358. СРЕДА ДЛЯ THERMOANAEROBACTERIUM

KH₂PO₄ 0.3 г

Na₂HPO₄ × 12 H₂O 5.3 г

NH₄Cl 1.0 г

MgCl₂ × 6 H₂O 0.2 г

Раствор микроэлементов (см. ниже) 10.0 мл

FeSO₄ × 7 H₂O (0.1% в/о в 0.1 N H₂SO₄) 1.5 мл

Дрожжевой экстракт 1.0 г

Na-резазурина раствор (0.1% в/о) 0.5 мл

D-Глюкоза 5.0 г

Раствор витаминов (см. ниже) 5.0 мл

Na₂S × 9 H₂O 0.5 г

Дистиллированная вода 1000.0 мл

Раствор микроэлементов:

Нитрилотриуксусная кислота (NTA) 12.8 г

FeCl₂ × 4 H₂O 0.2 г

MnCl₂ × 4 H₂O 0.1 г

CoCl₂ × 6 H₂O 0.17 г

CaCl₂ × 2 H₂O 0.1 г

ZnCl₂ 0.1 г

CuCl₂ 0.02 г

H₃BO₃ 0.01 г

Na₂MoO₄ × 2 H₂O 0.01 г

NiCl₂ × 6 H₂O 0.03 г

NaCl 1.0 г

Na₂SeO₃ × 5 H₂O 0.03 г

Растворить нитрилотриуксусную кислоту, нейтрализуя раствор KOH, внести остальные соли. Довести объем до 1000.0 мл. Довести pH до 7.0, используя KOH.

Раствор витаминов:

Биотин 2.0 мг

Фолиевая кислота 2.0 мг

Пиридоксин-HCl 10.0 мг

Тиамин-HCl × 2 H₂O 5.0 мг

Рибофлавин 5.0 мг

Никотиновая кислота 5.0 мг

D-Ca-пантотенат 5.0 мг

Витамин B₁₂ 0.1 мг

п-Аминобензойная кислота 5.0 мг

Липоевая кислота 5.0 мг

Дистиллированная вода 1000.0 мл

Растворить ингредиенты (кроме глюкозы, витаминов и сульфида), довести pH до 6.0, продуть среду 100% N₂ в течение 30–45 минут, чтобы сделать ее бескислородной. Разлить в той же газовой атмосфере в пробирки Хангейта или флаконы и автоклавировать. После стерилизации добавить глюкозу и сульфид из бескислородных исходных растворов, автоклавированных под 100% N₂, и витамины из стерилизованного фильтрованием бескислородного исходного раствора, приготовленного под 100% N₂. При необходимости довести pH среды до 6.0–6.5.

Последнее изменение: 11.07.2021