482. СРЕДА ДЛЯ THERMODESULFOVIBRIO (THDVM)

Na₂SO₄ 4.00 г

Na₂HPO₄ 0.20 г

NH₄Cl 0.25 г

MgCl₂ x 6 H₂O 0.40 г

KCl 0.50 г

CaCl₂ x 2 H₂O 0.15 г

Раствор микроэлементов (см. ниже) 10,00 мл

Дрожжевой экстракт 1,0 г

Na-DL-лактат 2,50 г

Раствор на-резазурина (0,1% мас./об.) 0,50 мл

NaHCO₃ 1.30 г

Витаминный раствор (см. ниже) 10,00 мл

Na-тиогликолят 0,20 г

L-Аскорбиновая кислота 0,20 г

Дистиллированная вода 1000,00 мл

Раствор микроэлементов:

MgSO₄ x 7 H₂O 3.00 г

MnSO₄ x H₂O 0.50 г

NaCl 1.00 г

FeSO4 x 7 H₂O 0.10 г

CoSO₄ x 7 H₂O 0.18 г

CaCl₂ x 2 H₂O 0.10 г

ZnSO₄ x 7 H₂O 0.18 г

CuSO₄ x 5 H₂O 0.01 г

AlK(SO₄)₂ x 12 H₂O 0.02 г

H₃BO₃ 0.01 г

Na₂MoO₄ x 2 H₂O 0.01 г

NiCl₂ x 6 H₂O 0.03 г

Na₂SeO₃ x 5 H₂O 0.30 мг

Na₂WO₄ x 2 H₂O 0.40 мг

Дистиллированная вода 1000,00 мл

Сначала растворите нитрилотриуксусную кислоту и доведите pH до 6,5 с помощью КОН, затем добавьте минералы. Окончательно доведите pH до 7,0 с помощью КОН.

Витаминный раствор:

Витамин В₁₂ 100,00 мг

p-Аминобензойная кислота 80,00 мг

D-(+)-биотин 20,00 мг

Никотиновая кислота 200,00 мг

Пантотенат кальция 100,00 мг

Пиридоксина гидрохлорид 300,00 мг

Тиамин-HCl x 2 H₂O 200,00 мг

Дистиллированная вода 1000,00 мл

Растворите ингредиенты, за исключением бикарбоната, витаминов, тиогликолата и аскорбиновой кислоты, затем продуйте среду 100% газообразным N₂ в течение 30–45 минут, чтобы сделать ее бескислородной. Распределите среду в той же газовой атмосфере в бескислородные пробирки типа Хангейта или флаконы с сывороткой и автоклавируйте. Добавте витамины, тиогликолят и аскорбиновую кислоту из бескислородных исходных растворов, приготовленных в атмосфере 100% газа N₂ и стерилизованных фильтрованием, и бикарбонат из стерильного бескислородного исходного раствора, приготовленного в атмосфере газовой смеси 80% N₂ и 20% CO₂. Перед использованием при необходимости доведите pH полной среды до 8,0.

Изменения внесены: 13.01.2024