331. СРЕДА ДЛЯ THERMOCOCCUS STETTERI

NH₄Cl 0.33 г

CaCl₂ × 2 H₂O 0.33 г

MgCl₂ × 6 H₂O 0.33 г

KCl 0.33 г

KH₂PO₄ 0.33 г

Казитон 5.0 г

Раствор микроэлементов SL-10 (см. ниже) 1.0 мл

Na-резазурина раствор (0.1% в/о) 0.5 мл

Сера, порошок 10.0 г

NaCl 2.5 г

Раствор витаминов (см. ниже) 10.0 мл

Na₂S × 9 H₂O 0.5 г

Дистиллированная вода 1000.0 мл

Раствор микроэлементов SL-10:

HCl (25%; 7.7 M) 10.0 мл

FeCl₂ × 4 H₂O 1.5 г

ZnCl₂ 70.0 мг

MnCl₂ × 4 H₂O 100.0 мг

H₃BO₃ 6.0 мг

CoCl₂ × 6 H₂O 190.0 мг

CuCl₂ × 2 H₂O 2.0 мг

NiCl₂ × 6 H₂O 24.0 мг

Na₂MoO₄ × 2 H₂O 36.0 мг

Дистиллированная вода 990.0 мл

Раствор витаминов:

Биотин 2.0 мг

Фолиевая кислота 2.0 мг

Пиридоксин-HCl 10.0 мг

Тиамин-HCl × 2 H₂O 5.0 мг

Рибофлавин 5.0 мг

Никотиновая кислота 5.0 мг

D-Ca-пантотенат 5.0 мг

Витамин B₁₂ 0.1 мг

п-Аминобензойная кислота 5.0 мг

Липоевая кислота 5.0 мг

Дистиллированная вода 1000.0 мл

Растворить ингредиенты (кроме серы, витаминов и сульфидов) и продуть среду газовой смесью 80% N₂ и 20% CO₂ в течение 30–45 минут, чтобы сделать ее бескислородной. Довести pH до 5.7, разлить среду в той же атмосфере в пробирки Хангейта или флаконы под резиновой пробкой, уже содержащие необходимое количество серы, и стерилизовать путем нагревания в течение 2-3 часов на кипящей водяной бане. Добавить витамины (стерилизованные фильтрацией) и сульфид из стерильных базовых бескислородных растворов, приготовленных в атмосфере 100% N₂, и бикарбонат из стерильного базового раствора в бескислородной среде, приготовленного в смеси газов 80% N₂ и 20% CO₂. Перед использованием довести pH среды до 6,5 стерильным анаэробным раствором NaHCO₃.

Последнее изменение: 09.07.2021