364. СРЕДА ДЛЯ CALDANAEROBACTER

KCl 0.33 г

MgCl₂ × 6 H₂O 0.52 г

CaCl₂ × 2 H₂O 0.29 г

NH₄Cl 0.33 г

KH₂PO₄ 0.33 г

Раствор микроэлементов SL-4 (см. ниже) 10.0 мл

Na-резазурина раствор (0.1% в/о) 0.5 мл

NaHCO₃ 2.5 г

Глюкоза 2.0 г

Дрожжевой экстракт 0.05 г

Раствор витаминов 1 (см. ниже) 9.0 мл

Раствор семи витаминов (см. ниже) 1.0 мл

Na₂S × 9 H₂O 0.3 г

Дистиллированная вода 1000.0 мл

Раствор микроэлементов SL-4:

Na₂-ЭДТА 0.5 г

FeSO₄ × 7 H₂O 0.2 г

ZnSO₄ × 7 H₂O 0.1 г

MnCl₂ × 4 H₂O 0.03 г

H₃BO₃ 0.3 г

CoCl₂ × 6 H₂O 0.2 г

CuCl₂ × 2 H₂O 0.01 г

NiCl₂ × 6 H₂O 0.02 г

Na₂MoO₄ × 2 H₂O 0.03 г

Дистиллированная вода 1000.0 мл

Растворить ЭДТА в дистиллированной воде и pH до 7.0 используя 2 N NaOH;затем добавить остальные компоненты.

Раствор витаминов 1:

Биотин 2.0 мг

Фолиевая кислота 2.0 мг

Пиридоксин-HCl 10.0 мг

Тиамин-HCl × 2 H₂O 5.0 мг

Рибофлавин 5.0 мг

Никотиновая кислота 5.0 мг

D-Ca-пантотенат 5.0 мг

Витамин B₁₂ 0.1 мг

п-Аминобензойная кислота 5.0 мг

Липоевая кислота 5.0 мг

Дистиллированная вода 1000.0 мл

Раствор семи витаминов:

Витамин B₁₂ 100.0 мг

п-Аминобензойная кислота 80.0 мг

D(+)-Биотин 20.0 мг

Никотиновая кислота 200.0 мг

D-Ca-пантотенат 100.0 мг

Пиридоксин-HCl 300.0 мг

Тиамин-HCl × 2 H₂O 200.0 мг

Дистиллированная вода 1000.0 мл

Растворить ингредиенты, кроме бикарбоната, глюкозы, дрожжевого экстракта, витаминов и сульфида, затем продуть среду газовой смесью 80% N₂ и 20% CO₂ в течение 30-45 минут, чтобы сделать ее бескислородной. Разлить среду в той же газовой атмосфере в пробирки Хангейта или флаконы и автоклавировать. Добавить глюкозу, дрожжевой экстракт, витамины и сульфид из стерильных базовых бескислородных растворов, приготовленных в атмосфере 100% N₂, и бикарбонат из стерильного базового раствора, приготовленного в смеси газов 80% N₂ и 20% CO₂. Базовые растворы глюкозы и витаминов стерилизовать фильтрованием. После завершения доведите pH среды до 6.8-7.0 с помощью стерильного бескислородного исходного раствора Na₂CO₃ (5% в/о), если необходимо.

Последнее изменение: 12.07.2021