307. СРЕДА ДЛЯ FERVIDOBACTERIUM
NH4Cl 0.9 г
NaCl 0.9 г
MgCl2 × 6 H2O 0.4 г
KH2PO4 0.75 г
K2HPO4 1.5 г
Раствор микроэлементов (см. ниже) 9.0 мл
FeSO4 × 7 H2O раствор (0.1% в/о в 0.1 N H2SO4) 3.0 мл
Дрожжевой экстракт 3.0 г
Пептон "Триптиказа" 10.0 г
Na-резазурина раствор (0.1% w/v) 0.5 мл
Раствор витаминов (см. ниже) 5.0 мл
Глюкоза 5.0 г
Na2S × 9 H2O 1.0 г
Дистиллированная вода 1000.0 мл
Раствор микроэлементов:
Нитрилотриуксусная кислота 12.8 г
FeCl2 × 4 H2O 0.2 г
MnCl2 × 4 H2O 0.1 г
CoCl2 × 6 H2O 0.17 г
CaCl2 × 2 H2O 0.1 г
ZnCl2 0.1 г
CuCl2 0.02 г
H3BO3 0.01 г
Na2MoO4 × 2 H2O 0.01 г
NiCl2 × 6 H2O 0.03 г
NaCl 1.0 г
Na2SeO3 × 5 H2O 0.03 г
Дистиллированная вода 1000.0 мл
Растворить нитрилотриуксусную кислоту, нейтрализуя раствор KOH, внести остальные соли. Довести объем до 1000.0 мл. Довести pH до 6.5, используя KOH.
Раствор витаминов:
Биотин 2.0 мг
Фолиевая кислота 2.0 мг
Пиридоксин-HCl 10.0 мг
Тиамин-HCl × 2 H2O 5.0 мг
Рибофлавин 5.0 мг
Никотиновая кислота 5.0 мг
D-Ca-пантотенат 5.0 мг
Витамин B12 0.1 мг
п-Аминобензойная кислота 5.0 мг
Липоевая кислота 5.0 мг
Дистиллированная вода 1000.0 мл
Растворить ингредиенты, кроме глюкозы, витаминов и сульфида и продуть среду 100% N2 в течение 30-45 минут для удаления кислорода. Разлить в атмосфере этого же газа в пробирки Хангейта или флаконы под резиновой пробкой. Запасные растворы глюкозы, витаминов и сульфида готовить в атмосфере 100% N2. Раствор витаминов стерилизовать фильтрованием, все остальные растворы автоклавированием при 121°C 15 мин. Довести pH готовой среды до 7.2-7.4.
Последнее изменение: 05.07.2021