305. СРЕДА ДЛЯ GEOGLOBUS

NaCl 18.0 г

MgCl₂ × 6 H₂O 4.0 г

KCl 0.33 г

CaCl₂ × 2 H₂O 0.33 г

(NH₄)₂SO₄ 0.5 г

Раствор микроэлементов SL-10 (см. ниже) 1.0 мл

Селенит-вольфрамовый раствор (см. ниже) 1.0 мл

NaHCO₃ 2.5 г

Na-Ацетат 1.5 г

KH₂PO₄ 0.33 г

Дрожжевой экстракт 0.2 г

Раствор витаминов (см. ниже) 1.0 мл

Аморфный осадок Fe(OH)₃ (см. ниже) 200.0 мл

Дистиллированная вода 800.0 мл

Раствор микроэлементов SL-10:

HCl (25%; 7.7 M) 10.0 мл

FeCl₂ × 4 H₂O 1.5 г

ZnCl₂ 70.0 мг

MnCl₂ × 4 H₂O 100.0 мг

H₃BO₃ 6.0 мг

CoCl₂ × 6 H₂O 190.0 мг

CuCl₂ × 2 H₂O 2.0 мг

NiCl₂ × 6 H₂O 24.0 мг

Na₂MoO₄ × 2 H₂O 36.0 мг

Дистиллированная вода 990.0 мл

Селенит-вольфрамовый раствор:

NaOH 0.5 г

Na₂SeO₃ × 5 H₂O 3 мг

Na₂WO₄ × 2 H₂O 4 мг

Дистиллированная вода 1000.0 мл

Раствор витаминов:

Биотин 2.0 мг

Фолиевая кислота 2.0 мг

Пиридоксин-HCl 10.0 мг

Тиамин-HCl × 2 H₂O 5.0 мг

Рибофлавин 5.0 мг

Никотиновая кислота 5.0 мг

D-Ca-пантотенат 5.0 мг

Витамин B₁₂ 0.1 мг

п-Аминобензойная кислота 5.0 мг

Липоевая кислота 5.0 мг

Дистиллированная вода 1000.0 мл

Аморфный осадок Fe(OH)₃:

FeCl₃ × 6 H₂O 19.2 г

Дистиллированная вода 320.0 мл

Медленно титровать раствор FeCl₃ × 6 H₂O 10% (вес/объем) NaOH до рН 8,0-8,5 при перемешивании (использовать магнитную мешалку). Общее количество добавленного NaOH ок. 80-100 мл. Осажденный Fe(OH)₃ оставить при комнатной температуре на ночь под слоем воды. Центрифугировать при 2000 об / мин 5 минут, супернатант слить.

Растворить ингредиенты, кроме бикарбоната, ацетата, гидрофосфата, дрожжевого экстракта, витаминов и осадка гидроксида трехвалентного железа. Суспендировать гидроксид трехвалентного железа в среде и продуть среду смесью 80% N₂ и 20% CO₂ в течение 30-45 минут для удаления кислорода. Разлить суспензию в атмосфере 80% N₂ и 20% CO₂ в пробирки Хангейта или флаконы под резиновой пробкой и автоклавировать в течение 30 мин при 111°C. Добавить ацетат, гидрофосфат, дрожжевой экстракт и витамины (стерилизованные фильтрованием) из стерильных бескислородных запасных растворов, приготовленных в 100% N₂, и бикарбонат из стерильного бескислородного запасного раствора, приготовленного в смеси 80% N₂ и 20% CO₂. Конечный pH среды 6,5-6,8.

Последнее изменение: 05.07.2021