода 1000.0 мл

pH 7.8 (довести NH₄OH); профильтровать через бумажный фильтр.

Автоклавировать при 111°C 30 мин.

146. РАЗБАВЛЕННАЯ ТРИПТИКАЗО-СОЕВАЯ СРЕДА

Триптиказо-соевый бульон (BBL 11768)

Панкреатический гидролизат казеина 1.8 г

Папаиновый гидролизат сои 0.6 г

NaCl 0.6 г

Агар 15.0 г

Дистиллированная вода 1000.0 мл

pH 7.3

Автоклавировать при 121°C 15 мин.

147. СРЕДА ДЛЯ HYPHOMICROBIUM

NaNO₃ 1.0 г

NaCl 0.5 г

K₂HPO₄ 1.0 г

MgSO₄ × 7 H₂O 0.2 г

Mетанол 5.0-10.0 мл

Дистиллированная вода 1000.0 мл

pH 6.8-7.0

Автоклавировать при 121°C 15 мин. Mетанол стерилизовать фильтрованием.

Выращивать в эксикаторе в присутствии паров метанола.

148. ГЛЮКОЗО-ДРОЖЖЕВАЯ СРЕДА С МЕЛОМ

Мясной экстракт 3.0 г

Дрожжевой экстракт 10.0 г

Глюкоза 50.0 г

CaCO₃ 30.0 г

Агар 20.0 г

Дистиллированная вода 1000.0 мл

Автоклавировать при 121°C 15 мин.

149. СРЕДА ДЛЯ CLAVIBACTER XYLI

Раствор 1:

Мучной агар 5.0 г

Папаиновый гидролизат соевой муки 8.0 г

K₂HPO₄ 1.0 г

KH₂PO₄ 1.0 г

MgSO₄ × 7 H₂O 0.2 г

Дистиллированная вода 965.0 мл

Раствор 2:

Бычьего гемина хлорид (0.1% в 0.05 N NaOH) 15.0 мл

Раствор 3:

Бычий сывороточный альбумин, фракция 5 (20%) 10.0 мл

Раствор 4:

Глюкоза (50%) 1.0 мл

Раствор 5:

Цистеин (10%) 10.0 мл

pH 6.6

Стерилизовать раствор 1 при 121°C 15 мин, остудить до 50°C и добавить стерилизованные фильтрованием растворы 2-5.

150. СРЕДА ГЕТЧИНСОНА С ФИЛЬТРОВАЛЬНОЙ БУМАГОЙ

K₂HPO₄ 1.3 г

MgSO₄ × 7 H₂O 0.3 г

CaCl₂ × 6 H₂O 0.1 г

FeCl₃ × 6 H₂O 0.01 г

NaNO₃ 2.5 г

Дистиллированная вода 1000.0 мл

pH 7.2-7.3.

Автоклавировать при 121°C 15 мин. Фильтровальную бумагу порезать полосками, стерилизовать сухим жаром и погрузить в среду так, чтобы она была погружена в среду не полностью.

151. СРЕДА МЮНЦА ДЛЯ МЕТАНОКИСЛЯЮЩИХ БАКТЕРИЙ

K₂HPO₄ 0.5 г

KH₂PO₄ 0.5 г

MgSO₄ × 7 H₂O 0.5 г

NH₄Cl 1.0 г

Водопроводная вода 1000.0 мл

pH 6.8

Автоклавировать при 121°C 15 мин.

Культивировать в смешанной атмосфере воздуха и метана (2:1).

152. СРЕДА С ТРИПТОНОМ И ТИОГЛИКОЛЯТОМ

Раствор 1:

K₂HPO₄ 5.45 г

KH₂PO₄ 1.20 г

MgSO₄ × 7 H₂O 0.025 г

CaCl₂ × 2 H₂O 0.015 г

FeSO₄ × 7 H₂O 0.01 г

MnCl₂ × 4 H₂O 2.0 мг

CoCl₂ × 6 H₂O 2.5 мг

Na₂MoO₄ × 2 H₂O 2.5 мг

Пептон 2.0 г

Триптон 2.0 г

Дрожжевой экстракт 6.0 г

Тиогликолят Na 0.5 г

Дистиллированная вода 950.0 мл

Раствор 2:

Глюкоза 20.0 г

Дистиллированная вода 50.0 мл

pH 7.5

Стерилизовать раствор 1 при 121°C 15 мин, раствор 2 при 111°C 30 мин.

153. СРЕДА P-2 ДЛЯ ТЕРМОФИЛЬНЫХ АНАЭРОБНЫХ БАКТЕРИЙ

K₂HPO₄ 3.0 г

KH₂PO₄ 2.0 г

NH₄Cl 2.0 г

MgCl₂ × 6 H₂O 0.2 г

CaCl₂ × 6 H₂O 0.05 г

Триптон 10.0 г

Глюкоза 5.0 г

Дрожжевой экстракт 5.0 г

Резазурин 0.01 г

Дистиллированная вода 1000.0 мл

pH 7.0-7.2

Готовить среду анаэробно в атмосфере N₂ и автоклавировать в атмосфере N₂ при 121°C 15 мин. Стерилизовать глюкозу отдельно в атмосфере N₂ при 111°C 30 мин.

154. СРЕДА ДЛЯ DESULFOVIBRIO SULFODISMUTANS

Раствор 1:

KH₂PO₄ 0.2 г

NH₄Cl 0.3 г

NaCl 1.0 г

MgCl₂ × 6 H₂O 0.4 г

KCl 0.5 г

CaCl₂ × 2 H₂O 0.15 г

Дистиллированная вода 920.0 мл

Раствор 2:

Раствор микроэлементов SL-10 (см. ниже) 1.0 мл

Раствор 3:

NaHCO₃ 2.5 г

Дистиллированная вода 50.0 мл

Раствор 4:

Ацетат Na × 3 H₂O 0.3 г

Дистиллированная вода 10.0 мл

Раствор 5:

D(+)-Биотин 10.0 мкг

Ca-D(+)-Пантотенат 50.0 мкг

Дистиллированная вода 1.0 мл

Раствор 6:

Na₂S × 9 H₂O 0.4 г

Дистиллированная вода 10.0 мл

Раствор 7:

Na₂S₂O₃ (0.5 M) 10.0 мл

pH 7.5-8.0 (довести NaOH)

Раствор микроэлементов SL-10:

HCl (25%; 7.7 M) 10.0 мл

FeCl₂ × 4 H₂O 1.5 г

ZnCl₂ 70.0 мг

MnCl₂ × 4 H₂O 100.0 мг

H₃BO₃ 6.0 мг

CoCl₂ × 6 H₂O 190.0 мг

CuCl₂ × 2 H₂O 2.0 мг

NiCl₂ × 6 H₂O 24.0 мг

Na₂MoO₄ × 2 H₂O 36.0 мг

Дистиллированная вода 990.0 мл

pH 7.1-7.4

Раствор 1 готовить анаэробно и стерилизовать в атмосфере 80% N₂ + 20% CO₂ автоклавированием при 121°C 15 мин. Растворы 2, 4, 5 и 6 продуть N₂ и стерилизовать отдельно автоклавированием при 121°C 15 мин. Раствор 3 (продуть N₂ + CO₂) и раствор 7 (продуть N₂) стерилизовать фильтрованием. Растворы со 2 по 7 внести в стерильный охлажденный раствор 1 в указанной последовательности. Дважды дополнительно внести 10 мл/л раствора 7 - после начала роста культуры и еще через два дня.

155. СРЕДА ШАТЦА-БОВЕЛЛА ДЛЯ ВОДОРОДОКИСЛЯЮЩИХ БАКТЕРИЙ

KH₂PO₄ 1.0 г

NH4NO2 1.0 г

MgSO₄ × 7 H₂O 0.2 г

FeSO₄ × 7 H₂O 0.01 г

CaCl₂ × 2 H₂O 0.01 г

NaHCO₃ 0.5 г

Агар 15.0 г

Дистиллированная вода 1000.0 мл

pH 6.8-7.2

Автоклавировать при 121°C 15 мин. Культивировать в смешанной атмосфере углекислого газа, воздуха и водорода (1:3:6).

156. СРЕДА ДЛЯ МИКСОБАКТЕРИЙ

Гидролизат казеина 2.5 г

Аспарагин 2.5 г

K₂HPO₄ 2.0 г

NaCl 1.0 г

MgSO₄ × 7 H₂O 0.1 г

FeSO₄ × 7 H₂O 0.0 3 г

CaCl₂ × 2 H₂O 0.01 г

Дистиллированная вода 1000.0 мл

pH 7.4

Автоклавировать при 121°C 15 мин.

157. КРАХМАЛЬНО-ДРОЖЖЕВОЙ АГАР ЭМЕРСОНА

Дрожжевой экстракт 4.0 г

Крахмал (растворимый) 15.0 г

KH₂PO₄ 1.0 г

MgSO₄ × 7 H₂O 0.5 г

Агар 20.0 г

Дистиллированная вода 1000.0 мл

pH 7.0

Автоклавировать при 121°C 15 мин.

158. ГЛИЦЕРИН-ДРОЖЖЕВОЙ АГАР

Дрожжевой экстракт 5.0 г

Глицерин 50.0 г

CaCO₃ 1.0 г

Агар 20.0 г

Дистиллированная вода 1000.0 мл

pH 7.0-7.2

Автоклавировать при 121°C 15 мин.

159. СРЕДА ДЛЯ SPHAEROTILUS

Мясной экстракт (Lab Lemco, Oxoid) 5.0 г

Агар (при необходимости) 15.0 г

Дистиллированная вода 1000.0 мл

pH 7.0.

Автоклавировать при 121°C 15 мин. Перед посевом на поверхность скошенной среды налить 2 мл стерильной водопроводной воды.

160. МЯСО-ГЛЮКОЗНАЯ СРЕДА

Пептон 10.0 г

Глюкоза 10.0 г

Мясной экстракт 3.0 г

NaCl 5.0 г

Дистиллированная вода 1000.0 мл

pH 7.2-7.4

Автоклавировать при 111°C 30 мин.

161. СРЕДА ДЛЯ RHIZOBIUM

Дрожжевой экстракт 1.0 г

Маннит 10.0 г

Агар 15.0 г

Почвенный экстракт (см. ниже) 200.0 мл

Дистиллированная вода 800.0 мл

Почвенный экстракт:

Высушенная на воздухе садовая почва 80.0 г

Na₂CO₃ 0.2 г

Дистиллированная вода 200.0 мл

Почвенный экстракт автоклавировать при 121°C 1 час, профильтровать через бумажный фильтр и довести объем до 20 мл.

pH 7.2

Автоклавировать при 121°C 15 мин.

162. СРЕДА ДЛЯ ANCYLOBACTER-SPIROSOMA

Глюкоза 1.0 г

Пептон 1.0 г

Дрожжевой экстракт 1.0 г

Агар 15.0 г

Дистиллированная вода 1000 0 мл

pH 7.0-7.2

Автоклавировать при 111°C 30 мин.

163. СРЕДА ДЛЯ MICROCYCLUS

Глюкоза 5.0 г

Пептон 5.0 г

Дрожжевой экстракт 5.0 г

Агар 15.0 г

Дистиллированная вода 1000.0 мл

pH 6.8

Автоклавировать при 111°C 30 мин.

164. ПД БУЛЬОН ДЛЯ FLEXIBACTER

Пептон 1.0 г

KNO₃100.0 мг

Дрожжевой экстракт 100.0 мг

K₂HPO₄ 66.7 мг

MgSO₄× 7 H₂O 33.3 мг

Раствор микроэлементов (см. ниже) 1.0 мл

Дистиллированная вода 1000.0 мл

Раствор микроэлементов :

ZnSO₄ × 7 H₂O 22.0 мг

MnSO₄ × 7 H₂O 1.81 г

CuSO₄ × 5 H₂O 79.0 мг

NaBO₃ × 4 H₂O 1.0 г

(NH₄)₆Mo₇O₂₄ × 4 H₂O 9.3 г

FeSO₄ × 7 H₂O 20.0 мг

Co(NO₃)₂ × H₂O 20.0 мг

Трилон Б 10.0 г

Дистиллированная вода 1000.0 мл

pH 7.0

Автоклавировать при 111° C 30 мин.

165. ИНДИКАТОРНАЯ СРЕДА С МАЛОНАТОМ

Дрожжевой экстракт 1.0 г

(NH₄)₂SO₄ 2.0 г

KH₂PO₄ 0.4 г

K₂HPO₄ 0.6 г

NaCl 2.0 г

Малонат Na 3.0 г

Глюкоза 0.25 г

Бромтимоловый синий (0.2%) 12.0 мл

Дистиллированная вода 1000.0 мл

Растворить все компоненты среды, кроме индикатора, в кипящей воде в указанной последовательности. Профильтровать через ватно-марлевый фильтр, установить pH 6.7 и добавить индикатор. Автоклавировать при 121° C 15 мин.

166. АГАР ДЛЯ CORYNEBACTERIUM

Казеино-пептон ферментативный 10.0 г

Дрожжевой экстракт 5.0 г

Глюкоза 5.0 г

NaCl 5.0 г

Агар 15.0 г

Дистиллированная вода 1000.0 мл

pH 7.2-7.4

Автоклавировать при 111° C 30 мин.

167. МЯСО-ПЕПТОННЫЙ АГАР С 3% NaCl

Пептон 10.0 г

Мясной экстракт 3.0 г

NaCl 30.0 г

Агар 20.0 г

Дистиллированная вода 1000.0 мл

pH 7.2-7.4

Автоклавировать при 121° C 15 мин.

168. СРЕДА ДЛЯ CORYNEBACTERIUM С 6% NaCl

Казеино-пептон ферментативный 10.0 г

Дрожжевой экстракт 5.0 г

Глюкоза 5.0 г

NaCl 60.0 г

Агар 15.0 г

Дистиллированная вода 1000.0 мл

pH 7.2-7.4

Автоклавировать при 121° C 15 мин.

169. ГЕТЕРОТРОФНАЯ СРЕДА H3P

Раствор 1:

KH₂PO₄ 2.3 г

Na₂HPO₄ × 2 H₂O 2.9 г

Дистиллированная вода 50.0 мл

Раствор 2:

NH₄Cl 1.0 г

MgSO₄ × 7 H₂O 0.5 г

CaCl₂ × 2 H₂O 0.01 г

MnCl₂ × 4 H₂O 0.0 5 г

NaVO₃ × H₂O 0.0 5 г

Раствор микроэлементов SL-6 (см. ниже) 5.0 мл

Агар (при необходимости) 15.0 г

Дистиллированная вода 850.0 мл

Раствор 3:

Fe(NH₄)-цитрат 0.05 г

Дистиллированная вода 20.0 мл

Раствор 4:

Дрожжевой экстракт 1.0 г

Ацетат Na 1.0 г

Сукцинат Na 1.0 г

DL-Малат 1.0 г

Дистиллированная вода 30.0 мл

pH 7.0

Раствор 5:

Лактат Na 1.0 г

Пируват Na 1.0 г

D-Маннит 1.0 г

D-Глюкоза 2.0 г

Дистиллированная вода 50.0 мл

pH 7.0

Раствор микроэлементов SL-6 :

ZnSO₄ × 7 H₂O 0.1 г

MnCl₂ × 4 H₂O 0.03 г

H₃BO₃ 0.3 г

CoCl₂ × 6 H₂O 0.2 г

CuCl₂ × 2 H₂O 0.01 г

NiCl₂ × 6 H₂O 0.02 г

Na₂MoO₄ 0.03 г

Дистиллированная вода 1000.0 мл

Раствор витаминов:

Рибофлавин 10.0 мг

Тиамин-HCl × 2 H₂O 50.0 мг

Никотиновая кислота 50.0 мг

Пиридоксин- HCl 50.0 мг

Ca-пантотенат 50.0 мг

Биотин 0.1 мг

Фолиевая кислота 0.2 мг

Витамин B₁₂1.0 мг

Дистиллированная вода 100.0 мл

Растворы 1, 2, 3, 4 и раствор микроэлементов автоклавировать отдельно 15 мин при 121° C, охладить до 50° C и внести стерилизованный фильтрованием раствор 5 (нагретый до 50° C) и 5.0 мл стерилизованного фильтрованием раствора витаминов. pH среды должна быть 6.8 без доведения.

170. СРЕДА ДЛЯ CYTOPHAGA

Дрожжевой экстракт 10.0 г

NH₄Cl 1.0 г

MgSO₄ × 7 H₂O 1.0 г

K₂HPO₄ 0.2 г

NaCl 20.0 г

FeCl₃ × 6 H₂O Следы

Агар (при необходимости) 2.0-3.0 г

Дистиллированная вода 1000.0 мл

pH 7.5

Автоклавировать при 121° C 15 мин.

171. ДРОЖЖЕВОЙ АГАР

K₂HPO₄ 1.0 г

MgSO₄ × 7 H₂O 0.5 г

Дрожжевой экстракт 10.0 г

Агар 20.0 г

Водопроводная вода 1000.0 мл

pH 7.0-7.2

Автоклавировать при 121°C 15 мин.

172. ПЕПТОН-СУКЦИНАТНЫЙ АГАР

(NH₄)₂SO₄ 1.0 г

MgSO₄ × 7 H₂O 1.0 г

MnSO₄ × 5 H₂O 2.0 мг

FeCl₃ × 6 H₂O 2.0 мг

Янтарная кислота 1.68 г

Пептон 5.0 г

Агар 1.5 г

Дистиллированная вода 1000.0 мл

pH 7.0

Автоклавировать при 121°C 15 мин.

173. СРЕДА ДЛЯ SPIRILLUM GRACILLE

Пептон 5.0 г

Дрожжевой экстракт 0.5 г

Твин 80 0.02 г

K₂HPO₄ 0.1 г

Агар (при необходимости) 15.0 г

Водопроводная вода 1000.0 мл

pH 7.2

Автоклавировать при 121°C 15 мин.

174. СРЕДА ДЛЯ ДЕНИТРИФИЦИРУЮЩИХ БАКТЕРИЙ (СРЕДА ГИЛЬТАЯ)

Раствор 1:

KNO₃ 1.0 г

Аспарагин 1.0 г

Дистиллированная вода 250.0 мл

Раствор 2:

Цитрат Ca 8.5 г

KH₂PO₄ 1.0 г

Дистиллированная вода 500.0 мл

Раствор 3:

MgSO₄ × 7 H₂O 1.0 г

FeCl₂ × 4 H₂O следы

CaCl₂ × 2 H₂O 0.2 г

Дистиллированная вода 250.0 мл

Стерилизовать растворы отдельно автоклавированием при 121°C 15 мин.

175. СРЕДА 1 ДЛЯ AQUASPIRILLUM

Пептон 2.0 г

Янтарная кислота 1.0 г

(NH₄)₂SO₄ 1.0 г

MgSO₄ × 7 H₂0 1.0 г

CaCl₂ × 2 H₂O 0.03 г

Раствор витаминов (см. ниже) 1.0 мл

Раствор микроэлементов (см. ниже) 1.0 мл

Агар (при необходимости) 15.0 г

Дистиллированная вода 1000.0 мл

pH 7.4-7.6.

Стерилизовать основную среду и микроэлементы отдельно автоклавированием при 121°C 15 мин, раствор витаминов - фильтрованием.

Раствор микроэлементов (Pfennig & Lippert, 1966)

Этилендиаминтетраацетат Na 5.0 г

FeSO₄ × 7 H₂O 2.2 г

ZnSO₄ × 7 H₂O 0.1 г

MnCl₂ × 4 H₂O 0.03 г

H₃BO₃ 0.03 г

CoCl₂ × 6 H₂O 0.2 г

CuCl₂ × 2 H₂O 0.03 г

NiCl₂ × 6 H₂O 0.03 г

Na₂MoO₄ × 2 H₂O 0.03 г

Дистиллированная вода 1000.0 мл

pH 3.0-4.0

Раствор витаминов

Биотин 200.0 мг

Фолиевая кислота 20.0 мг

Пиридоксин-HCl 100.0 мг

Тиамин-HCl 50.0 мг

Рибофлавин 100.0 мг

Никотиновая кислота 50.0 мг

DL-Пантотеновая кислота 50.0 мг

Витамин B₁₂ 1.0 мг

п-Аминобензойная кислота 50.0 мг

Дистиллированная вода 1000.0 мл

176. СРЕДА ДЛЯ METHANOBACTERIUM

Раствор 1:

NaCl 0.9 г

MgCl₂ × 6 H₂O 0.2 г

CaCl₂ × 2 H₂O 0.1 г

NH₄Cl 1.0 г

Дрожжевой экстракт 2.0 г

Резазурин 0.01 г

Раствор микроэлементов (см. ниже) 10.0 мл

Раствор витаминов (см. ниже) 5.0 мл

Буферный раствор а (см. ниже) 10.0 мл

Буферный раствор б (см. ниже) 10.0 мл

Дистиллированная вода 965.0 мл

Раствор 2 (восстановители):

Цистеин-HCl 0.5 г

Na₂S × 9 H₂O 0. 5 г

Дистиллированная вода 10.0 мл

Буферные растворы:

а) K₂HPO₄ 29.0 г

Дистиллированная вода 100.0 мл

б) KH₂PO₄ 15.0 г

Дистиллированная вода 100.0 мл

Раствор микроэлементов:

Нитрилотриуксусная кислота 12.8 г

FeSO₄ × 7 H₂O 0.1 г

MnCl₂ × 6 H₂O 0.1 г

CoCl₂ × 2 H₂O 0.17 г

CaCl₂ × 2 H₂O 0.1

ZnCl₂ 0.1 г

CuCl₂ 0.02 г

H₃BO₃ 0.01 г

Na₂MoO₄ × 2 H₂O 0.01 г

NaCl 1.0 г

Na₂SeO₄ 0.017 г

Дистиллированная вода 1000.0 мл

Растворить нитрилотриуксусную кислоту, нейтрализуя раствор KOH, внести остальные соли. Довести объем до 1000.0 мл. Довести pH до 7.0, используя KOH.

Раствор витаминов:

Биотин 2.0 мг

Фолиевая кислота 2.0 мг

Пиридоксин (B₂) 10.0 мг

Рибофлавин (B₁) 5.0 мг

Пантотеновая кислота 5.0 мг

п-Аминобензойная кислота 5.0 мг

Тиамин-HCl 5.0 мг

Никотиновая кислота 5.0 мг

Витамин B₁₂ 0.1 мг

Липоевая (тиоктовая) кислота 5.0 мг

Дистиллированная вода 1000.0 мл

pH 7.2-7.4

Готовить среду в анаэробных условиях, продувая N₂ без O₂ до стерилизации. После стерилизации внести стерилизованный фильтрованием раствор витаминов и остальные растворы, стерилизованные отдельно автоклавированием при 121°C 15 мин. Культивировать в газовой атмосфере 80% H₂ и 20% CO₂.

177. СРЕДА ДЛЯ CYTOPHAGA LYTICA

Крахмал (растворимый) 10.0 г

Дрожжевой экстракт 1.0 г

Мясной экстракт 1.0 г

Панкреатический гидролизат казеина 2.0 г

CoCl₂ × 6 H₂O 0.02 г

Агар 20.0 г

Дистиллированная вода 1000.0 мл

pH 7.3

Автоклавировать при 121°C 15 мин.

Стерилизовать растворы отдельно автоклавированием при 121°C 15 мин.

178. СРЕДА ДЛЯ МОРСКИХ CYTOPHAGA

Раствор 1:

Дрожжевой экстракт 1.0 г

Триптон 1.0 г

KCl 0.7 г

NaCl 24.7 г

MgSO₄ × 7 H₂O 6.3 г

MgCl₂ × 6 H₂O 4.6 г

Агар 15.0 г

Дистиллированная вода 950.0 мл

Раствор 2:

CaCl₂ × 2 H₂O 1.2 г

Дистиллированная вода 25.0 мл

Раствор 3:

NaHCO₃ 0.2 г

Дистиллированная вода 25.0 мл

pH 7.2

Стерилизовать растворы отдельно автоклавированием при 121°C 15 мин.

179. СРЕДА ДЛЯ SELENOMONAS RUMINANTIUM

Глюкоза 1.0 г

Триптиказа 5.0 г

KH₂PO₄ 1.0 г

Ацетат Na 4.0 г

Дрожжевой экстракт 2.0 г

n-Валериановая кислота 0.1 мл

Резазурин 1.0 мг

Na₂CO₃ 4.0 г

Цистеин-HCl 0.5 г

Дистиллированная вода 1000.0 мл

pH 7.0

Автоклавировать при 111°C 30 мин.

Газовая атмосфера: 100% CO₂.

180. СРЕДА ДЛЯ DESULFOVIBRIO CARBINOLICUS

Раствор 1:

Na₂SO₄ 3.0 г

KH₂PO₄ 0.2 г

NH₄Cl 0.3 г

NaCl 1.0 г

MgCl₂ × 6 H₂O 0.4 г

KCl 0.5 г

CaCl₂ × 2 H₂O 0.15 г

Дистиллированная вода 870.0 мл

Раствор 2:

Раствор микроэлементов SL-10 (см. ниже) 1.0 мл

Раствор 3:

NaHCO₃ 5.0 г

Дистиллированная вода 100.0 мл

Раствор 4:

Этанол 0.7 г

Казаминовые кислоты 0.1 г

Дрожжевой экстракт 0.1 г

Дистиллированная вода 10.0 мл

Раствор 5:

Раствор витаминов (см. ниже) 10.0 мл

Раствор 6:

Na₂S × 9 H₂O 0.4 г

Дистиллированная вода 10.0 мл

Раствор микроэлементов SL-10:

HCl (25%; 7.7 M) 10.0 мл

FeCl₂ × 4 H₂O 1.5 г

ZnCl₂ 70.0 мг

MnCl₂ × 4 H₂O 100.0 мг

H₃BO₃ 6.0 мг

CoCl₂ × 6 H₂O 190.0 мг

CuCl₂ × 2 H₂O 2.0 мг

NiCl₂ × 6 H₂O 24.0 мг

Na₂MoO₄ × 2 H₂O 36.0 мг

Дистиллированная вода 990.0 мл

Раствор витаминов:

Биотин 2.0 мг

Фолиевая кислота 2.0 мг

Пиридоксин-HCl 10.0 мг

Тиамин-HCl 5.0 мг

Рибофлавин 5.0 мг

Никотиновая кислота 5.0 мг

Ca DL-пантотенат 5.0 мг

Витамин B₁₂ 0.1 мг

п-Аминобензойная кислота 5.0 мг

Липоевая кислота 5.0 мг

Дистиллированная вода 1000.0 мл

Раствор 1 прокипятить перед стерилизацией несколько минут, продувая газовой смесью 80% N₂ и 20% CO₂, добавляя раствор бикарбоната Na до установления pH 6.9-7.1. Раствор 1 стерилизовать в атмосфере этой газовой смеси при 121°C 15 мин. Раствор 2 стерилизовать в атмосфере 100% N₂ при 121°C 15 мин. Раствор витаминов стерилизовать фильтрованием. Остальные растворы стерилизовать отдельно автоклавированием при 121°C 15 мин.

pH готовой среды 7.1-7.4

181. КАЗЕИН-ЦИТРАТНЫЙ АГАР

Гидролизат казеина 7.5 г

Дрожжевой экстракт 10.0 г

MgSO₄ × 7 H₂O 20.0 г

Цитрат Na 3.0 г

KCl 2.0 г

NaCl 200.0 г

FeSO₄ (4.98% раствор в 0.0 1 N HCl) 1.0 мл

Агар 20.0 г

Дистиллированная вода 1000.0 мл

pH 7.4

Автоклавировать при 121°C 15 мин.

182. СРЕДА ДЛЯ DESULFOBACTERIUM

Раствор 1:

Na₂SO₄ 3.0 г

KH₂PO₄ 0.2 г

NH₄Cl 0.3 г

NaCl 21.0 г

MgCl₂ × 6 H₂O 3.0 г

KCl 0.5 г

CaCl₂ × 2 H₂O 0.15 г

Резазурин 1.0 мг

Дистиллированная вода 930.0 мл

Раствор 2:

Раствор микроэлементов SL-10 (см. ниже) 1.0 мл

Раствор 3:

Раствор витаминов (см. ниже) 10.0 мл

Раствор 4:

NaHCO₃ 2.5 г

Дистиллированная вода 50.0 мл

Раствор 5:

Na₂SeO₃ × 5 H₂O (3 мг in 1000.0 мл 0.01 M NaOH) 1.0 мл

Раствор 6:

Na₂S × 9 H₂O 0.4 г

Дистиллированная вода 10.0 мл

Раствор 7:

Субстрат – в зависимости от вида бактерий:

Ацетат Na 25% 10.0 мл или индол 0.3 г

NaCl 2.1 г

MgCl₂ × 6 H₂O 0.3 г

Дистиллированная вода 100.0 мл

Фенол 40.0 мг или бензоат Na 400.0 мг

Дистиллированная вода 4.0 мл

Раствор микроэлементов SL-10:

HCl (25%; 7.7 M) 10.0 мл

FeCl₂ × 4 H₂O 1.5 г

ZnCl₂ 70.0 мг

MnCl₂ × 4 H₂O 100.0 мг

H₃BO₃ 6.0 мг

CoCl₂ × 6 H₂O 190.0 мг

CuCl₂ × 2 H₂O 2.0 мг

NiCl₂ × 6 H₂O 24.0 мг

Na₂MoO₄ × 2 H₂O 36.0 мг

Дистиллированная вода 990.0 мл

Раствор витаминов:

п-Аминобензойная кислота 4.0 мг

D(+)-Биотин 1.0 мг

Тиамин-HCl 10.0 мг

Дистиллированная вода 100.0 мл

pH 7.1-7.4

Раствор 1 готовить в анаэробных условиях и Автоклавировать в атмосфере 80% N₂ + 20% CO₂ при 121°C 15 мин. Растворы 2, 4, 5 и 6 продуть N₂ и стерилизовать отдельно автоклавированием при 121°C 15 мин. Раствор 3 (продуть N₂ + CO₂) и раствор 7 (продуть N₂) стерилизовать фильтрованием.

183. СРЕДА БЕННЕТА

Дрожжевой экстракт 1.0 г

Мясной экстракт 1.0 г

Ферментативный гидролизат казеина 2.0 г

Глюкоза 10.0 г

Агар 15.0 г

Дистиллированная вода 1000.0 мл

pH 7.2

Автоклавировать при 111°C 30 мин.

184. СРЕДА ISP 2

Глюкоза 4.0 г

Дрожжевой экстракт 4.0 г

Солодовый экстракт 10.0 г

Агар 15.0 г

Дистиллированная вода 1000.0 мл

pH 7.2

Автоклавировать при 111°C 30 мин.

185. СРЕДА 4 ДЛЯ HALOBACTERIUM

Дрожжевой экстракт 5.0 г

Казаминовые кислоты 5.0 г

Глутамат Na 1.0 г

KCl 2.0 г

Цитрат Na 3.0 г

MgSO₄ × 7 H₂O 20.0 г

NaCl 200.0 г

FeCl₂ × 4 H₂O 36.0 мг

MnCl₂ × 4 H₂O 0.36 мг

Агар 20.0 г

Дистиллированная вода 1000.0 мл

pH 7.0-7.2

Автоклавировать при 111°C 30 мин.

186. СРЕДА 5 ДЛЯ HALOBACTERIUM

Раствор 1:

Казаминовые кислоты 7.5 г

Дрожжевой экстракт 10.0 г

Цитрат Na 3.0 г

KCl 2.0 г

MgSO₄ × 7 H₂O 20.0 г

FeSO₄ × 7 H₂O 0.05 г

MnSO₄ × H₂O 0.2 г

NaCl 250.0 г

Дистиллированная вода 750.0 мл

Раствор 2:

Агар 20.0 г

Дистиллированная вода 250.0 мл

pH 7.4

Стерилизовать отдельно автоклавированием при 121°C 15 мин.

187. СРЕДА ДЛЯ HALOCOCCUS

Раствор 1:

Снятое молоко 50.0 г

Дистиллированная вода 500.0 мл

Раствор 2:

MgSO₄ × 7 H₂O 10.0 г

KNO₃ 2.0 г

NaCl 200.0 г

Fe-цитрат следы

Дистиллированная вода 100.0 мл

Раствор 3:

Неопептон 5.0 г

Глицерин 10.0 г

Агар 25.0 г

Дистиллированная вода 400.0 мл

Стерилизовать раствор 1 автоклавированием при 111°C 15 мин. Смешать растворы 2 и 3, довести pH смеси до 8.4 и Автоклавировать при 121°C 15 мин.

Автоклавировать при 111°C 30 мин.

188. СРЕДА ДЛЯ NATRONOBACTERIUM

Раствор 1:

KH₂PO₄ 1.0 г

KCl 1.0 г

NH₄Cl 1.0 г

MgSO₄ × 7 H₂O 0.24 г

CaSO₄ × 2 H₂O 0.17 г

Раствор микроэлементов SL-10 (см. ниже) 1.0 мл

NaCl 200.0 г

Глутамат Na 1.0 г

Дрожжевой экстракт 5.0 г

Казаминовые кислоты 5.0 г

Агар, при необходимости (расплавить до внесения NaCl) 20.0 г

Дистиллированная вода до 1000.0 мл

pH 6.5

Раствор 2:

Na₂CO₃ 5.0 г

Дистиллированная вода 50.0 мл

Раствор микроэлементов SL-10:

HCl (25%; 7.7 M) 10.0 мл

FeCl₂ × 4 H₂O 1.5 г

ZnCl₂ 70.0 мг

MnCl₂ × 4 H₂O 100.0 мг

H₃BO₃ 6.0 мг

CoCl₂ × 6 H₂O 190.0 мг

CuCl₂ × 2 H₂O 2.0 мг

NiCl₂ × 6 H₂O 24.0 мг

Na₂MoO₄ × 2 H₂O 36.0 мг

Дистиллированная вода 990.0 мл

pH 9.0-9.5

Стерилизовать отдельно автоклавированием при 121°C 15 мин.

189. СРЕДА 6 ДЛЯ HALOBACTERIUM

NaCl 156.0 г

MgCl₂ × 6 H₂O 13.0 г

MgSO₄ × 7 H₂O 20.0 г

CaCl₂ × 6 H₂O 1.0 г

KCl 4.0 г

NaHCO₃ 0.2 г

NaBr 0.5 г

Дрожжевой экстракт 5.0 г

Глюкоза 1.0 г

Дистиллированная вода 1000.0 мл

pH 7.0

Автоклавировать при 111°C 30 мин.

190. СРЕДА ПРАУЗЕРА 79

Глюкоза 10.0 г

Пептон 10.0 г

Дрожжевой экстракт 2.0 г

Казаминовые кислоты 2.0 г

NaCl 6.0 г

Агар 20.0 г

Водопроводная вода 1000.0 мл

pH 7.5

Автоклавировать при 111°C 30 мин.

191. КРАХМАЛЬНО-ДРОЖЖЕВОЙ АГАР

Дрожжевой экстракт 2.0 г

Крахмал (растворимый) 10.0 г

Агар 20.0 г

Водопроводная вода 1000.0 мл

pH 7.3

Автоклавировать при 121°C 15 мин.

192. MYA-АГАР

Глюкоза 2.0 г

L-Аспарагин 1.0 г

K₂HPO₄ 0.5 г

MgSO₄ × 7 H₂O 0.5 г

Раствор микроэлементов (см. ниже) 1.0 мл

Агар 20.0 г

Дистиллированная вода 1000.0 мл

Раствор микроэлементов:

FeSO₄ × 7 H₂O 0.1 г

CuSO₄ × 5 H₂O 0.1 г

ZnSO₄ × 7 H₂O 0.1 г

Дистиллированная вода 100.0 мл

pH 7.4

Стерилизовать основную среду при 111°C 30 мин, раствор микроэлементов при 121°C 15 мин.

193. АЦЕТАТНЫЙ АГАР

NaCl 5.0 г

K₂HPO₄ 1.0 г

NH₄H₂PO₄ 1.0 г

MgSO₄ × 7 H₂O 0.2 г

Ацетат Na 2.0 г

Бромтимоловый синий (0.2%) 40.0 мл

Агар 20.0 г

Дистиллированная вода 1000.0 мл

pH 7.2

Индикатор внести после доведения pH и фильтрации через ватно-марлевый фильтр.

Автоклавировать при 121°C 15 мин.

194. СРЕДА ИНМИ 3

NaCl 250.0 г

KCl 2.0 г

Цитрат Na 3.0 г

MgSO₄ × 7 H₂O 20.0 г

Казаминовые кислоты 5.0 г

Дрожжевой экстракт 2.5 г

Агар 20.0 г

Дистиллированная вода 1000.0 мл

pH 7.2

Автоклавировать при 121°C 15 мин.

195. СРЕДА ИНМИ 4

Дрожжевой экстракт 2.5 г

Казаминовые кислоты 5.0 г

pH 9.5

Автоклавировать при 121°C 15 мин.

196. СРЕДА ДЛЯ ПУРПУРНЫХ СЕРОБАКТЕРИЙ (СРЕДА ВАН НИЛЯ)

NH₄Cl 1.0 г

K₂HPO₄ 0.5 г

MgCl₂ × 6 H₂O 0.2 г

NaHCO₃ 1.0 г

Na₂S × 9 H₂O 1.0 г

Водопроводная вода 1000.0 мл

pH 7.6

Стерилизовать основную среду и сульфид отдельно автоклавированием при 121°C 15 мин.

197. СРЕДА ДЛЯ RHODOSPIRILLUM (СРЕДА ПФЕННИГА)

NH₄Cl 0.4 г

KH₂PO₄ 0.5 г

MgSO₄ × 7 H₂O 0.2 г

NaCl 0.4 г

CaCl₂ × 2 H₂O 0.05 г

Ацетат, или бутират, или пропионат, или сукцинат 1.0 г

Дрожжевой экстракт 0.2 г

Fe-цитрат (0.1%) 5.0 мл

Раствор микроэлементов по Pfennig (см. ниже) 1.0 мл

Витамин B₁₂ (аптечный раствор, 0,01%) 1.0 мл

Дистиллированная вода 1000.0 мл

Раствор микроэлементов по Pfennig:

Этилендиаминтетраацетат Na 1.5 г

Раствор микроэлементов по Hogland (см. ниже) 6.0 мл

FeSO₄ × 7 H₂O 0.2 г

MnCl₂ × 4 H₂O 0.02 г

ZnSO₄ × 7 H₂O 0.1 г

Дистиллированная вода 1000.0 мл

Раствор микроэлементов по Hogland:

Этилендиаминтетраацетат Na 5.0 г

FeSO₄ × 7 H₂O 2.0 г

ZnSO₄ × 7 H₂O 100.0 мг

MnCl₂ × 4 H₂O 30.0 мг

H₃BO₃ 300.0 мг

CoCl₂ × 6 H₂O 200.0 мг

CuCl₂ 10.0 мг

NiCl₂ × 6 H₂O 20.0 мг

Na₂MoO₄ × 2 H₂O 20.0 мг

Дистиллированная вода 1000.0 мл

Стерилизовать основную среду и раствор микроэлементов отдельно автоклавированием при 121°C 15 мин.

198. СРЕДА ДЛЯ THIOBACILLUS DENITRIFICANS (СРЕДА ТЕЙЛОРА)

KNO₃ 2.0 г

NH₄Cl 1.0 г

KH₂PO₄ 2.0 г

NaHCO₃ 2.0 г

MgSO₄ × 7 H₂O 0.8 г

Na₂S₂O₃ × 5 H₂O 5.0 г

Раствор микроэлементов по Pfennig (см. ниже) 1.0 мл

Дистиллированная вода 1000.0 мл

Раствор микроэлементов по Pfennig:

Этилендиаминтетраацетат Na (ЭДТА) 1.5 г

Раствор микроэлементов по Hogland (см. ниже) 6.0 мл

FeSO₄ × 7 H₂O 0.2 г

MnCl₂ × 4 H₂O 0.02 г

ZnSO₄ × 7 H₂O 0.1 г

Дистиллированная вода 1000.0 мл

Раствор микроэлементов по Hogland:

Этилендиаминтетраацетат Na (ЭДТА) 5.0 г

FeSO₄ × 7 H₂O 2.0 г

ZnSO₄ × 7 H₂O 100.0 мг

MnCl₂ × 4 H₂O 30.0 мг

H₃BO₃ 300.0 мг

CoCl₂ × 6 H₂O 200.0 мг

CuCl₂ 10.0 мг

NiCl₂ × 6 H₂O 20.0 мг

Na₂MoO₄ × 2 H₂O 20.0 мг

Дистиллированная вода 1000.0 мл

Стерилизовать основную среду и раствор микроэлементов отдельно автоклавированием при 121°C 15 мин.

199. СРЕДА ДЛЯ THIOBACILLUS DENITRIFICANS (СРЕДА БААЛСРУДА)

KNO₃ 2.0 г

NH₄Cl 0.5 г

KH₂PO₄ 2.0 г

NaHCO₃ 1.0 г

MgCl₂ × 6 H₂O 0.5 г

Na₂S₂O₃ × 5 H₂O 5.0 г

FeSO₄ × 7 H₂O 0.01 г

Дистиллированная вода 1000.0 мл

pH 7.0

Стерилизовать соли железа, фосфата и бикарбоната отдельно автоклавированием при 121°C 15 мин.

200. СРЕДА ДЛЯ THIOBACILLUS DENITRIFICANS (СРЕДА ЛИСКЕ)

KNO₃ 5.0 г

KH₂PO₄ 0.2 г

NaHCO₃ 1.0 г

MgCl₂ × 6 H₂O 0.1 г

Na₂S₂O₃ × 5 H₂O 5.0 г

CaCl₂ × 6 H₂O Следы

FeCl₃ × 6 H₂O Следы

Дистиллированная вода 1000.0 мл

Автоклавировать при 121°C 15 мин.

201. МОДИФИЦИРОВАННАЯ СРЕДА БРОКА ДЛЯ СЕРООКИСЛЯЮЩИХ БАКТЕРИЙ

(NH₄)₂SO₄ 1.3 г

KH₂PO₄ 0.37 г

MgSO₄ × 7 H₂O 0.25 г

CaCl₂ × 6 H₂O 0.07 г

Дистиллированная вода 1000.0 мл

pH 2.4 (пределы: 2.3-3.0; довести H₂SO₄).

Добавки к среде

Раствор микроэлементов по Pfennig (см. ниже) 1.0 мл

Дрожжевой экстракт 0.2 г

Элементная сера 10.0 г

CaCO₃ 10.0 г

Для культивирования гетеротрофных представителей группы в среду после стерилизации внести также

Пептон 1.75 г

Сахароза 0.25 г

Раствор микроэлементов по Pfennig:

Этилендиаминтетраацетат Na 1.5 г

Раствор микроэлементов по Hogland (см. ниже) 6.0 мл

FeSO₄ × 7 H₂O 0.2 г

MnCl₂ × 4 H₂O 0.02 г

ZnSO₄ × 7 H₂O 0.1 г

Дистиллированная вода 1000.0 мл

Раствор микроэлементов по Hogland:

Этилендиаминтетраацетат Na 5.0 г

FeSO₄ × 7 H₂O 2.0 г

ZnSO₄ × 7 H₂O 100.0 мг

MnCl₂ × 4 H₂O 30.0 мг

H₃BO₃ 300.0 мг

CoCl₂ × 6 H₂O 200.0 мг

CuCl₂ 10.0 мг

NiCl₂ × 6 H₂O 20.0 мг

Na₂MoO₄ × 2 H₂O 20.0 мг

Дистиллированная вода 1000.0 мл

Стерилизовать основную среду и остальные компоненты отдельно автоклавированием при 121°C 15 мин.

202. СРЕДА ДЛЯ МАГНИТНЫХ БАКТЕРИЙ

Виннокаменная (винная) кислота 0.37 г

Янтарная кислота 0.37 г

Ацетат Na 0.05 г

KH₂PO₄ 0.68 г

NaNO₃ 0.12 г

Раствор витаминов (см. ниже) 10.0 мл

Раствор микроэлементов (см. ниже) 5.0 мл

Хинат Fe 2.0 мл

Тиогликолят Na 0.05 г

Резазурин 0.5 мг

Агар 1.3 г

Бидистиллированная вода 1000.0 мл

pH 6.75 (довести NaOH)

Раствор витаминов :

Биотин 200.0 мг

Фолиевая кислота 20.0 мг

Пиридоксин-HCl 100.0 мг

Тиамин-HCl 50.0 мг

Рибофлавин 100.0 мг

Никотиновая кислота 50.0 мг

DL-Пантотеновая кислота 50.0 мг

Витамин B₁₂ 1.0 мг

п-Аминобензойная кислота 50.0 мг

Дистиллированная вода 1000.0 мл

Раствор микроэлементов :

Нитрилотриуксусная кислота 12.8 г

FeCl₂ × 4 H₂O 0.2 г

MnCl₂ × 4 H₂O 0.1 г

CoCl₂ × 6 H₂O 0.17 г

CaCl₂ × 2 H₂O 0.1 г

ZnCl₂ 0.1 г

CuCl₂ 0.02 г

Na₂MoO₄ × 2 H₂O 0.01 г

NiCl₂ × 6 H₂O 0.026 г

NaCl 1.0 г

Na₂SeO₃ 5 H₂O 0.02 г

Дистиллированная вода 1000.0 мл

Растворить итрилотриуксусную кислоту, нейтрализуя раствор KOH, внести остальные соли. Довести объем до 1000.0 мл. Довести pH до 7.0, используя KOH.

Основную среду продуть N₂ и стерилизовать в атмосфере азота автоклавированием при 121°C 15 мин. Раствор витаминов стерилизовать фильтрованием. Раствор микроэлементов Автоклавировать при 121° C 15 мин.

203. СРЕДА ДЛЯ FLEXIBACTER (СРЕДА ЛЕВИНА)

Глицерофосфат Na 0.1 г

KNO₃ 0.1 г

MgSO₄ × 7 H₂O 0.1 г

Раствор микроэлементов (см. ниже) 1.0 мл

Витамин B₁₂ 1.0 мкг

CaCl₂ × 6 H₂O 0.1 г

Трис 1.0 г

Тиамин 1.0 мг

Казаминовые кислоты 1.0 г

Дистиллированная вода 1000.0 мл

Раствор микроэлементов :

Нитрилотриуксусная кислота 12.8 г

FeCl₂ × 4 H₂O 0.2 г

MnCl₂ × 4 H₂O 0.1 г

CoCl₂ × 6 H₂O 0.17 г

CaCl₂ × 2 H₂O 0.1 г

ZnCl₂ 0.1 г

CuCl₂ 0.02 г

Na₂MoO₄ × 2 H₂O 0.01 г

NiCl₂ × 6 H₂O 0.026 г

NaCl 1.0 г

Na₂SeO₃ × 5 H₂O 0.02 г

Дистиллированная вода 1000.0 мл

Растворить нитрилотриуксусную кислоту, нейтрализуя раствор KOH, внести остальные соли. Довести объем до 1000.0 мл. Довести pH до 7.5, используя KOH.

Стерилизовать основную среду и раствор микроэлементов отдельно автоклавированием при 121°C 15 мин.

204. СРЕДА ДЛЯ CLOSTRIDIUM

Глюкоза 10.0 г

Пептон 12.0 г

NaCl 2.0 г

Агар 16.0 г

Дистиллированная вода 1000.0 мл

pH 6.8-7.2

В среду можно внести мел для нейтрализации кислоты, образуемой при культивировании.

Автоклавировать при 111° C 30 мин.

205. ОВСЯНЫЙ АГАР A

Овсяная мука (овсяные хлопья) 20.0 г

Агар 20.0 г

Водопроводная вода 1000.0 мл

pH 7.2

Варить овсяные хлопья в 1000.0 мл водопроводной воды 20 мин, профильтровать через ватно-марлевый фильтр, довести объем до 1000.0 мл и внести агар.

Автоклавировать при 121° C 15 мин.

206. СРЕДА ISP 3

Овсяная мука 20.0 г

Солевой раствор А (см. ниже) 1.0 мл

Агар 20.0 г

Дистиллированная вода 1000.0 мл

Солевой раствор А :

FeSO₄ 0.1 г

MnCl₂ 0.1 г

ZnSO₄ 0.1 г

Дистиллированная вода 100.0 мл

Варить овсяные хлопья в 1000.0 мл водопроводной воды 20 мин, профильтровать через ватно-марлевый фильтр, довести объем до 1000.0 мл и внести агар.

pH 7.2

Стерилизовать основную среду и солевой раствор отдельно автоклавированием при 121°C 15 мин.

207. МИНЕРАЛЬНЫЙ АГАР 1

Крахмал (растворимый) 20.0 г

K₂HPO₄ 0.5 г

MgSO₄ × 7 H₂O 0.5 г

KNO₃ 1.0 г

NaCl 0.5 г

FeSO₄ 0.01 г

Агар 30.0 г

Дистиллированная вода 1000.0 мл

pH 7.2-7.4

Автоклавировать при 121° C 15 мин.

208. ГЛЮКОЗА-АСПАРАГИНОВЫЙ АГАР

Глюкоза 10.0 г

L-Аспарагин 0.5 г

K₂HPO₄ 0.5 г

Агар 20.0 г

Дистиллированная вода 1000.0 мл

pH 6.8.

Автоклавировать при 111° C 30 мин.

209. МОДИФИКАЦИЯ СРЕДЫ ЧАПЕКА С КРАХМАЛОМ

Крахмал (растворимый) 20.0 г

K₂HPO₄ 0.5 г

KNO₃ 1.0 г

NaCl 0.2 г

MgSO₄ × 7 H₂O 0.3 г

CaCO₃ 0.5 г

FeSO₄ 0.01 г

Агар 20.0 г

Дистиллированная вода 1000.0 мл

pH 7.2-7.4

Автоклавировать при 121° C 15 мин.

210. ГЛИЦЕРИН-АСПАРАГИНОВЫЙ АГАР

L-Аспарагин 1.0 г

Глицерин 10.0 г

K₂HPO₄ 1.0 г

Солевой раствор А (см. ниже) 1.0 мл

Агар 20.0 г

Дистиллированная вода 1000.0 мл

Солевой раствор А :

FeSO₄ 0.1 г

MnCl₂ 0.1 г

ZnSO₄ 0.1 г

Дистиллированная вода 100.0 мл

pH 7.0-7.4

Стерилизовать отдельно автоклавированием при 121°C 15 мин.

211. ОВСЯНЫЙ АГАР С 0.1% ДРОЖЖЕВЫМ ЭКСТРАКТОМ

Овсяная мука 20.0 г

Дрожжевой экстракт 1.0 г

Агар 20.0 г

Водопроводная вода 1000.0 мл

pH 7.2

Варить овсяные хлопья в 1000.0 мл водопроводной воды 20 мин, профильтровать через ватно-марлевый фильтр, довести объем до 1000.0 мл и внести дрожжевой экстракт и агар.

Автоклавировать при 121°C 15 мин.

212. МОДИФИКАЦИЯ СРЕДЫ ЧАПЕКА С ГЛЮКОЗОЙ

Глюкоза 20.0 г

K₂HPO₄ 0.5 г

KNO₃ 1.0 г

NaCl 0.2 г

MgSO₄ × 7 H₂O 0.3 г

CaCO₃ 0.5 г

FeSO₄ 0.0 1 г

Агар 20.0 г

Дистиллированная вода 1000.0 мл

pH 7.2-7.4

Автоклавировать при 111°C 30 мин.

213. ОРГАНИЧЕСКИЙ АГАР 2

Бульон Хоттингера (HiMedia M1425) 0.69 г

Пептон 5.0 г

NaCl 5.0 г

Глюкоза 10.0 г

Агар 30.0 г

Водопроводная вода 1000.0 мл

pH 7.0-7.2

Автоклавировать при 111°C 30 мин.

214. КРАХМАЛЬНО-АММИАЧНЫЙ АГАР

Крахмал (растворимый) 10.0 г

K₂HPO₄ 1.0 г

MgSO₄ × 7 H₂O 1.0 г

NaCl 1.0 г

(NH₄)₂SO₄ 2.0 г

CaCO₃ 2.0 г

Солевой раствор А (см. ниже) 1.0 мл

Агар 20.0 г

Дистиллированная вода 1000.0 мл

Солевой раствор А:

FeSO₄ × 7 H₂O 0.1 г

MnCl₂ × 4 H₂O 0.1 г

ZnSO₄ × 7 H₂O 0.1 г

Дистиллированная вода 100.0 мл

pH 7.0-7.4

Стерилизовать отдельно автоклавированием при 121°C 15 мин.

215. ГЛИЦЕРИН-НИТРАТНЫЙ АГАР

Глицерин 30.0 г

NaNO₃ 2.0 г

K₂HPO₄ 1.0 г

MgSO₄ × 7 H₂O 0.5 г

KCl 0.5 г

FeSO₄ 0.01 г

Агар 20.0 г

Дистиллированная вода 1000.0 мл

pH 7.0-7.2.

Автоклавировать при 121°C 15 мин.

216. ТЕТРАТИОНАТНЫЙ БУЛЬОН (СРЕДА МЮЛЛЕРА)

Раствор 1:

Бульон Хоттингера (HiMedia M1425) 20.24 г

Дистиллированная вода 880.0 мл

Раствор 2:

Раствор Люголя (см. ниже) 20.0 мл

Раствор 3:

50% Na₂S₂O₃ × 5 H₂O 100.0 мл

Раствор Люголя:

KJ 20.0 г

J₂ 25.0 г

Дистиллированная вода 100.0 мл

pH 7.2 - 7.4

Стерилизовать раствор 3 при 121°C 15 мин. Раствор Люголя стерилизовать фильтрованием. Среду разлить по стерильным флаконам с CaCO₃ (25 г CaCO₃ на 1000.0 мл среды). Флаконы с CaCO₃ стерилизовать сухим жаром (170°C 60 мин).

217. СРЕДА ДЛЯ МИКРОМОНОСПОР

Глюкоза 10.0 г

Крахмал (растворимый) 20.0 г

Дрожжевой экстракт 5.0 г

Ферментативный гидролизат казеина 5.0 г

CaCO₃ 1.0 г

Агар 20.0 г

Дистиллированная вода 1000.0 мл

pH 7.2

Автоклавировать при 111°C 30 мин.

218. ПДА НА МОРСКОЙ ВОДЕ

Пептон 5.0 г

Дрожжевой экстракт 3.0 г

Агар 12.0 г

Дистиллированная вода 250.0 мл

Морская вода фильтрованная состаренная 750.0 мл

pH 7.5-7.6

Автоклавировать при 121°C 15 мин.

219. СРЕДА ДЛЯ ГАЛОФИЛЬНЫХ БАЦИЛЛ

NaCl 100.0 г

NaHCO₃ 10.0 г

Na₂CO₃ 10.0 г

Питательный бульон 1000.0 мл

pH 9.5

Автоклавировать при 121°C 15 мин.

220. СРЕДА ПДА

Пептон 10.0 г

Дрожжевой экстракт 10.0 г

NaCl 5.0 г

Агар 15.0 г

Дистиллированная вода 1000.0 мл

pH 7.2

Автоклавировать при 121°C 15 мин.

221. СРЕДА ДЛЯ МЕТАНОТРОФНЫХ БАКТЕРИЙ

KNO₃ 1.0 г

KH₂PO₄ 0.7 г

MgSO₄ × 7 H₂O 0.2 г

CaCl₂ 0.02 г

Na₂HPO₄ × 12 H₂O 1.5 г

Этилендиаминтетраацетат Na 5.0 мг

FeSO₄ × 7 H₂O 2.0 мг

ZnSO₄ × 7 H₂O 0.1 мг

MnCl₂ × 4 H₂O 0.03 мг

CoCl₂ × 6 H₂O 0.2 мг

CuCl₂ × 2 H₂O 0.1 мг

NiCl₂ × 6 H₂O 0.02 мг

Na₂MoO₄ 0.03 мг

Дистиллированная вода 1000.0 мл

pH 6.7-7.1

Автоклавировать при 121°C 15 мин.

Культивировать в смешанной атмосфере метана и воздуха (1:1).

222. СРЕДА ДЛЯ МОРСКИХ МЕТИЛОТРОФНЫХ БАКТЕРИЙ

KH₂PO₄ 2.0 г

(NH₄)₂SO₄ 2.0 г

NaCl 30.0 г

MgSO₄ × 7 H₂O 0.025 г

FeSO₄ × 7 H₂O 0.02 г

Дрожжевой экстракт 0.1 г

Mетанол 5.0 мл

Биотин 0.01 мг

Дистиллированная вода 1000.0 мл

pH 7.0

Автоклавировать при 121°C 15 мин. Метанол и биотин стерилизовать фильтрованием.

223. СРЕДА ДЛЯ ОЛИГОКАРБОФИЛЬНЫХ БАКТЕРИЙ

Раствор 1 (основной раствор):

Пептон 0.25 г

Дрожжевой экстракт 0.25 г

Агар 5.0 г

Раствор 2 20.0 мл

Дистиллированная вода 965.0 мл

Глюкоза (2.5 %) 10.0 мл

Раствор 3 5.0 мл

pH 7.5

Раствор 2 (микроэлементы):

Нитрилотриуксусная кислота 10.0 г

MgSO₄ × 7 H₂O 29.7 г

CaCl₂ × 2 H₂O 3.34 г

Na₂MoO₄ × 2 H₂O 12.67 мг

FeSO₄ × 7 H₂O 350.0 мг

Этилендиаминтетраацетат Na 125.0 мг

ZnSO₄ × 7 H₂O 548.0 мг

MnSO₄ × H₂O 77.0 мг

CuSO₄ × 5 H₂O 20.0 мг

Co(NO₃)₂ × 6 H₂O 12.4 мг

Na₂B₄O₇ × 10 H₂O 8.8 мг

Дистиллированная вода 950.0 мл

Растворить нитрилотриуксусную кислоту, нейтрализуя раствор KOH, внести остальные соли. Довести объем до 1000.0 мл.

Довести pH до 7.2

Раствор 3 (витамины):

Биотин 4.0 мг

Фолиевая кислота 4.0 мг

Пиридоксин-HCl 20.0 мг

Рибофлавин 10.0 мг

Тиамин-HCl 10.0 мг

Никотинамид 10.0 мг

D-пантотенат Ca 10.0 мг

Витамин B₁₂ 0.2 мг

п-Аминобензойная кислота 10.0 мг

Дистиллированная вода 1000.0 мл

pH 6.8–7.0

Стерилизовать глюкозу при 111°C 30 мин, растворы 1 и 2 при 121°C 15 мин. Раствор витаминов стерилизовать фильтрованием.

Хранить в холодильнике при +5°C.

224. СРЕДА ДЛЯ DESULFOTOMACULUM ALKALIPHILUM

Раствор 1 (основной раствор):

Na₂CO₃ 0.5 г

Na₂SO₄ 5.0 г

NaCl 5.0 г

Формиат Na 5.0 г

Дрожжевой экстракт 1.0 г

Раствор 2 (см. ниже) 10.0 мл

Раствор 3 (см. ниже) 2.0 мл

Раствор 4 (см. ниже) 1.0 мл

Резазурин следы

Дистиллированная вода 1000.0 мл

NaHCO₃ конечная концентрация 8.0 г /1000.0 мл

Na₂S × 9 H₂O конечная концентрация 0.5 г/1000.0 мл

Раствор 2:

KH₂PO₄ 0.2 г

MgCl₂ × 6 H₂O 0.1 г

NH₄Cl 1.0 г

KCl 0.2 г

Дистиллированная вода 1000.0 мл

Раствор 3 (раствор витаминов):

Биотин 10.0 мг

Фолиевая кислота 10.0 мг

Пиридоксин-HCl 50.0 мг

Рибофлавин 25.0 мг

Тиамин-HBr 25.0 мг

Никотинамид 25.0 мг

D-пантотенат 25.0 мг

Витамин B₁₂ 0.5 мг

п-Аминобензойная кислота 25.0 мг

Липоевая кислота 25.0 мг

Дистиллированная вода 500.0 мл

Хранить в холодильнике при +5°C.

Раствор 4 (микроэлементы):

Na₂MoO₄ × 2 H₂O 20.0 мг

Fe(NH₄)₂(SO₄)₂ × 6 H₂O 400.0 мг

FeSO₄ × 7 H₂O 200.0 мг

ZnSO₄ × 7 H₂O 200.0 мг

MnCl₂ × 4 H₂O 720.0 мг

NiCl₂ 100.0 мг

CuSO₄ × 5 H₂O 20.0 мг

AlK(SO₄)₂ × 12 H₂O 20.0 мг

CoCl₂ × 6 H₂O 200.0 мг

H₃BO₃ 20.0 мг

HCl 5.0 мл

Дистиллированная вода 200.0 мл

pH среды после стерилизации 8.7-9.0

Раствор витаминов стерилизовать фильтрованием. Раствор 1 и остальные растворы стерилизовать отдельно автоклавированием при 121°C 15 мин и соединить после охлаждения.

225. 1/5 КРАХМАЛЬНО-ДРОЖЖЕВОЙ АГАР

Дрожжевой экстракт 0.4 г

Растворимый крахмал 2.0 г

Агар 20.0 г

Дистиллированная вода 1000.0 мл

pH 7.3

Автоклавировать при 121°C 15 мин.

226. СРЕДА ДЛЯ ACTINOPOLYSPORA MORTIVALLIS

Казаминовые кислоты 7.5 г

Дрожжевой экстракт 10.0 г

MgSO₄ × 7 H₂O 20.0 г

Цитрат Na₃ × 2 H₂O 3.0 г

KCl 2.0 г

NaCl 150.0 г

FeSO₄ (4.98% в 0.0 1 N HCl) 1.0 мл

Агар 20.0 г

Дистиллированная вода 1000.0 мл

pH 7.4

Автоклавировать при 121°C 15 мин.

227. СРЕДА ДЛЯ MICROLUNATUS

Глюкоза 0.5 г

Пептон 0.5 г

Дрожжевой экстракт 0.5 г

Глутамат Na 0.5 г

KH₂PO₄ 0.44 г

(NH₄)₂SO₄ 0.1 г

MgSO₄ × 7 H₂O 0.1 г

Дистиллированная вода 1000.0 мл

pH 7.0

Автоклавировать при 111°C 30 мин.

228. СРЕДА ДЛЯ MICROCOCCUS HALOPHILUS

Пептон 10.0 г

Дрожжевой экстракт 5.0 г

Солодовый экстракт 5.0 г

Казаминовые кислоты 5.0 г

Мясной экстракт 2.0 г

Глицерин 2.0 г

Твин-80 50.0 мг

MgSO₄ × 7 H₂O 1.0 г

NaCl 50.0 г

Агар 20.0 г

Дистиллированная вода 1000.0 мл

pH 7.2

Автоклавировать при 121°C 15 мин.

229. СРЕДА ДЛЯ ALKALIBACTER

(NH₄)₂SO₄ 1.0 г

NH₄Cl 0.4 г

Na₂S₂O₃ × 5 H₂O 0.1 г

K₂HPO₄ 0.5 г

MgSO₄ × 7 H₂O 0.1 г

CaCl₂ × 2 H₂O 0.05 г

NaCl 10.0 г

FeSO₄ × 7 H₂O 2.0 мг

Раствор микроэлементов (см. ниже) 10.0 мл

Резазурин 0.01 г

Дрожжевой экстракт 0.25 г

Триптон 2.0 г

Глюкоза 5.0 г

Раствор витаминов (см. ниже) 10.0 мл

L-цистеин 0.5 г

Na₂CO₃ (5% w/v) 50.0 мл

Дистиллированная вода 930.0 мл

Раствор микроэлементов:

Нитрилотриуксусная кислота 12.8 г

FeSO₄ × 7 H₂O 0.1 г

MnCl₂ × 4 H₂O 0.1 г

CoCl₂ × 2 H₂O 0.17 г

CaCl₂ × 2 H₂O 0.1 г

ZnCl₂ 0.1 г

CuCl₂ 0.02 г

H₃BO₃ 0.01 г

Na₂MoO₄ × 2 H₂O 0.01 г

NaCl 1.0 г

Na₂SeO₄ 0.017 г

Дистиллированная вода 1000.0 мл

Растворить нитрилотриуксусную кислоту, нейтрализуя раствор KOH, внести остальные соли. Довести объем до 1000.0 мл. Довести pH до 7.0, используя KOH.

Раствор витаминов:

Биотин 2.0 мг

Фолиевая кислота 2.0 мг

Пиридоксин (B₂) 10.0 мг

Рибофлавин (B₁) 5.0 мг

Пантотеновая кислота 5.0 мг

п-Аминобензойная кислота 5.0 мг

Тиамин-HCl 5.0 мг

Никотиновая кислота 5.0 мг

Витамин B₁₂ 0.1 мг

Липоевая (тиоктовая) кислота 5.0 мг

Дистиллированная вода 1000.0 мл

Основную среду автоклавировать при 111°C 30 мин. Раствор витаминов стерилизовать фильтрованием. Остальные растворы автоклавировать при 121°C 15 мин (Na₂CO₃ стерилизовать в атмосфере 100% N₂).

pH готовой среды 9.0

230. СРЕДА ДЛЯ CALDITRIX ABYSSI

Морская соль 37.9 г

NH₄Cl 0.33 г

KH₂PO₄ 0.33 г

Резазурин 0.50 мг

Дрожжевой экстракт (20% w/v) 15.0 мл

Раствор микроэлементов (см. ниже) 10.0 мл

Раствор витаминов (см. ниже) 10.0 мл

Na₂S × 9 H₂O (3% w/v) 20.0 мл

Селенит-вольфрамовый раствор (см. ниже) 1.0 мл

Дистиллированная вода 900.0 мл

Раствор микроэлементов:

Нитрилотриуксусная кислота 12.8 г

FeSO₄ × 7 H₂O 0.1 г

MnCl₂ × 4 H₂O 0.1 г

CoCl₂ × 2 H₂O 0.17 г

CaCl₂ × 2 H₂O 0.1 г

ZnCl₂ 0.1 г

CuCl₂ 0.02 г

H₃BO₃ 0.01 г

Na₂MoO₄ × 2 H₂O 0.01 г

NaCl 1.0 г

Na₂SeO₄ 0.017 г

Дистиллированная вода 1000.0 мл

Растворить нитрилотриуксусную кислоту, нейтрализуя раствор KOH, внести остальные соли. Довести объем до 1000.0 мл. Довести pH до 7.0, используя KOH.

Раствор витаминов:

Биотин 2.0 мг

Фолиевая кислота 2.0 мг

Пиридоксин-HCl 10.0 мг

Тиамин-HCl × 2 H₂O 5.0 мг

Рибофлавин 5.0 мг

Никотиновая кислота 5.0 мг

D-Ca-пантотенат 5.0 мг

Витамин B₁₂ 0.1 мг

п-Аминобензойная кислота 5.0 мг

Липоевая кислота 5.0 мг

Дистиллированная вода 1000.0 мл

Селенит-вольфрамовый раствор:

NaOH 0.5 г

Na₂SeO₃ × 5 H₂O 3 мг

Na₂WO₄ × 2 H₂O 4 мг

Дистиллированная вода 1000.0 мл

Основную среду готовить в анаэробных условиях и автоклавировать в атмосфере 80% N₂ + 20% CO₂ при 121°C 15 мин. Раствор витаминов стерилизовать фильтрованием, остальные растворы автоклавированием при 121°C 15 мин (раствор NaHCO₃ стерилизовать в атмосфере N₂).

pH готовой среды 6.8

231. СРЕДА ДЛЯ CARBOXYDOCELLA SPOROPRODUCENS

KCl 0.33 г

MgCl₂ × 6 H₂O 0.52 г

CaCl₂ × 2 H₂O 0.29 г

NH₄Cl 0.33 г

KH₂PO₄ 0.33 г

NaHCO₃ 1.0 г

Раствор микроэлементов SL-4 (см. ниже) 10.0 мл

Резазурин 0.5 мг

Раствор витаминов (см. ниже) 10.0 мл

Пируват Na 2.5 г

Дрожжевой экстракт 0.05 г

Na₂S × 9 H₂O 0.3 г

Дистиллированная вода 1000.0 мл

Раствор микроэлементов SL-4:

Этилендиаминтетраацетат Na 0.5 г

FeSO₄ × 7 H₂O 0.2 г

Раствор микроэлементов SL-6 (см. ниже) 100.0 мл

Дистиллированная вода 900.0 мл

Раствор витаминов:

Биотин 2.0 мг

Фолиевая кислота 2.0 мг

Пиридоксин 10.0 мг

Рибофлавин 5.0 мг

Пантотеновая кислота 5.0 мг

п-Аминобензойная кислота 5.0 мг

Тиамин-HCl 5.0 мг

Никотиновая кислота 5.0 мг

Витамин B₁₂ 0.1 мг

Липоевая (тиоктовая) кислота 5.0 мг

Дистиллированная вода 1000.0 мл

Раствор микроэлементов SL-6:

ZnSO₄ × 7 H₂O 0.1 г

MnCl₂ × 4 H₂O 0.03 г

H₃BO₃ 0.3 г

CoCl₂ × 6 H₂O 0.2 г

CuCl₂ × 2 H₂O 0.01 г

NiCl₂ × 6 H₂O 0.02 г

Na₂MoO₄ 0.03 г

Дистиллированная вода 1000.0 мл

Растворить ингредиенты, кроме бикарбоната, дрожжевого экстракта, витаминов, пирувата Na и сульфида, прокипятить среду 1 мин, охладить до комнатной температуры в атмосфере N₂. Разлить под азотом в пробирки или флаконы и автоклавировать при 121°C 15 мин. Витамины стерилизовать фильтрованием. Растворы дрожжевого экстракта, пирувата Na и сульфида готовить в атмосфере N₂, раствор бикарбоната в атмосфере 80% N₂ + 20% CO₂. Все растворы стерилизовать отдельно автоклавированием при 121°C 15 мин. Довести pH до 7.0 стерильным бескислородным 10% (w/v) раствором NaHCO₃. Инокулированные сосуды заполнить моноксидом углерода до избыточного давления 2 бар.

232. СРЕДА ДЛЯ CARBOXYDOTHERMUS FERRIREDUCENS

KH₂PO₄ 0.33 г

NH₄Cl 0.33 г

KCl 0.33 г

MgCl₂ × 6 H₂O 0.33 г

CaCl₂ × 2 H₂O 0.33 г

NaHCO₃ 2.0 г

Глицерин (87%) 3.0 мл

Раствор витаминов (см. ниже) 10.0 мл

Раствор микроэлементов SL-10 (см. ниже) 1.0 мл

NiCl₂ × 6 H₂O 200.0 мкг

Na₂SeO₃ × 5 H₂O 120.0 мкг

Na₂WO₄ × 2 H₂O 30.0 мкг

Дрожжевой экстракт 1.0 г

Na₂-9,10-антрахинон-2,6-дисульфонат (Sigma A9706) 8.25 г

Дистиллированная вода 1000.0 мл

Раствор витаминов:

Биотин 2.0 мг

Фолиевая кислота 2.0 мг

Пиридоксин 10.0 мг

Рибофлавин 5.0 мг

Пантотеновая кислота 5.0 мг

п-Аминобензойная кислота 5.0 мг

Тиамин-HCl 5.0 мг

Никотиновая кислота 5.0 мг

Витамин B₁₂ 0.1 мг

Липоевая (тиоктовая) кислота 5.0 мг

Дистиллированная вода 1000.0 мл

Раствор микроэлементов SL-10:

HCl (25%; 7.7 M) 10.0 мл

FeCl₂ × 4 H₂O 1.5 г

ZnCl₂ 70.0 мг

MnCl₂ × 4 H₂O 100.0 мг

H₃BO₃ 6.0 мг

CoCl₂ × 6 H₂O 190.0 мг

CuCl₂ × 2 H₂O 2.0 мг

NiCl₂ × 6 H₂O 24.0 мг

Na₂MoO₄ × 2 H₂O 36.0 мг

Дистиллированная вода 990.0 мл

Растворить ингредиенты (исключаяя CaCl₂ × 2 H₂O, NaHCO₃, и витамины), прокипятить среду несколько минут до растворения антрахинона, охладить в атмосфере 80% N₂ и 20% CO₂ до комнатной температуры. Внести 2 г NaHCO₃ и довести pH до 6.8 NaOH. Разлить в пробирки или во флаконы в этой же газовой атмосфере. Автоклавировать при 121°C 15 мин. Перед засевом внести раствор микроэлементов, CaCl₂ и витамины из бескислородных стерильных запасных растворов. Раствор витаминов стерилизовать фильтрованием. Раствор микроэлементов и CaCl₂ Автоклавировать при 121°C 15 мин.

233. СРЕДА ДЛЯ CLOSTRIDIUM ALKALICELLULOSI

NH₄Cl 0.5 г

KH₂PO₄ 0.2 г

MgCl₂ × 6 H₂O 0.1 г

KCl 0.2 г

Раствор микроэлементов SL-10 (см. ниже) 1.0 мл

Селенит-вольфрамовый раствор (см. ниже) 1.0 мл

Na₂CO₃ 1.0 г

NaHCO₃ 7.6 г

NaCl 10.0 г

Дрожжевой экстракт 0.2 г

Целлобиоза 3.0 г

Na₂S × 9 H₂O 0.5 г

Раствор микроэлементов SL-10:

HCl (25%; 7.7 M) 10.0 мл

FeCl₂ × 4 H₂O 1.5 г

ZnCl₂ 70.0 мг

MnCl₂ × 4 H₂O 100.0 мг

H₃BO₃ 6.0 мг

CoCl₂ × 6 H₂O 190.0 мг

CuCl₂ × 2 H₂O 2.0 мг

NiCl₂ × 6 H₂O 24.0 мг

Na₂MoO₄ × 2 H₂O 36.0 мг

Дистиллированная вода 990.0 мл

Селенит-вольфрамовый раствор:

NaOH 0.5 г

Na₂SeO₃ × 5 H₂O 3 мг

Na₂WO₄ × 2 H₂O 4 мг

Дистиллированная вода 1000.0 мл

Растворить ингредиенты, исключая целобиозу и сульфид, продуть среду N₂ в течение 30–60 мин. Разлить под азотом в пробирки или флаконы и автоклавировать при 121°C 15 мин. Целлобиозу стерилизовать фильтрованием, сульфид автоклавированием при 121°C 15 мин, растворы готовить в атмосфере N₂.

pH готовой среды 8.8-9.0.

234. СРЕДА ДЛЯ DESULFOHALOBIUM UTAHENSE

NaCl 100.0 г

MgSO₄ × 7 H₂O 10.0 г

KCl 6.0 г

CaCl₂ × 2 H₂O 0.4 г

NH₄Cl 1.0 г

KH₂PO₄ 0.1 г

Дрожжевой экстракт 0.5 г

Раствор микроэлементов SL-10 (см. ниже) 1.0 мл

Селенит-вольфрамовый раствор (см. ниже) 1.0 мл

NaHCO₃ 4.0 г

Na-(L)-лактат 2.5 г

Резазурин 0.5 мг

Na₂S × 9 H₂O 0.3 г

Дистиллированная вода 1000.0 мл

Раствор микроэлементов SL-10:

HCl (25%; 7.7 M) 10.0 мл

FeCl₂ × 4 H₂O 1.5 г

ZnCl₂ 70.0 мг

MnCl₂ × 4 H₂O 100.0 мг

H₃BO₃ 6.0 мг

CoCl₂ × 6 H₂O 190.0 мг

CuCl₂ × 2 H₂O 2.0 мг

NiCl₂ × 6 H₂O 24.0 мг

Na₂MoO₄ × 2 H₂O 36.0 мг

Дистиллированная вода 990.0 мл

Селенит-вольфрамовый раствор:

NaOH 0.5 г

Na₂SeO₃ × 5 H₂O 3 мг

Na₂WO₄ × 2 H₂O 4 мг

Дистиллированная вода 1000.0 мл

Растворить ингредиенты, кроме лактата, бикарбоната и сульфида, прокипятить среду 1 мин, охладить до комнатной температуры в атмосфере 80% N₂ и 20% CO₂. Разлить в пробирки или во флаконы в этой же газовой атмосфере. Автоклавировать при 121°C 15 мин. Лактат и сульфид готовить в атмосфере N₂, бикарбонат в атмосфере 80% N₂ и 20% CO₂, растворы стерилизовать отдельно автоклавированием при 121°C 15 мин.

pH готовой среды 7.0-7.2

235. СРЕДА ДЛЯ DESULFONATRONUM COOPERATIVUM

KH₂PO₄ 0.2 г

MgCl₂ × 6 H₂O 0.1 г

NH₄Cl 1.0 г

KCl 0.2 г

Na₂SO₄ 5.0 г

NaCl 10.0 г

Na₂CO₃ 3.5 г

Раствор микроэлементов SL-10 (см. ниже) 1.0 мл

Раствор витаминов (см. ниже) 10.0 мл

Дрожжевой экстракт 1.0 г

Резазурин 0.5 мг

Формиат Na 4.0 г

Na₂S × 9 H₂O 0.5 г

Дистиллированная вода 1000.0 мл

Раствор микроэлементов SL-10:

HCl (25%; 7.7 M) 10.0 мл

FeCl₃ × 4 H₂O 1.5 г

ZnCl₂ 70.0 мг

MnCl₂ × 4 H₂O 100.0 мг

H₃BO₃ 6.0 мг

CoCl₂ × 6 H₂O 190.0 мг

CuCl₂ × 2 H₂O 2.0 мг

NiCl₂ × 6 H₂O 24.0 мг

Na₂MoO₄ × 2 H₂O 36.0 мг

Дистиллированная вода 990.0 мл

Раствор витаминов:

Биотин 2.0 мг

Фолиевая кислота 2.0 мг

Пиридоксин 10.0 мг

Рибофлавин  5.0 мг

Пантотеновая кислота 5.0 мг

п-Аминобензойная кислота 5.0 мг

Тиамин-HCl 5.0 мг

Никотиновая кислота 5.0 мг

Цианкобаламин (B₁₂) 0.1 мг

Липоевая (тиоктовая) кислота 5.0 мг

Дистиллированная вода 1000.0 мл

Растворить ингредиенты, исключая формиат и сульфид, продуть среду N₂ в течение 30 мин. Внести сульфид, довести pH до 8.8-9.0, разлить в атмосфере N₂ в пробирки Хангейта и автоклавировать при 121°C 15 мин. Перед засевом добавить формиат и витамины из стерильных бескислородных запасных растворов (формиат автоклавировать при 121°C 15 мин, раствор витаминов – фильтрованием).

236. СРЕДА ДЛЯ DESULFOTOMACULUM CARBOXIDOVORANS

Раствор 1:

NaCl 1.17 г

MgCl₂ × 6 H₂O 0.4 г

KCl 0.3 г

CaCl₂ × 2 H₂O 0.15 г

NH₄Cl 0.27 г

KH₂PO₄ 0.2 г

Na₂SO₄ 2.84 г

Пируват 2.2 г

Дрожжевой экстракт 0.5 г

Раствор витаминов (см. ниже) 1.0 мл

Раствор микроэлементов 1.0 мл (см. ниже)

Дистиллированная вода 940.0 мл

Раствор 2:

Na₂S × 9 H₂O 0.36 г

Дистиллированная вода 10.0 мл

Раствор бикарбоната Na для подщелачивания:

NaHCO₃ 4.5 г

Дистиллированная вода 50.0 мл

Раствор витаминов:

п-Аминобензойная кислота 4.0 мг

D(+)-Биотин 1.0 мг

Тиамин-HCl 10.0 мг

Дистиллированная вода 100.0 мл

Раствор микроэлементов:

FeCl₂ × 4 H₂O 1.5 г

ZnCl₂ 68.0 мг

MnCl₂ × 4 H₂O 100.0 мл

H₃BO₃ 62.0 мг

CoCl₂ × 6 H₂O 120.0 мл

Na₂MoO₄ × 2 H₂O 24.0 мг

HCl (0.05 M) 1000.0 мл

pH 7.0-7.2

Раствор 1 прокипятить перед стерилизацией несколько минут, продувая газовой смесью 80% N₂ и 20% CO₂, добавляя раствор бикарбоната Na до 6.9 - 7.1. Раствор 1 стерилизовать в атмосфере этой газовой смеси при 121°C 15 мин. Раствор 2 стерилизовать в атмосфере 100% N₂ при 121°C 15 мин. Раствор витаминов и пируват стерилизовать фильтрованием.

237. СРЕДА ДЛЯ DESULFUROCOCCUS FERMENTANS

NH₄Cl 0.33 г

KH₂PO₄ 0.33 г

KCl 0.33 г

CaCl₂ × 2 H₂O 0.44 г

MgCl₂ × 6 H₂O 0.7 г

NaCl 0.50 г

Раствор микроэлементов SL-10 (см. ниже) 1.0 мл

Раствор витаминов (см. ниже) 10.0 мл

Дрожжевой экстракт 0.2 г

Крахмал 5.0 г

Резазурин 1.0 мг

NaHCO₃ 0.8 г

Na₂S × 9 H₂O 0.5 г

Дистиллированная вода 1000.0 мл

Раствор микроэлементов SL-10:

HCl (25%; 7.7 M) 10.0 мл

FeCl₂ × 4 H₂O 1.5 г

ZnCl₂ 70.0 мг

MnCl₂ × 4 H₂O 100.0 мг

H₃BO₃ 6.0 мг

CoCl₂ × 6 H₂O 190.0 мг

CuCl₂ × 2 H₂O 2.0 мг

NiCl₂ × 6 H₂O 24.0 мг

Na₂MoO₄ × 2 H₂O 36.0 мг

Дистиллированная вода 990.0 мл

Раствор витаминов:

Биотин 2.0 мг

Фолиевая кислота 2.0 мг

Пиридоксин 10.0 мг

Рибофлавин (B₁) 5.0 мг

Пантотеновая кислота 5.0 мг

п-Аминобензойная кислота 5.0 мг

Тиамин-HCl 5.0 мг

Никотиновая кислота 5.0 мг

Витамин B₁₂ 0.1 мг

Липоевая (тиоктовая) кислота 5.0 мг

Дистиллированная вода 1000.0 мл

Растворить ингредиенты, кроме бикарбоната, витаминов и сульфида, прокипятить среду 1 мин, охладить до комнатной температуры в атмосфере 80% N₂ и 20% CO₂. Довести pH до 6.2-6.4 и автоклавировать при 121°C 15 мин. Внести витамины и бикарбонат из бескислородных стерильных запасных растворов (раствор витаминов стерилизовать фильтрованием, бикарбонат готовить в атмосфере 80% N₂ и 20% CO₂ и автоклавировать при 121°C 15 мин).

238. СРЕДА 2 ДЛЯ AQUASPIRILLUM

(NH₄)₂SO₄ 1.0 г

MgSO₄ × 7 H₂O 1.0 г

CaCl₂ × 6 H₂O 30.0 мг

Na₂HPO₄ 10.0 мг

Казаминовые кислоты 1.5 г

Сукцинат Na (10% раствор) 10.0 мл

Na₂S₂O₃ × 5 H₂O (10% раствор) 1.0 мл

Раствор витаминов (см. ниже) 5.0 мл

Раствор микроэлементов SL-10 (см. ниже) 1.0 мл

Раствор витаминов:

Биотин 200.0 мг

Фолиевая кислота 20.0 мг

Пиридоксин-HCl 100.0 мг

Тиамин-HCl 50.0 мг

Рибофлавин 100.0 мг

Никотиновая кислота 50.0 мг

DL-Пантотеновая кислота 50.0 мг

Витамин B₁₂ 1.0 мг

п-Аминобензойная кислота 50.0 мг

Дистиллированная вода 1000.0 мл

Раствор микроэлементов SL-10:

HCl (25%; 7.7 M) 10.0 мл

FeCl₂ × 4 H₂O 1.5 г

ZnCl₂ 70.0 мг

MnCl₂ × 4 H₂O 100.0 мг

H₃BO₃ 6.0 мг

CoCl₂ × 6 H₂O 190.0 мг

CuCl₂ × 2 H₂O 2.0 мг

NiCl₂ × 6 H₂O 24.0 мг

Na₂MoO₄ × 2 H₂O 36.0 мг

Дистиллированная вода 990.0 мл

Агар 0.5 г

Дистиллированная вода 985.0 мл

pH 7.5

Основную среду, сукцинат, тиосульфат и микроэлементы стерилизовать отдельно автоклавированием при 121°C 15 мин. Раствор витаминов стерилизовать фильтрованием.

239. СРЕДА ДЛЯ METHYLOPHAGA ALCALICA

KH₂PO₄ 1.0 г

KNO₃ 1.0 г

MgSO₄ × 7 H₂O 0.22 г

NaCl 30.0 г

Na₂CO₃ 5.0 г

Раствор микроэлементов (см. ниже) 1.0 мл

Витамин B₁₂ 0.02 мг

Mетанол 10.0 мл

Дистиллированная вода 1000.0 мл

pH 9.5

Раствор микроэлементов :

Цитрат железа 30.0 мг

CaCl₂ × 2 H₂O 30.0 мг

MgCl₂ × 4 H₂O 5.0 мг

ZnSO₄ × 7 H₂O 5.0 мг

CuSO₄ × 5 H₂O 0.5 г

Дистиллированная вода 1000.0 мл

Приготовить среду без Na₂CO₃. Основную среду, микроэлементы и Na₂CO₃ стерилизовать отдельно автоклавированием при 121°C 15 мин. В остывшую среду внести стерилизованные фильтрованием витамин B₁₂ и метанол. При приготовлении твердой среды добавить 2% агара в основную среду. перед смешиванием охладить раствор Na₂CO₃ и основную среду до 50-55°C.

240. СРЕДА ДЛЯ METHYLOTHERMUS THERMALIS

KNO₃ 0.25 г

NH₄Cl 0.25 г

KH₂PO₄ 0.13 ^г

Na₂HPO₄ × 12 H₂O 0.358 г

MgSO₄ × 7 H₂O 0.4 г

CaCl₂ 0.1 г

Агар 20.0 г

Дистиллированная вода 1000.0 мл

pH 6.8

Газовая фаза метан-воздух (4:1)

Автоклавировать при 121°C 15 мин.

241. СРЕДА ДЛЯ OCEANITHERMUS PROFUNDUS

NH₄Cl 0.33 г

MgCl₂ × 6 H₂O 0.33 г

CaCl₂ × 2 H₂O 0.33 г

KCl 0.33 г

KNO₃ 0.33 г

NaCl 30.0 г

HEPES 2.38 г

Дрожжевой экстракт 0.2 г

Триптон 1.0 г

Сахароза 2.0 г

Раствор витаминов (см. ниже) 1.0 мл

Раствор микроэлементов (см. ниже) 1.0 мл

Дистиллированная вода 1000.0 мл

Раствор витаминов:

Биотин 2.0 мг

Фолиевая кислота 2.0 мг

Пиридоксин 10.0 мг

Рибофлавин 5.0 мг

Пантотеновая кислота 5.0 мг

п-Аминобензойная кислота 5.0 мг

Тиамин-HCl 5.0 мг

Никотиновая кислота 5.0 мг

Витамин B₁₂ 0.1 мг

Липоевая (тиоктовая) кислота 5.0 мг

Дистиллированная вода 1000.0 мл

Раствор микроэлементов:

Нитрилотриуксусная кислота 12.8 г

FeSO₄ × 7 H₂O 0.1 г

MnCl₂ × 4 H₂O 0.1 г

CoCl₂ × 2 H₂O 0.17 г

CaCl₂ × 2 H₂O 0.1 г

ZnCl₂ 0.1 г

CuCl₂ 0.02 г

H₃BO₃ 0.01 г

Na₂MoO₄ × 2 H₂O 0.01 г

NaCl 1.0 г

Na₂SeO₄ 0.017 г

Дистиллированная вода 1000.0 мл

Растворить нитрилотриуксусную кислоту, нейтрализуя раствор KOH, внести остальные соли. Довести объем до 1000.0 мл. Довести pH до 7.0, используя KOH.

Приготовить среду анаэробно в атмосфере N₂, исключив CaCl₂, MgCl₂, KNO₃, триптон, дрожжевой экстракт, витамины и сахарозу. pH 7.0-7.5. Разлить по сосудам для анаэробного культивирования в атмосфере N₂ и автоклавировать при 121°C 15 мин. CaCl₂, MgCl₂, KNO₃, триптон, дрожжевой экстракт и раствор микроэлементов автоклавировать отдельно при 121°C 15 мин, сахарозу при 111^°C 30 мин, витамины стерилизовать фильтрованием. Добавки вносить в остывшую среду.

242. СРЕДА ДЛЯ PSYCHROBACTER

Пептон 5.0 г

Дрожжевой экстракт 1.0 г

Морская соль 17.0 г

Дистиллированная вода 1000.0 мл

pH 7.2

Автоклавировать при 121°C 15 мин.

243. СРЕДА ДЛЯ ROSEICYCLUS

KH₂PO₄ 0.3 г

MgSO₄ 2.0 г

NH₄Cl 0.3 г

KCl 0.3 г

CaCl₂ × 2 H₂O 0.05 г

Na₂SO₄ 15.0 г

NaHCO₃ 0.5 г

Ацетат Na 1.0 г

Малат Na 1.0 г

Дрожжевой экстракт 1.0 г

Пептон 0.5 г

Агар 20.0 г

Дистиллированная вода 1000.0 мл

pH 7.8-8.0

Автоклавировать при 121°C 15 мин.

244. СРЕДА ДЛЯ SULFOBACILLUS

Раствор A:

(NH₄)₂SO₄ 3.0 г

KCl 0.1 г

K₂HPO₄ 0.5 г

MgSO₄ × 7 H₂O 0.5 г

Ca(NO₃)₂ 0.01 г

Дистиллированная вода 680.0 мл

pH 2.0-2.2 (довести H₂SO₄)

Раствор B:

FeSO₄ × 7 H₂O 44.2 г

Дистиллированная вода 300.0 мл

H₂SO₄ (10 N) 1.0 мл

Раствор C:

Дрожжевой экстракт (1%) 20.0 мл

pH 1.9-2.4

Растворы стерилизовать отдельно при 121°C 15 мин.

245. СРЕДА ДЛЯ THERMINCOLA

NH₄Cl 1.0 г

MgCl₂ × 6 H₂O 0.33 г

CaCl₂ × 2 H₂O 0.1 г

KCl 0.33 г

KH₂PO₄ 0.5 г

Резазурин 0.5 мг

Минеральный эликсир Вольфа (см. ниже) 1.0 мл

Раствор витаминов (см. ниже) 20.0 мл

NaHCO₃ 0.5 г

Na₂CO₃ 0.5 г

Ацетат Na 0.2 г

Дрожжевой экстракт 0.2 г

Na₂S × 9 H₂O 1.0 г

Дистиллированная вода 1000.0 мл

Минеральный эликсир Вольфа:

MgSO₄ × 7 H₂O 30.0 г

MnSO₄ × H₂O 5.0 г

NaCl 10.0 г

FeSO₄ × 7 H₂O 1.0 г

CoCl₂ × 6 H₂O 1.8 г

CaCl₂ × 2 H₂O 1.0 г

ZnSO₄ × 7 H₂O 1.8 г

CuSO₄ × 5 H₂O 0.1 г

KAl(SO₄)₂ × 12 H₂O 0.18 г

H₃BO₃ 0.10 г

Na₂MoO₄ × 2 H₂O 0.1 г

(NH₄)₂Ni(SO₄)₂ × 6 H₂O 2.8 г

Na₂WO₄ × 2 H₂O 0.1 г

Na₂SeO₄ 0.1 г

Дистиллированная вода 1000.0 мл

Довести pH до 1.0 разбавленной H₂SO₄, затем добавить и растворить соли.

Раствор витаминов:

Биотин 2.0 мг

Фолиевая кислота 2.0 мг

Пиридоксин 10.0 мг

Рибофлавин 5.0 мг

Пантотеновая кислота 5.0 мг

п-Аминобензойная кислота 5.0 мг

Тиамин-HCl 5.0 мг

Никотиновая кислота 5.0 мг

Витамин B₁₂ 0.1 мг

Липоевая (тиоктовая) кислота 5.0 мг

Дистиллированная вода 1000.0 мл

Растворить ингредиенты, кроме карбонатов, дрожжевого экстракта, витаминов и сульфида, прокипятить среду 1 мин, охладить до комнатной температуры в атмосфере N₂. Внести в среду карбонаты и сульфид, разлить в атмосфере CO по флаконам (по 10 мл во флаконы вместимостью 50 мл) и автоклавировать 121°C 15 мин. Перед инокуляцией добавить дрожжевой экстракт из стерильного бескислородного запасного раствора, приготовленного в атмосфере N₂ и довести pH до 8.0 стерильным бескислородным раствором 1 N HCl (растворы автоклавировать при 121°C 15 мин). Добавить стерилизованный фильтрованием раствор витаминов.

246. СРЕДА ДЛЯ VULCANITHERMUS

NH₄Cl 0.33 г

MgCl₂ × 6 H₂O 0.33 г

CaCl₂ × 2 H₂O 0.33 г

KCl 0.33 г

KNO₃ 0.33 г

NaCl 25.0 г

PIPES 3.6 г

Дрожжевой экстракт 0.5 г

Триптон 1.0 г

Сахароза 1.0 г

Раствор витаминов (см. ниже) 1.0 мл

Раствор микроэлементов (см. ниже) 1.0 мл

Дистиллированная вода 1000.0 мл

pH 6.8

Раствор витаминов:

Биотин 2.0 мг

Фолиевая кислота 2.0 мг

Пиридоксин 10.0 мг

Рибофлавин 5.0 мг

Пантотеновая кислота 5.0 мг

п-Аминобензойная кислота 5.0 мг

Тиамин-HCl 5.0 мг

Никотиновая кислота 5.0 мг

Витамин B₁₂ 0.1 мг

Липоевая (тиоктовая) кислота 5.0 мг

Дистиллированная вода 1000.0 мл

Раствор микроэлементов:

Нитрилотриуксусная кислота 12.8 г

FeSO₄ × 7 H₂O 0.1 г

MnCl₂ × 4 H₂O 0.1 г

CoCl₂ × 2 H₂O 0.17 г

CaCl₂ × 2 H₂O 0.1 г

ZnCl₂ 0.1 г

CuCl₂ 0.02 г

H₃BO₃ 0.01 г

Na₂MoO₄ × 2 H₂O 0.01 г

NaCl 1.0 г

Na₂SeO₄ 0.017 г

Дистиллированная вода 1000.0 мл

Растворить нитрилотриуксусную кислоту, нейтрализуя раствор KOH, внести остальные соли. Довести объем до 1000.0 мл. Довести pH до 7.0, используя KOH.

Приготовить среду анаэробно в атмосфере N₂, исключив CaCl₂, MgCl₂, KNO₃, триптон, дрожжевой экстракт, витамины и сахарозу. Разлить по сосудам для анаэробного культивирования в атмосфере N₂ и автоклавировать при 121°C 15 мин. CaCl₂, MgCl₂, KNO₃, триптон, дрожжевой экстракт и раствор микроэлементов автоклавировать отдельно при 121°C 15 мин, сахарозу при 111^°C 30 мин, витамины стерилизовать фильтрованием. Добавки вносить в остывшую среду.

247. СРЕДА ДЛЯ RHODOBLASTUS

Дрожжевой экстракт 0.1 г

Сукцинат Na 1.0 г

KH₂PO₄ 0.5 г

MgSO₄ × 7 H₂O 0.4 г

NaCl 0.4 г

NH₄Cl 0.4 г

CaCl₂ × 2 H₂O 0.05 г

Раствор микроэлементов SL-6 (см. ниже) 1.0 мл

Mетанол 0.01-1%

Дистиллированная вода 1000.0 мл

pH 5.7

Раствор микроэлементов SL-6:

ZnSO₄ × 7 H₂O 0.1 г

MnCl₂ × 4 H₂O 0.03 г

H₃BO₃ 0.3 г

CoCl₂ × 6 H₂O 0.2 г

CuCl₂ × 2 H₂O 0.01 г

NiCl₂ × 6 H₂O 0.02 г

Na₂MoO₄ × 2 H₂O 0.03 г

Дистиллированная вода 1000.0 мл

Стерилизовать основную среду и раствор микроэлементов отдельно при 121°C 15 мин, метанол стерилизовать фильтрованием.

248. СРЕДА ПФЕННИГА

KH₂PO₄ 0.34 г

NH₄Cl 0.34 г

MgSO₄ × 7 H₂O 0.5 г

CaCl₂ × 2 H₂O 0.05 г

KCl 0.34 г

Раствор микроэлементов SLA (см. ниже) 1.0 мл

Витамин B₁₂ 20 мкг

NaHCO₃ 1.5 г

Na₂S × 7–9 H₂O 0.4 г

Na₂S₂O₃ × 5 H₂O 0.5 г

NaCl 15.0 г

MgCl₂ × 6 H₂O 2.5 г.

pH 7.5

Раствор микроэлементов SLA:

FeCl₂ × 4 H₂O 1.8 мг

CoCl₂ × 6 H₂O 250 мг

NiCl₂ × 6 H₂O 10 мг

CuCl₂ × 2 H₂O 10 мг

MnCl₂ × 4 H₂O 70 мг

ZnCl₂ 100 мг

H₃BO₃ 500 мг

Na₂MoO₄ × 2 H₂O 30 мг

Na₂SeO₃ × 5 H₂O 10 мг

Дистиллированная вода 1000.0 мл

Стерилизовать основную среду и раствор микроэлементов отдельно при 121°C 15 мин, витамин B₁₂ стерилизовать фильтрованием.

249. СРЕДА ДЛЯ METHYLOPHAGA MURALIS

KH₂PO₄ 2.0 г

(NH₄)₂SO₄ 2.0 г

МgSO₄ × 7 H₂O 0.025 г

NaCl 30.0 г

FeSO₄ × 7 H₂O 0.02 г

Метанол 5.0 мл

Витамин B₁₂ 20.0 мкг

Дистиллированная вода 1000.0 мл

pH 8.0

Автоклавировать при 121°C 15 мин. В стерильную остывшую среду внести витамин B₁₂ и метанол из запасных растворов, стерилизованных фильтрованием.

250. МОДИФИЦИРОВАННАЯ СРЕДА ДЛЯ МОРСКИХ МЕТИЛОТРОФНЫХ БАКТЕРИЙ С ДРОЖЖЕВЫМ ЭКСТРАКТОМ И БИОТИНОМ

KH₂PO₄ 2.0 г

(NH₄)₂SO₄ 2.0 г

MgSO₄ × 7 H₂O 0.025 г

FeSO₄ × 7 H₂O 0.0 2 г

Дрожжевой экстракт 0.1 г

Метанол 10.0 мл

Биотин 0.01 мг

Дистиллированная вода 1000.0 мл

pH 7.0

Автоклавировать при 121°C 15 мин. В стерильную остывшую среду внести биотин и метанол из запасных растворов, стерилизованных фильтрованием.

251. СРЕДА ДЛЯ CHELATIVORANS OLIGOTROPHICUS

Этилендиаминтетраацетат Na 1.0 г

Na₂HPO₄ × 12 H₂O 4.0 г

KH₂PO₄ 0.26 г

MgSO₄ × 7 H₂O 1.0 г

CaCl₂ × 2 H₂O 0.4 г

Раствор микроэлементов (см. ниже) 2.0 мл

Раствор витаминов (см. ниже) 1.0 мл

Дистиллированная вода 1000.0 мл

pH 7.0

Автоклавировать при 121°C 15 мин, внести стерилизованные фильтрованием растворы витаминов и микроэлементов.

Раствор микроэлементов:

FeCl₂ × 4 H₂O 1.5 г

H₃BO₃ 60.0 мг

MnCl₂ × 4 H₂O 100.0 мг

CoCl₂ × 6 H₂O 120.0 мг

ZnCl₂ 70.0 мг

NiCl₂ × 6 H₂O 25.0 мг

CuCl₂ × 2 H₂O 15.0 мг

Na₂MoO₄ × 2 _H2O 25.0 мг

HCl 0.05 М 1000.0 мл

Раствор витаминов:

Пиридоксин-HCl 100.0 мг

Тиамин-HCl × 2 H₂O 50.0 мг

Рибофлавин 50.0 мг

Никотиновая кислота 50.0 мг

Пантотеновая кислота 50.0 мг

п-Аминобензойная кислота 50.0 мг

Липоевая кислота 50.0 мг

Никотинамид 50.0 мг

Витамин B₁₂ 50.0 мг

Биотин 20.0 мг

Фолиевая кислота 20.0 мг

Дистиллированная вода 1000.0 мл

252. МОДИФИЦИРОВАННАЯ СРЕДА ДЛЯ МЕТИЛОТРОФОВ С KCNS

KH₂PO₄ 2.0 г

(NH₄)₂SO₄ 2.0 г

MgSO₄ × 7 H₂O 0.025 г

NaCl 0.5 г

KCNS 0.24 г

FeSO₄ × 7 H₂O 0.02 г

Метанол 5.0 мл или

Метиламин 3.0 г

Дистиллированная вода 1000.0 мл

pH 7.0

Автоклавировать при 121°C 15 мин. В стерильную остывшую среду внести метанол или метиламин, стерилизованные фильтрованием.

253. МОДИФИЦИРОВАННАЯ СРЕДА ДЛЯ МЕТАНОТРОФОВ С ЭТАНОЛОМ

KNO₃ 1.0 г

KH₂PO₄ 0.7 г

MgSO₄ × 7 H₂O 0.2г

CaCl₂ 0.02 г

Na₂HPO₄ × 2 H₂O 1.5 г

Этилендиаминтетраацетат Na 5.0 мг

FeSO₄ × 7 H₂O 2.0 мг

ZnSO₄ × 7 H₂O 0.1 мг

MnCl₂ × 4 H₂O 0.03 мг

CoCl₂ × 6 H₂O 0.2 мг

CuCl₂ × 2 H₂O 0.1 мг

NiCl₂ × 6 H₂O 0.02 мг

Na₂MoO₄ 0.03 мг

Этанол 5.0 мг

Дистиллированная вода 1000.0 мл

pH 6.7 - 7.1

Автоклавировать при 121°C 15 мин. В стерильную остывшую среду внести этанол, стерилизованный фильтрованием.

Выращивать под смесью метана с воздухом (1:1).

254. МОДИФИКАЦИЯ СРЕДЫ С ТВИНОМ-80 ДЛЯ МОЛОЧНОКИСЛЫХ БАКТЕРИЙ (10% NaCl)

Мясной экстракт 1.2 г

Дрожжевой экстракт 5.0 г

Глюкоза 2.5 г

Твин-80 1.0 мл

K₂HPO₄ 2.0 г

Na-ацетат 5.0 г

NaCl 60.0 г

NH₄-цитрат 2.0 г

MgSO₄ × 7 H₂O 0.2 г

MnSO₄ × 4 H₂O 0.05 г

Агар 5.0 г

Дистиллированная вода 1000.0 мл

pH 6.0-6.5

Автоклавировать при 111°C 30 мин.

255. МИНЕРАЛЬНАЯ СРЕДА ДЛЯ METHYLOMICROBIUM KENYENSE

Na₂CO₃ 2.3 г

NaHCO₃ 7.0 г

K₂HPO₄ × 12 H₂O 0.5 г

KNO₃ 0.5 г

MgSO₄ × 7 H₂O 0.4 г

NaCl 5.0 г

Раствор микроэлементов (см. ниже) 1.0 мл

Дистиллированная вода 1000.0 мл

Раствор микроэлементов:

Этилендиаминтетраацетат Na 5.0 г

CuCl₂ × 2 H₂O 0.1 г

FeSO₄ × 7 H₂O 2.0 г

ZnSO₄ × 7 H₂O 0.1 г

NiCl₂ × 6 H₂O 0.02 г

CoCl₂ × 6 H₂O 0.2 г

Na₂MoO₄ 0.03 г

Дистиллированная вода 1000.0 мл

Приготовить среду без раствора микроэлементов, NaHCO₃ и Na₂CO₃. Основную среду, раствор микроэлементов, NaHCO₃ и Na₂CO₃ стерилизовать отдельно при 121°C в течение 15 минут. При приготовлении жидкой среды растворы перед смешиванием охладить до комнатной температуры. Для приготовления плотной среды в основную среду перед стерилизацией внести 2% агара. Запасные растворы и среду перед смешиванием охладить до 50-55°C.

pH готовой среды 10.0.

256. МОДИФИЦИРОВАННАЯ СРЕДА 1 ДЛЯ МЕТИЛОТРОФОВ С ДРОЖЖЕВЫМ АВТОЛИЗАТОМ

KH₂PO₄ 2.0 г

(NH₄)₂SO₄ 2.0 г

MgSO₄ × 7 H₂O 0.025 г

NaCl 0.5 г

FeSO₄ × 7 H₂O 0.02 г

Метанол 5.0 мл или

Метиламин 3.0 г

Дрожжевой автолизат 1.0 г

Дистиллированная вода 1000.0 мл

pH 7.0

Автоклавировать при 121°C 15 мин. В стерильную остывшую среду внести стерилизованные фильтрованием метанол или метиламин.

257. -

258. СРЕДА ДЛЯ NOCARDIOIDES AQUATICUS

Основная среда (см. ниже) 600.0 мл

Искусственная морская вода (см. ниже) 400.0 мл

pH 7.5

Основная среда:

Пептон 0.25 г

Дрожжевой экстракт 0.25 г

Раствор глюкозы (2.5%) 10.0 мл

Раствор витаминов по Staley, двойная концентрация (см. ниже ): 5.0 мл

Минеральная среда по Hutner (см. ниже) 20.0 мл

Агар 15.0 г

Дистиллированная вода 965.0 мл

Искусственная морская вода:

NaCl 23.477 г

Na₂SO₄ 3.917 г

MgCl₂ × 6 H₂O 4.981 г

CaCl₂ 1.102 г

NaHCO₃ 192.0 мг

KCl 664.0 мг

KBr 6.0 мг

H₃BO₃ 26.0 мг

SrCl₂ 24.0 г

NaF 3.0 мг

Дистиллированная вода 1000.0 мл

Минеральная среда по Hutner:

Нитрилотриуксусная кислота 10.0 г

MgSO₄ × 7 H₂O 29.7 г

CaCl₂ × 2 H₂O 3.34 г

Na₂MoO₄ × 2 H₂O 12.67 мг

FeSO₄ × 7 H₂O 99.0 мг

Раствор солей металлов “44” (см. ниже) 50.0 мл

Дистиллированная вода до 1000.0 мл.

Растворить нитрилотриуксусную кислоту, нейтрализуя раствор внесением KOH, затем внести остальные соли. Довести pH до 7.2, используя KOH или H₂SO₄.

Раствор солей металлов “44”:

Этилендиаминтетраацетат Na 250.0 мг

ZnSO₄ × 7 H₂O 1095.0 мг

FeSO₄ × 7 H₂O 500.0 мг

MnSO₄ × 7 H₂O 154.0 мг

CuSO₄ × 5 H₂O 39.0 мг

Co(NO₃)₂ × 6 H₂O 24.8 мг

Na₂B₄O₇ × 10 H₂O 17.7 мг