432. СРЕДА ДЛЯ PYROBACULUM FERRIREDUCENS (PFM)

NH4Cl 0.33 г

KCl 0.33 г

KH2PO4 0.33 г

MgCl2 × 6 H2O 0.33 г

CaCl2 × 2 H2O 0.33 г

Раствор микроэлементов SL-10 (см. ниже) 1.0 мл

Селенит-вольфраматный раствор (см. ниже) 1.0 мл

Дрожжевой экстракт 1.0 г

KNO3 1.0 г

NaHCO3 2.0 г

Раствор витаминов по Wolin (см. ниже) 10.0 мл

Дистиллированная вода 1000.0 мл

Раствор микроэлементов SL-10

HCl (25%; 7.7 M) 10.0 мл

FeCl2 × 4 H2O 1.5 г

ZnCl2 70.0 мг

MnCl2 × 4 H2O 100.0 мг

H3BO3 6.0 мг

CoCl2 × 6 H2O 190.0 мг

CuCl2 × 2 H2O 2.0 мг

NiCl2 × 6 H2O 24.0 мг

Na2MoO4 × 2 H2O 36.0 мг

Дистиллированная вода 990.0 мл

Селенит-вольфраматный раствор:

NaOH 0.5 г

Na2SeO3 × 5 H2O 3.0 мг

Na2WO4 × 2 H2O 4.0 мг

Дистиллированная вода 1000.0 мл

Раствор витаминов по Wolin:

Биотин 2.0 мг

Фолиевая кислота 2.0 мг

Пиридоксин-HCl 10.0 мг

Тиамин-HCl 5.0 мг

Рибофлавин 5.0 мг

Никотиновая кислота 5.0 мг

Ca-D-пантотенат 5.0 мг

Витамин B12 0.10 мг

п-Аминобензойная кислота 5.0 мг

α-Липоевая кислота 5.0 мг

Дистиллированная вода 1000.0 мл

 

Растворить ингредиенты (кроме дрожжевого экстракта, нитрата, бикарбоната и витаминов) и продуть среду 100% газообразным CO2 в течение не менее 30–45 минут, чтобы сделать ее бескислородной, затем разлить в той же газовой атмосфере в бескислородные пробирки типа Hungate или флаконы и автоклавировать. После автоклавирования добавить дрожжевой экстракт, нитрат и витамины из стерильных бескислородных исходных растворов, приготовленных в атмосфере 100% азота, и бикарбонат из стерильного бескислородного исходного раствора, приготовленного в атмосфере газов 80% N2 и 20% CO2. Витамины должны быть стерилизованы фильтрованием. При необходимости pH полной среды следует довести до 6,5–6,8.

 

Последнее изменение: 01.04.2022