365. СРЕДА II ДЛЯ THERMOANAEROBACTER

NH₄Cl 1.0 г

NaCl 0.1 г

MgCl₂ × 6 H₂O 0.1 г

CaCl₂ × 2 H₂O 0.05 г

K₂HPO₄ × 3 H₂O 0.4 г

Раствор микроэлементов (см. ниже) 10.0 мл

Дрожжевой экстракт 0.75 г

Na-резазурина раствор (0.1% в/о) 0.5 мл

NaHCO₃ 2.6 г

Целлобиоза 4.0 г

Раствор витаминов (см. ниже) 10.0 мл

Na₂S × 9 H₂O 0.25 г

Дистиллированная вода 1000.0 мл

Раствор микроэлементов:

Нитрилотриуксусная кислота 1.5 г

MgSO₄ × 7 H₂O 3.0 г

MnSO₄ × H₂O 0.5 г

NaCl 1.0 г

FeSO₄ × 7 H₂O 0.1 г

CoSO₄ × 7 H₂O 0.18 г

CaCl₂ × 2 H₂O 0.1 г

ZnSO₄ × 7 H₂O 0.18 г

CuSO₄ × 5 H₂O 0.01 г

KAl(SO4)₂ × 12 H₂O 0.02 г

H₃BO₃ 0.01 г

Na₂MoO₄ × 2 H₂O 0.01 г

NiCl₂ × 6 H₂O 0.03 г

Na₂SeO₃ × 5 H₂O 0.3 мг

Na₂WO₄ × 2 H₂O 0.4 мг

Дистиллированная вода 1000.0 мл

Растворить нитрилотриуксусную кислоту, нейтрализуя раствор KOH, внести остальные соли. Довести объем до 1000.0 мл. Довести pH до 7.0, используя KOH.

Раствор витаминов:

Биотин 2.0 мг

Фолиевая кислота 2.0 мг

Пиридоксин-HCl 10.0 мг

Тиамин-HCl × 2 H₂O 5.0 мг

Рибофлавин 5.0 мг

Никотиновая кислота 5.0 мг

D-Ca-пантотенат 5.0 мг

Витамин B₁₂ 0.1 мг

п-Аминобензойная кислота 5.0 мг

Липоевая кислота 5.0 мг

Дистиллированная вода 1000.0 мл

Растворить ингредиенты (кроме бикарбоната, целлобиозы, витаминов и сульфидов), затем продуть среду газовой смесью 80% N₂ и 20% CO₂ в течение 30–45 минут, чтобы она стала бескислородной. Разлить в той же газовой атмосфере в пробирки Хангейта или флаконы и автоклавировать. После стерилизации добавить целлобиозу, витамины и сульфид из стерильных исходных бескислородных растворов, приготовленных в атмосфере 100% N₂, и бикарбоната из стерильного базового раствора в бескислородной среде, приготовленного в смеси газов 80% N₂ и 20% CO₂. Исходные растворы целлобиозы и витаминов следует стерилизовать фильтрованием. При необходимости довести pH среды до 7.0.

Последнее изменение: 12.07.2021