492. СРЕДА ДЛЯ CA. VULCANISAETA MOUTNOVSKIA (CVMM)

NH₄Cl 0.33 г

KCl 0.33 г

MgCl₂·x 2 H₂O 0.33 г

CaCl₂·x 6 H₂O 0.33 г

KH₂PO₄ 0.33 г

Na₂S·x 9 H₂O 0.5 г

Дрожжевой экстракт 1,0 г

Раствор микроэлементов (см. ниже) 1 мл

Витаминный раствор (см. ниже) 1 мл.

Сульфид натрия 0,5 г

Ресазурин 1,0 мг

Na₂SO₄ 1,0 г

So 10,0 г

Дистиллированная вода 1000 мл

Раствор микроэлементов:

(NH₄)₂Fe(SO₄)₂ x 6 H₂O (соль Мора) 784.0 мг

HCl (concentrated) 5.0 мл

CoCl₂ x H₂O 238.0 мг

(NH₄)₂Ni(SO₄)₂ x 6 H₂O 395.0 мг

Na₂MoO₄ x 2 H₂O 24.0 мг

Na₂WO₄ x 2 H₂O 33.0 мг

ZnSO₄ x 7 H₂O 144.0 мг

CuCl₂ x 2 H₂O 2.0 мг

Na₂SeO₄ 94.0 мг

H₃BO₃ 6.0 мг

MnCl₂ x 4 H₂O 99.0 мг

Дистиллированная вода 995,0 мл

Соль Мора растворить сначала в концентрированной HCl, затем смешать с дистиллированной водой и остальные соли растворить в указанной последовательности.

Витаминный раствор:

Биотин 20,0 мг

Фолиевая кислота 20,0 мг

Пиридоксин 0,1 мг

Рибофлавин 50,0 мг

Пантотеновая кислота 50,0 мг

p-Аминобензойная кислота 50,0 мг

Тиамин-HCl 50,0 мг

Никотиновая кислота 50,0 мг

Витамин В₁₂ 1,0 мг

Липоевая кислота 50,0 мг

Дистиллированная вода 1000,0 мл

Довести pH среды до 4,8 добавлением 3 н. HCl. Среду распределить порциями по 5 мл в пробирки Хангейта емкостью 17 мл и свободное пространство заполнить CO₂. Растворить ингредиенты, за исключением бикарбоната, витаминов, тиогликолата и аскорбиновой кислоты, затем продуть среду 100% газообразным N₂ в течение 30–45 минут, чтобы сделать ее бескислородной. Добавить витамины из бескислородных исходных растворов, приготовленных в атмосфере 100% газа N₂ и стерилизованных фильтрованием, и бикарбонат из стерильного бескислородного исходного раствора, приготовленного в атмосфере газовой смеси 80% N₂ и 20% CO₂.

Изменения внесены: 17.01.2024