339. СРЕДА ДЛЯ ACETOBACTERIUM

NH₄Cl 1.0 г

KH₂PO₄ 0.33 г

K₂HPO₄ 0.45 г

MgSO₄ × 7 H₂O 0.1 г

Раствор микроэлементов (см. ниже) 20.0 мл

Дрожжевой экстракт 2.0 г

Na-резазурина раствор (0.1% в/о) 0.5 мл

NaHCO₃ 10.0 г

D-Фруктоза 10.0 г

Раствор витаминов (см. ниже) 10.0 мл

L-Цистеин-HCl × H₂O 0.5 г

Na₂S × 9 H₂O 0.5 г

Дистиллированная вода 1000.0 мл

Раствор микроэлементов:

Нитрилотриуксусная кислота 1.5 г

MgSO₄ × 7 H₂O 3.0 г

MnSO₄ × H₂O 0.5 г

NaCl 1.0 г

FeSO₄ × 7 H₂O 0.1 г

CoSO₄ × 7 H₂O 0.18 г

CaCl₂ × 2 H₂O 0.1 г

ZnSO₄ × 7 H₂O 0.18 г

CuSO₄ × 5 H₂O 0.01 г

KAl(SO₄)₂ × 12 H₂O 0.02 г

H₃BO₃ 0.01 г

Na₂MoO₄ × 2 H₂O 0.01 г

NiCl₂ × 6 H₂O 0.03 г

Na₂SeO₃ × 5 H₂O 0.3 мг

Na₂WO₄ × 2 H₂O 0.4 мг

Дистиллированная вода 1000.0 мл

Растворить нитрилотриуксусную кислоту, нейтрализуя раствор KOH, внести остальные соли. Довести объем до 1000.0 мл. Довести pH до 7.0, используя KOH.

Раствор витаминов:

Биотин 2.0 мг

Фолиевая кислота 2.0 мг

Пиридоксин-HCl 10.0 мг

Тиамин-HCl × 2 H₂O 5.0 мг

Рибофлавин 5.0 мг

Никотиновая кислота 5.0 мг

D-Ca-пантотенат 5.0 мг

Витамин B₁₂ 0.1 мг

п-Аминобензойная кислота 5.0 мг

Липоевая кислота 5.0 мг

Дистиллированная вода 1000.0 мл

Растворить ингредиенты, кроме бикарбоната, фруктозы, витаминов, цистеина и сульфида, довести до кипения и охладить до комнатной температуры под газовой смесью 80% N₂ и 20% CO₂. Добавить бикарбонат (твердый) и уравновесить среду газом до достижения pH около 7.4. Затем разлить в той же газовой атмосфере в пробирки Хангейта или во флаконы и автоклавировать. Перед использованием довести pH до 8.0-8.2, добавив стерильный бескислородный запасной раствор карбоната натрия (5% в/о), приготовленный под газовой смесью 80% N₂ и 20% CO₂ (0.25 мл на 10 мл среды), и добавить фруктозу, витамины (стерилизованые фильтрацией), цистеин и сульфид из бескислородных стерильных запасных растворов, приготовленных под 100% N₂.

Последнее изменение: 09.07.2021