314. СРЕДА ДЛЯ NATRANAEROBACULUM

KH₂PO4 0.2 г

MgCl₂ × 6 H₂O 0.1 г

NH₄Cl 1.0 г

KCl 0.2 г

NaCl 16.0 г

Раствор микроэлементов SL-11 (см. ниже) 1.0 мл

Дрожжевой экстракт 0.2 г

Na-резазурина раствор (0.1% в/о) 0.5 мл

Na₂CO₃ 68.0 г

NaHCO₃ 38.0 г

Этанол 5.0 мл

Раствор витаминов (см. ниже) 10.0 мл

Na₂S × 9 H₂O 1.0 г

Дистиллированная вода 1000.0 мл

Раствор микроэлементов SL-11:

Этилендиаминтетраацетат Na 5.20 г

FeCl₂ × 4 H₂O 1.50 г

ZnCl₂ 70.0 мг

MnCl₂ × 4 H₂O 100.0 мг

H₃BO₃ 6.0 мг

CoCl₂ × 6 H₂O 190.0 мг

CuCl_{2 ×} 2 H₂O 2.0 мг

NiCl₂ × 6 H₂O 24.0 мг

Na₂MoO₄ × 2 H₂O 36.0 мг

Дистиллированная вода 1000.0 мл

Растворить ЭДТА в 800.0 мл дистиллированной воды, довести pH до 7 2 N NaOH, внести хлорид железа, после его растворения добавить остальные компоненты, довести pH до 6.0 и объем до 1000.0 мл.

Раствор витаминов:

Биотин 2.0 мг

Фолиевая кислота 2.0 мг

Пиридоксин-HCl 10.0 мг

Тиамин-HCl × 2 H₂O 5.0 мг

Рибофлавин 5.0 мг

Никотиновая кислота 5.0 мг

D-Ca-пантотенат 5.0 мг

Витамин B₁₂ 0.1 мг

п-Аминобензойная кислота 5.0 мг

Липоевая кислота 5.0 мг

Дистиллированная вода 1000.0 мл

Растворить ингредиенты, кроме карбоната, бикарбоната, этанола, витаминов и сульфида, продуть среду 100% N₂ в течение 30-45 минут для удаления кислорода. Внести и растворить карбонаты и сульфид, продувая только объем над средой. Разлить в атмосфере 100% N₂ в пробирки Хангейта или флаконы под резиновой пробкой. Автоклавировать при 121°C 15 мин, перед использованием внести этанол и витамины из стерильных бескислородных запасных растворов, приготовленных в атмосфере 100% N₂. Раствор витаминов стерилизовать фильтрованием. При необходимости довести pH готовой среды до 9.5–10.0.

Последнее изменение: 06.07.2021