327. СРЕДА ДЛЯ THERMOANAEROBACTER SIDEROPHILUS

Триптон 1.0 г

Пептон 1.0 g

Дрожжевой экстракт 1.0 г

K₂HPO₄ 1.6 г

NaH₂PO₄ × 2 H₂O 1.0 г

NH₄Cl 0.5 г

MgSO₄ × 6 H₂O 0.16 г

Раствор микроэлементов SL-11 (см. ниже) 1.0 мл

Na-резазурина раствор (0.1% в/о) 0.5 мл

CaCl₂ × 2 H₂O 0.06 г

NaHCO₃ 1.0 г

Раствор витаминов (см. ниже) 10.0 мл

L-Цистеин-HCl × H₂O 0.3 г

Na₂S × 9 H₂O 0.3 г

Дистиллированная вода 1000.0 мл

Раствор микроэлементов SL-11:

Na₂-ЭДТА × 2 H₂O 5.2 г

FeCl₂ × 4 H₂O 1.5 г

ZnCl₂ 70.0 мг

MnCl₂ × 4 H₂O 100.0 мг

H₃BO₃ 6.0 мг

CoCl₂ × 6 H₂O 190.0 мг

CuCl₂ × 2 H₂O 2.0 мг

NiCl₂ × 6 H₂O 24.0 мг

Na₂MoO₄ × 2 H₂O 36.0 мг

Дистиллированная вода 1000.0 мл

Растворить ЭДТА в 800.0 мл дистиллированной воды, довести pH до 7.0 2 N NaOH, внести хлорид железа, после его растворения добавить остальные компоненты, довести pH до 6.0 и объем до 1000.0 мл.

Раствор витаминов:

Биотин 2.0 мг

Фолиевая кислота 2.0 мг

Пиридоксин-HCl 10.0 мг

Тиамин-HCl × 2 H₂O 5.0 мг

Рибофлавин 5.0 мг

Никотиновая кислота 5.0 мг

D-Ca-пантотенат 5.0 мг

Витамин B₁₂ 0.1 мг

п-Аминобензойная кислота 5.0 мг

Липоевая кислота 5.0 мг

Дистиллированная вода 1000.0 мл

Растворить ингредиенты (кроме хлорида кальция, бикарбоната, глюкозы, витаминов, цистеина и сульфида), довести pH до 7.0 и продуть среду 100% N₂ в течение 30–45 минут, чтобы сделать ее бескислородной. Ралить среду в атмосфере того же газа в пробирки Хангейта или флаконы под резиновой пробкой и автоклавировать. После стерилизации добавить хлорид кальция, цистеин и сульфид из стерильных бескислородных исходных растворов, автоклавированных в атмосфере 100% N₂. Добавить бикарбонат из стерильного бескислородного исходного раствора, приготовленного в газовой смеси 80% N₂ и 20% CO₂. Витамины готовить в атмосфере 100% N₂ и стерилизовать фильтрацией. pH среды должен быть 7.0.

Последнее изменение: 08.07.2021