368. СРЕДА ДЛЯ METHANOBACTERIUM VETERUM

Раствор 1:

Na-Ацетат 0.5 г

(NH₄)₂SO₄ 0.45 г

K₂HPO₄ 0.29 г

KH₂PO₄ 0.18 г

MgSO₄ × 7 H₂O 0.12g

CaCl₂ × 2 H₂O 0.06 г

NaCl 0.05

Резазурин 0.01 г

Na₂CO₃ 5.0 г

Раствор микроэлементов (см. ниже) 10.0 мл

Раствор витаминов (см. ниже) 10.0 мл

Дистиллированная вода 965.0 мл

Раствор 2 (восстановители):

Цистеин-HCl 0.5 г

Na₂S × 9 H₂O 0. 5 г

Дистиллированная вода 10.0 мл

Раствор микроэлементов:

Нитрилотриуксусная кислота 1.5 г

MgSO₄ × 7 H₂O 3.0 г

MnSO₄ × 7 H₂O 0.5 г

NaCl 1.0 г

FeSO₄ × 7 H₂O 0.1 г

CoSO₄ 0.18 г

CaCl₂ × 2 H₂O 0.1 г

ZnSO₄ 0.18 г

CuSO₄ 0.01 г

KAl(SO₄)₂ × 12 H₂O 0.02 г

H₃BO₃ 0.01 г

Na₂MoO₄ × 2 H₂O 0.01 г

NiCl₂ 0.025 г

Na₂SeO₃ × 5 H₂O 0.3 мг

Дистиллированная вода 1000.0 мл

Растворить нитрилотриуксусную кислоту, нейтрализуя раствор KOH, внести остальные соли. Довести объем до 1000.0 мл. Довести pH до 7.0, используя KOH.

Раствор витаминов:

Биотин 2.0 мг

Фолиевая кислота 2.0 мг

Пиридоксин 10.0 мг

Рибофлавин 5.0 мг

Пантотеновая кислота 5.0 мг

п-Аминобензойная кислота 5.0 мг

Тиамин-HCl 5.0 мг

Никотиновая кислота 5.0 мг

Витамин B₁₂ 0.1 мг

Липоевая (тиоктовая) кислота 5.0 мг

Дистиллированная вода 1000.0 мл

pH 7.2-7.4

Приготовить среду в анаэробных условиях, продувая 100% N₂ до стерилизации. Растворы восстановителей (10.0 мл) и другие растворы добавить к основной среде после отдельной стерилизации при 121 °C в течение 15 мин. Стерилизовать раствор витаминов фильтрованием. Выращивать в газовой смеси, состоящей из 80% H₂ и 20% CO₂.

Последнее изменение: 12.07.2021