434. СРЕДА ДЛЯ TENIUFILUM THALASSICUM (TTM)

KH₂PO4 0.33 г

NH₄Cl 0.33 г

KCl 0.33 г

NaCl 10.0 г

MgCl₂ × 6 H₂O 0.33 г

CaCl₂ × 6 H₂O 0.033 г

NaHCO₃ 2.0 г

Дрожжевой экстракт 0.05 г

Триптон 2.0 г

Фруктоза 2.0 г

Резазурин 1.0 мг

Раствор микроэлементов (см. ниже)10.0 мл

Раствор витаминов (см. ниже)10.0 мл

Na₂S × 9 H₂O 0.50 г

Дистиллированная вода 1000.0 мл

Раствор микроэлементов:

Нитрилотриуксусная кислота 1.50 г

MgSO₄ × 7 H₂O 3.0 г

MnSO₄ × H₂O 0.50 г

NaCl 1.0 г

FeSO₄ × 7 H₂O 0.10 г

CoSO₄ × 7 H₂O 0.18 г

CaCl₂ × 2 H₂O 0.10 г

ZnSO₄ × 7 H₂O 0.18 г

CuSO₄ × 5 H₂O 0.01 г

KAl(SO₄)₂ × 12 H₂O 0.02 г

H₃BO₃ 0.01 г

Na₂MoO₄ × 2 H₂O 0.01 г

NiCl₂ × 6 H₂O 0.03 г

Na₂SeO₃ × 5 H₂O 0.30 мг

Na₂WO₄ × 2 H₂O 0.40 мг

Дистиллированная вода 1000.0 мл

Растворить нитрилотриуксусную кислоту, довести pH до 6.5 с помощью KOH, внести остальные соли. Довести объем до 1000.0 мл. Довести pH до 7.0, используя KOH.

Раствор витаминов:

Биотин 2.0 мг

Фолиевая кислота 2.0 мг

Пиридоксин-HCl 10.0 мг

Тиамин-HCl 5.0 мг

Рибофлавин 5.0 мг

Никотиновая кислота 5.0 мг

Ca-D-пантотенат 5.0 мг

Витамин B₁₂ 0.10 мг

п-Аминобензойная кислота 5.0 мг

α-Липоевая кислота 5.0 мг

Дистиллированная вода 1000.0 мл

Растворить ингредиенты (кроме карбоната и сульфида), довести рН до 8.0, прокипятить 10 мин. и продуть среду 100% газом N₂ в течение 30 минут, чтобы сделать ее бескислородной. Разлить под N₂ в пробирки Hungate (10 мл) и автоклавировать. Добавить сульфид из стерильного бескислородного исходного раствора, приготовленного в присутствии 100 % газообразного азота, и карбонат из стерильного исходного раствора, приготовленного в смеси 80 % азота и 20 % газообразного азота. Стерилизовать раствор витаминов фильтрованием  и асептически добавить 100 мкл в пробирку Хангейта. При необходимости довести рН полной среды до 8,0.

Последнее изменение: 01.04.2022