330. СРЕДА ДЛЯ CLOSTRIDIUM CELLULOLYTICUM

(NH₄)₂SO₄ 1.3 г

KH₂PO₄ 1.5 г

K₂HPO₄ × 3 H₂O 2.9 г

FeSO₄ × 7 H₂O (0.1% в/о в 0.1 N H₂SO₄) 1.25 мл

Раствор микроэлементов SL-10 (см. ниже) 1.0 мл

Дрожжевой экстракт 2.0 г

Na-резазурина раствор (0.1% в/о) 0.5 мл

MgCl₂ × 6 H₂O 0.2 г

CaCl₂ × 2 H₂O 75.0 мг

Целлобиоза 6.0 г

L-Цистеин-HCl × H₂O 0.5 г

Na₂CO₃ 2.5 г

Дистиллированная вода 1000.0 мл

Раствор микроэлементов SL-10:

HCl (25%; 7.7 M) 10.0 мл

FeCl₂ × 4 H₂O 1.5 г

ZnCl₂ 70.0 мг

MnCl₂ × 4 H₂O 100.0 мг

H₃BO₃ 6.0 мг

CoCl₂ × 6 H₂O 190.0 мг

CuCl₂ × 2 H₂O 2.0 мг

NiCl₂ × 6 H₂O 24.0 мг

Na₂MoO₄ × 2 H₂O 36.0 мг

Дистиллированная вода 990.0 мл

Растворить ингредиенты, за исключением хлорида магния, хлорида кальция, целлобиозы, цистеина и карбоната, затем продуть среду газовой смесью 80% N₂ и 20% CO₂ в течение 30–45 минут, чтобы сделать ее бескислородной. Разлить среду в той же газовой атмосфере в пробирки Хангейта или флаконы под резиновой пробкой и автоклавировать. После автоклавирования добавить хлорид магния, хлорид кальция и целлобиозу из бескислородных исходных растворов, приготовленных в атмосфере 100% N₂. Целлобиозу необходимо стерилизовать фильтрацией. Перед инокуляцией добавить цистеин из стерильного бескислородного исходного раствора, приготовленного под 100% N₂, и довести pH до 7.2, добавив стерильный бескислородный исходный раствор Na₂CO₃ (5% в/о), приготовленный в атмосфере 80% N₂ и 20% CO₂.

Последнее изменение: 08.07.2021