258. СРЕДА ДЛЯ NOCARDIOIDES AQUATICUS

Основная среда (см. ниже) 600.0 мл

Искусственная морская вода (см. ниже) 400.0 мл

pH 7.5

Основная среда:

Пептон 0.25 г

Дрожжевой экстракт 0.25 г

Раствор глюкозы (2.5%) 10.0 мл

Раствор витаминов по Staley, двойная концентрация (см. ниже ): 5.0 мл

Минеральная среда по Hutner (см. ниже) 20.0 мл

Агар 15.0 г

Дистиллированная вода 965.0 мл

Искусственная морская вода:

NaCl 23.477 г

Na₂SO₄ 3.917 г

MgCl₂ × 6 H₂O 4.981 г

CaCl₂ 1.102 г

NaHCO₃ 192.0 мг

KCl 664.0 мг

KBr 6.0 мг

H₃BO₃ 26.0 мг

SrCl₂ 24.0 г

NaF 3.0 мг

Дистиллированная вода 1000.0 мл

Минеральная среда по Hutner:

Нитрилотриуксусная кислота 10.0 г

MgSO₄ × 7 H₂O 29.7 г

CaCl₂ × 2 H₂O 3.34 г

Na₂MoO₄ × 2 H₂O 12.67 мг

FeSO₄ × 7 H₂O 99.0 мг

Раствор солей металлов “44” (см. ниже) 50.0 мл

Дистиллированная вода до 1000.0 мл.

Растворить нитрилотриуксусную кислоту, нейтрализуя раствор внесением KOH, затем внести остальные соли. Довести pH до 7.2, используя KOH или H₂SO₄.

Раствор солей металлов “44”:

Этилендиаминтетраацетат Na 250.0 мг

ZnSO₄ × 7 H₂O 1095.0 мг

FeSO₄ × 7 H₂O 500.0 мг

MnSO₄ × 7 H₂O 154.0 мг

CuSO₄ × 5 H₂O 39.0 мг

Co(NO₃)₂ × 6 H₂O 24.8 мг

Na₂B₄O₇ × 10 H₂O 17.7 мг

Дистиллированная вода 1000.0 мл

Растворить ЭДТА, добавив несколько капель концентрированной серной кислоты, чтобы замедлить осаждение ионов тяжелых металлов.

Раствор витаминов по Staley, двойная концентрация:

Витамин B₁₂ 0.2 мг

Биотин 4.0 мг

Тиамин-HCl 10.0 мг

D-Ca-пантотенат 10.0 мг

Фолиевая кислота 4.0 мг

Рибофлавин 10.0 мг

Никотинамид 10.0 мг

п-Аминобензойная кислота 10.0 мг

Пиридоксин 20.0 мг

Дистиллированная вода 1000.0 мл

Хранить в темном месте при 5°C.

Стерилизовать основную среду (без глюкозы и раствора витаминов) и искусственную морскую воду отдельно при 121°C 15 мин. После охлаждения до 60°C асептически внести в основную среду стерилизованные фильтрованием растворы глюкозы и витаминов. Добавить искусственную морскую воду и тщательно перемешать.

Последнее изменение: 25.06.2021