399. СРЕДА ДЛЯ GEMMATA PALUSTRIS

Минеральная среда по Hutner: 20.0 мл

Пептон 5.0 г

Дрожжевой экстракт 0.25 г

Дистиллированная вода 965.0 мл (уменьшить для твердой среды)

Довести pH до 6.8-7.5 внесением 5 M KOH

После стерилизации и охлаждения (для твердой среды см. ниже) внести

Раствор витаминов (см. ниже) 5.0 мл

Минеральная среда по Hutner:

Нитрилотриуксусная кислота 10.0 г

MgSO₄ × 7 H₂O 29.7 г

CaCl₂ × 2 H₂O 3.34 г

Na₂MoO₄ × 2 H₂O 0.01267 г

FeSO₄ × 7 H₂O 0.099 г

Раствор солей металлов “44” (см. ниже) 50.0 мл

Дистиллированная вода до 1000.0 мл.

Растворить нитрилотриуксусную кислоту, нейтрализуя раствор внесением KOH, затем внести остальные соли. Довести pH до 7.2, используя KOH или H₂SO₄.

Раствор солей металлов “44”:

ZnSO₄ × 7 H₂O 1095.0 мг

FeSO₄ × 7 H₂O 500.0 мг

MnSO₄ × 7 H₂O 154.0 мг

CuSO₄ × 5 H₂O 39.0 мг

Co(NO₃)₂ × 6 H₂O 24.8 мг

Na₂B₄O₇ × 10 H₂O 17.7 мг

Дистиллированная вода 1000.0 мл

Растворить Na-ЭДТА, внести несколько капель концентрированной серной кислоты, чтобы замедлить осаждение ионов тяжелых металлов.

Раствор витаминов:

Биотин 4.0 мг

Фолиевая кислота 4.0 мг

Пиридоксин-HCl 20.0 мг

Рибофлавин 10.0 мг

Тиамин-HCl × 2 H₂O 10.0 мг

Никотинамид 10.0 мг

D-Ca-пантотенат 10.0 мг

Витамин B₁₂ 0.2 мг

p-Аминобензойная кислота 10.0 мг

Дистиллированная вода 1000.0 мл

Стерилизовать фильтрованием, хранить в темноте при +4°C.

Для приготовления твердой среды 8 г фитагеля тщательно размешать в 200 мл дистиллированной воды. Автоклавировать при 121°C 15 мин. Смешать все компоненты среды и разливать сразу же, поскольку полимеризация происходит очень быстро.

Последнее изменение: 08.08.2021