334. СРЕДА ДЛЯ METHANOSPIRILLUM

KH₂PO₄ 0.23 г

K₂HPO₄ 0.23 г

MgSO₄ × 7 H₂O 0.09 г

NaCl 0.46 г

NH₄Cl 0.40 г

CaCl₂ × 2 H₂O 0.06 г

(NH₄)₂SO₄ 0.23 г

Раствор микроэлементов SL-10 (см. ниже) 10.0 мл

Раствор витаминов (см. ниже) 10.0 мл

Дрожжевой экстракт 1.0 г

Na-Ацетат × 3 H₂O 1.0 г

Na-Формиат 2.0 г

Триптиказа 0.5 г

Казаминовые кислоты 0.2 г

Na-резазурина раствор (0.1% в/о) 0.5 мл

NaHCO₃ 4.0 г

L-Цистеин-HCl × H₂O 0.5 г

Na₂S × 9 H₂O 0.5 г

Дистиллированная вода 980.0 мл

Раствор микроэлементов SL-10:

HCl (25%; 7.7 M) 10.0 мл

FeCl₂ × 4 H₂O 1.5 г

ZnCl₂ 70.0 мг

MnCl₂ × 4 H₂O 100.0 мг

H₃BO₃ 6.0 мг

CoCl₂ × 6 H₂O 190.0 мг

CuCl₂ × 2 H₂O 2.0 мг

NiCl₂ × 6 H₂O 24.0 мг

Na₂MoO₄ × 2 H₂O 36.0 мг

Дистиллированная вода 990.0 мл

Раствор витаминов:

Биотин 2.0 мг

Фолиевая кислота 2.0 мг

Пиридоксин-HCl 10.0 мг

Тиамин-HCl × 2 H₂O 5.0 мг

Рибофлавин 5.0 мг

Никотиновая кислота 5.0 мг

D-Ca-пантотенат 5.0 мг

Витамин B₁₂ 0.1 мг

п-Аминобензойная кислота 5.0 мг

Липоевая кислота 5.0 мг

Дистиллированная вода 1000.0 мл

Растворить ингредиенты, кроме бикарбоната, цистеина и сульфида. Продуть среду газовой смесью 80% H₂ и 20% CO₂ в течение 30–45 минут, чтобы сделать ее бескислородной. Добавить и растворить бикарбонат, затем разлить среду в атмосфере 80% H₂ и 20% CO₂ в пробирки Хангейта и автоклавировать. Добавить цистеин и сульфид из стерильных исходных бескислородных растворов, приготовленных в атмосфере 100% N₂. Перед использованием проверить pH среды и при необходимости довести до 6,8–7,0.

Последнее изменение: 09.07.2021