422. СРЕДА ДЛЯ THIOHALORHABDUS DENITRIFICANS (TRDM)

NaCl 180.0 г

K₂HPO₄ 1.50 г

NH₄Cl 0.50 г

Раствор микроэлементов (см. ниже) 1.0 мл

CaCl₂ × 2 H₂O 0.05 г

MgSO₄ × 7 H₂O 0.50 г

Na₂S₂O₃ × 5 H₂O 5.0 г

NaHCO₃ 5.0 г

Раствор семи витаминов (см. ниже) 1.0 мл

Раствор микроэлементов (Pfennig & Lippert, 1966)

ЭДТА 5.0 г

FeSO₄ × 7 H₂O 2.2 г

ZnSO₄ × 7 H₂O 0.1 г

MnCl₂ × 4 H₂O 0.03 г

H₃BO₃ 0.03 г

CoCl₂ × 6 H₂O 0.2 г

CuCl₂ × 2 H₂O 0.03 г

NiCl₂ × 6 H₂O 0.03 г

Na₂MoO₄ × 2 H₂O 0.03 г

Дистиллированная вода 1000.0 мл

pH 3.0-4.0

Раствор семи витаминов:

Витамин B₁₂ 100.0 мг

п-Аминобензойная кислота 80.0 мг

D(+)-Биотин 20.0 мг

Никотиновая кислота 200.0 мг

Ca-пантотенат 100.0 мг

Пиридоксин HCl 300.0 мг

Тиамин-HCl × 2 H₂O 200.0 мг

Дистиллированная вода 1000.0 мл

Растворить хлорид натрия, гидрофосфат калия и хлорид аммония, затем продуть раствор газовой смесью 80% N₂ и 20% CO₂ в течение не менее 30–45 минут для удаления растворенного кислорода и насыщения раствора CO₂. Разлить раствор в той же атмосфере в сосуды, подходящие для анаэробных культур (например, в пробирки типа Балча) до 30% объема. Закрыть сосуды пробками из бутилкаучука и автоклавировать. Добавить микроэлементы, хлорид кальция, сульфат магния, тиосульфат, бикарбонат и витамины из стерильных исходных растворов и довести pH полной среды до 7,5–7,8, используя стерильный запасной раствор карбоната натрия (5% в/о). После инокуляции добавить стерильный воздух (с помощью иглы для подкожных инъекций через резиновую пробку) до концентрации ок. 4% (о/о) O₂ (например, добавить 7 мл воздуха в пробирку типа Балча общим объемом 27 мл).

Последнее изменение: 21.12.2021