325. СРЕДА ДЛЯ COPROBACTER

Говяжий фарш (обезжиренный) 500.0 г

Дистиллированная вода 1000.0 мл

NaOH 1 N 25.0 мл

Перед измельчением удалить жир и соединительную ткань. Смешать мясо, воду и NaOH, затем кипятить при перемешивании 15 мин. Охладить до комнатной температуры, снять жир с поверхности и отфильтровать. К фильтрату добавить воду до конечного объема 1000,0 мл, а затем добавить:

Казитон 30.0 г

Дрожжевой экстракт 5.0 г

K₂HPO₄ 5.0 г

Резазурин 1.0 мг

Для удаления кислорода вскипятить среду, охладить в атмосфере 100% N₂, добавить 0,5 г/л гидрохлорида L-цистеина и довести pH до 7,0. Автоклавировать при 121 °C в течение 15 мин. После автоклавирования добавить к 1000.0 мл среды: раствор гемина (см. ниже) 10.0 мл, витамина K₁ или раствор витамина K₃ (см. ниже) 0.2 мл. Разлить в атмосфере 100% N₂ по 7,0 мл среды в пробирки Хангейта.

Раствор гемина: растворить 50 мг гемина в 1.0 мл 1 н. NaOH; довести дистиллированной водой до 100.0 мл и стерилизовать фильтрованием. Хранить в холодильнике.

Раствор витамина K₁: растворить 0.1 мл витамина K₁/K₃ в 20.0 мл 95% этанола и стерилизовать фильтрованием. Хранить в холодильнике в коричневой посуде.

Раствор витамина K₃: растворить 5 мг/мл витамина K3 в 10.0 мл 95% этанола и стерилизовать фильтрованием. Хранить в холодильнике в коричневой посуде.

Последнее изменение: 08.07.2021