321. СРЕДА ДЛЯ BROCKIA LITHOTROPHICA

NH₄Cl 0.33 г

KH₂PO₄ 0.33 г

KCl 0.33 г

CaCl₂ × 2 H₂O 0.44 г

MgCl₂ × 6 H₂O 0.7 г

NaCl 0.5 г

Раствор микроэлементов SL-10 (см. ниже) 1.0 мл

Na-резазурина раствор (0.1% в/о) 0.5 мл

Сера, тонкодисперсная 10.0 г

NaHCO₃ 0.8 г

Раствор витаминов (см. ниже) 10.0 мл

Na₂S × 9 H₂O 0.5 г

Дистиллированная вода 1000.0 мл

Раствор микроэлементов SL-10:

HCl (25%; 7.7 M) 10.0 мл

FeCl₂ × 4 H₂O 1.5 г

ZnCl₂ 70.0 мг

MnCl₂ × 4 H₂O 100.0 мг

H₃BO₃ 6.0 мг

CoCl₂ × 6 H₂O 190.0 мг

CuCl₂ × 2 H₂O 2.0 мг

NiCl₂ × 6 H₂O 24.0 мг

Na₂MoO₄ × 2 H₂O 36.0 мг

Дистиллированная вода 990.0 мл

Селенит-вольфрамовый раствор:

NaOH 0.5 г

Na₂SeO₃ × 5 H₂O 3 мг

Na₂WO₄ × 2 H₂O 4 мг

Дистиллированная вода 1000.0 мл

Раствор витаминов:

Биотин 2.0 мг

Фолиевая кислота 2.0 мг

Пиридоксин-HCl 10.0 мг

Тиамин-HCl × 2 H₂O 5.0 мг

Рибофлавин 5.0 мг

Никотиновая кислота 5.0 мг

D-Ca-пантотенат 5.0 мг

Витамин B₁₂ 0.1 мг

п-Аминобензойная кислота 5.0 мг

Липоевая кислота 5.0 мг

Дистиллированная вода 1000.0 мл

Растворить ингредиенты (кроме серы, бикарбоната, витаминов и сульфида), затем продуть среду газовой смесью 80% H₂ и 20% CO₂ в течение 30–45 минут, чтобы сделать ее бескислородной. Довести pH до 6,2–6,4 и разлить среду в газовой атмосфере с 80% H₂ и 20% CO₂ в пробирки Хангейта или флаконы под резиновой пробкой, уже содержащие необходимое количество серы. Стерилизовать среду, нагревая культуральные сосуды на кипящей водяной бане в течение 2-3 часов ежедневно в течение 3 дней. После стерилизации добавить бикарбонат из стерильного исходного раствора, приготовленного в газовой смеси 80% N₂ и 20% CO₂. Витамины (стерилизованные фильтрацией) и сульфид добавить среду из стерильных бескислородных исходных растворов, приготовленных в атмосфере 100% N₂. При необходимости довести pH среды до 6,5.

Последнее изменение: 08.07.2021